[發明專利]一種生物微乳液小膠束、膀胱癌細胞懸液及小鼠氣囊膀胱癌模型的構建方法

有效

• 申請號: 201710814807.2
• 申請日: 2017-09-12
• 公開（公告）號: CN107523543B
• 公開（公告）日: 2020-07-14
• 發明（設計）人: 徐萬海;彭鋰;王璐;郭鵬宇;王志超
• 申請（專利權）人: 哈爾濱醫科大學
• 主分類號: C12N5/09
• 分類號: C12N5/09
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211
• 代理人: 鄧宇

1.一種生物微乳液小膠束，其特征在于，所述生物微乳液小膠束是通過如下步驟進行制備的：

1)將氨基的樹狀大分子PAMAM用促腫瘤生長液配置成10％(質量)的PAMAM溶液；所述促腫瘤生長液是將VEGF人重組蛋白和Endocan人重組蛋白加入到DMED培養液中配置成促腫瘤生長液；

2)將COOH-PEG-OH加入到步驟1)獲得的10％PAMAM溶液中，混合均勻；

3)將5％(質量)醛基化的右旋糖酐與步驟2)獲得的溶液按照1:1的體積比進行混合，獲得生物微乳液小膠束；步驟2)所述10％(質量)PAMAM溶液和COOH-PEG-OH的質量比為1:7；所述VEGF人重組蛋白和Endocan人重組蛋白在促腫瘤生長液中的終濃度均為10μg/mL。

2.一種用于構建膀胱癌模型的膀胱癌細胞懸液，其特征在于，所述膀胱癌細胞懸液是將對數生長期的膀胱癌細胞進行消化離心，棄上清后將膀胱癌細胞與權利要求1的生物微乳液小膠束進行混合，獲得膀胱癌細胞懸液。

3.根據權利要求2所述的膀胱癌細胞懸液，其特征在于，所述生物微乳液小膠束與膀胱癌細胞的體積比為(1:1)-(1:2)。

4.根據權利要求2所述的膀胱癌細胞懸液，其特征在于，所述生物微乳液小膠束與膀胱癌細胞的體積比為1:1。

5.根據權利要求2所述的膀胱癌細胞懸液，其特征在于，所述消化是用0.25％胰蛋白酶消化3min-5min。

6.權利要求2所述的膀胱癌細胞懸液在構建膀胱癌模型中的應用。

7.一種小鼠氣囊膀胱癌模型的構建方法，其特征在于，具體包括如下步驟：

步驟一：取5周齡小鼠，麻醉小鼠后在小鼠背部選擇一塊區域將鼠毛剔除干凈，注入無菌空氣3mL，以后每隔一天補充注入無菌空氣1mL，5天后氣囊構建完畢；

步驟二：將權利要求2制備獲得的膀胱癌細胞懸液接種于步驟一構建的氣囊的最低點，并在接種結束后，繼續保持體位2min至生物微乳液小膠束凝固，之后每隔一天注入無菌空氣1mL，直至形成腫瘤，即獲得小鼠氣囊膀胱癌模型。