[發明專利]用于降解煙葉中蛋白質的SMXP-03菌株及其應用

有效

• 申請號: 201710817212.2
• 申請日: 2017-09-12
• 公開（公告）號: CN107475154B
• 公開（公告）日: 2020-06-23
• 發明（設計）人: 楊宗燦;劉向真;馮穎杰;許衡;楊永鋒;彭玉富;李家美;張耀廣
• 申請（專利權）人: 河南中煙工業有限責任公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A24B15/20;C12R1/07
• 代理公司: 鄭州聯科專利事務所(普通合伙) 41104
• 代理人: 時立新

1.一株用于降解煙葉中蛋白質的SMXP-03菌株，其特征在于，該菌株屬芽孢桿菌屬Bacillus，保藏名稱為：短小芽孢桿菌 SMXP-03，分類學名稱為Bacillus subtilis SMXP-03，已于2017年6月12日保藏于武漢中國典型培養物保藏中心，保藏編號為CCTCC NO：M2017291。

2.利用權利要求1所述用于降解煙葉中蛋白質的SMXP-03菌株所制備的菌劑，其特征在于，通過如下步驟制備而成：

（1）活化菌種，將SMXP-03菌株置于NA固體培養基上，活化培養；

（2）制備種子液，刮取步驟（1）中所培養的菌體，接種于液體NA培養基中，30℃搖床培養；

（3）擴大培養，將步驟（2）中種子液轉接NA液體培養基，培養至OD₆₀₀=1.8~2.0；

（4）制備菌劑，將步驟（3）中擴大培養產物離心，棄上清，然后加入無菌水進行懸浮，調整活菌數為（9~10）×10⁷個/mL。

3.如權利要求2所述利用SMXP-03菌株所制備的菌劑，其特征在于，以g/L計，

所述NA固體培養基組成為：胰蛋白胨10，牛肉膏3，NaCl 5，瓊脂粉 12；

所述NA液體培養基組成為：胰蛋白胨10，牛肉膏3，NaCl 5。

4.權利要求2或3所述利用SMXP-03菌株所制備的菌劑在煙葉中的應用，其特征在于，用于降解煙葉中蛋白質。

5.如權利要求4所述利用SMXP-03菌株所制備的菌劑在煙葉中的應用，其特征在于，按煙葉質量的1~3%比例，將制備好的菌劑均勻噴灑于煙葉表面，在溫度35℃~40℃、50%~80%濕度條件下，發酵處理60 h ~90 h，發酵完成后，再將煙葉加熱處理使細菌及其產生的蛋白質酶失活即可。

6.如權利要求5所述利用SMXP-03菌株所制備的菌劑在煙葉中的應用，其特征在于，將制備好的菌劑均勻噴灑于煙葉表面后，35℃、75%濕度條件下，處理60h。