[發明專利]一種復合凝膠的制備方法及其在誘導干細胞成軟骨分化中的應用有效
| 申請號： | 201710818025.6 | 申請日： | 2017-09-12 |
| 公開（公告）號： | CN107522876B | 公開（公告）日： | 2020-05-15 |
| 發明（設計）人： | 鄭立;趙勁民;陸真慧;秦雄;吳洋;許富本 | 申請（專利權）人： | 廣西醫科大學 |
| 主分類號： | C08J3/09 | 分類號： | C08J3/09;C08J3/24;C08L89/00;C08K3/04;A61L27/08;A61L27/24;A61L27/52;A61L27/54 |
| 代理公司： | 北京輕創知識產權代理有限公司 11212 | 代理人： | 楊立;陳璐 |
| 地址： | 530021 廣*** | 國省代碼： | 廣西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 復合 凝膠 制備 方法 及其 誘導 干細胞 軟骨 分化 中的 應用 | ||
1.一種復合凝膠的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
(1)膠原的制備，采用濃度為0.4-0.6M醋酸作為溶劑加入一定量的無菌牛皮膠原凍干片制備濃度為10-20mg/mL的無菌牛皮膠原凍干品-醋酸溶液，待無菌牛皮膠原凍干品充分溶脹后，于冰上不斷攪拌使膠原充分溶解；
(2)京尼平原液的制備，取一定量的京尼平完全溶于無水乙醇中，并加入PBS定容，制備濃度為60-200mg/mL的京尼平原液；
(3)復合凝膠的制備，取一定體積由步驟(1)制備的膠原并加入一定體積的由步驟(2)制備的京尼平原液和碳點，制備濃度分別為0.4-2vol％的京尼平和碳點的混合液，充分混勻后置于37℃恒溫條件下靜置15分鐘，得到京尼平-膠原-碳點復合凝膠。
2.根據權利要求1所述的復合凝膠的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
(1)膠原的制備，采用濃度為0.45-0.55M醋酸作為溶劑加入一定量的無菌牛皮膠原凍干片制備濃度為12-18mg/mL的無菌牛皮膠原凍干品-醋酸溶液，待無菌牛皮膠原凍干品充分溶脹后，于冰上不斷攪拌使膠原充分溶解；
(2)京尼平原液的制備，取一定量的京尼平完全溶于無水乙醇中，并加入PBS定容，制備濃度為100-160mg/mL的京尼平原液；
(3)復合凝膠的制備，取一定體積由步驟(1)制備的膠原并加入一定體積的由步驟(2)制備的京尼平原液和碳點，制備濃度分別為0.7-1.3vol％的京尼平和碳點的混合液，充分混勻后置于37℃恒溫條件下靜置15分鐘，得到京尼平-膠原-碳點復合凝膠。
3.根據權利要求2所述的復合凝膠的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
(1)膠原的制備，采用濃度為0.5M醋酸作為溶劑加入一定量的無菌牛皮膠原凍干片制備濃度為15mg/mL的無菌牛皮膠原凍干品-醋酸溶液，待無菌牛皮膠原凍干品充分溶脹后，于冰上不斷攪拌使膠原充分溶解；；
(2)京尼平原液的制備，取一定量的京尼平完全溶于無水乙醇中，并加入PBS定容，制備濃度為133mg/mL的京尼平原液；
(3)復合凝膠的制備，取一定體積由步驟(1)制備的膠原并加入一定體積的由步驟(2)制備的京尼平原液和碳點，制備濃度分別為1vol％的京尼平和碳點的混合液，充分混勻后置于37℃恒溫條件下靜置15分鐘，得到京尼平-膠原-碳點復合凝膠。
4.根據權利要求1-3中任一項所述的復合凝膠的制備方法，其特征在于，所述步驟(2)中所述京尼平與無水乙醇的用量比為1mg京尼平對應1-3μL的無水乙醇。
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