[發明專利](Anti-CD40 mAb)-CTLA4融合蛋白及其用途

有效

• 申請號: 201710810984.3
• 申請日: 2017-09-13
• 公開（公告）號: CN107474143B
• 公開（公告）日: 2020-08-11
• 發明（設計）人: 張軍方
• 申請（專利權）人: 深圳市因諾賽生物科技有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;A61K39/395;A61K39/00;A61P37/06;A61P37/02
• 代理公司: 深圳冀深知識產權代理有限公司 44597
• 代理人: 張進

本發明公開了一種抗免疫排斥雙功能分子。本發明通過將抗人CD40抗體與CTLA4蛋白融合表達，制備出了(Anti?CD40 mAb)?CTLA4融合蛋白，所述融合蛋白能夠同時阻斷CD40?CD154與CD28?B7通路，具有同時阻斷T、B細胞的活化，誘導免疫耐受的功能。該發明用于減少或治療移植排斥和移植物抗宿主病以及治療自身免疫病的用途。

技術領域

本發明涉及抗體藥物技術領域，尤其涉及一種通過將抗人CD40抗體與CTLA4蛋白融合表達，制備出了(Anti-CD40 mAb)-CTLA4融合蛋白及其方法。該發明用于減少或治療移植排斥和移植物抗宿主病以及治療自身免疫病的用途。

背景技術

本發明涉及抗CD40抗體與CTLA4蛋白融合表達的方法以及用途，例如，降低器官移植中的免疫排斥，誘導免疫耐受治療自身免疫性疾病。

降低免疫排斥是治療器官移植和自身免疫病共同面臨的問題。自身免疫病影響著世界5％的人口，嚴重的自身免疫病如類風濕性關節炎、系統性紅斑狼瘡可引起致殘甚至死亡。器官移植作為治療器官衰竭的重要手段，每年僅中國就有150萬患者需要器官移植，然而移植的器官長期存活至今仍面臨重大挑戰，宿主免疫排斥導致移植物功能喪失。目前臨床應用的非特異性免疫抑制藥物雖然短期能夠抑制排斥反應，但是長期結果仍然不足，并且這些藥劑的使用極大地增加了心血管疾病、感染和惡性腫瘤的風險。

T細胞與B細胞之間的相互作用在免疫反應中至關重要，很多位于T細胞及B細胞表面的分子在免疫反應中表達量會增多。T細胞的活化依賴兩種信號，一種是T細胞受體(TCR)識別并結合抗原遞呈細胞(APC)表面的MHC-抗原肽介導的第一信號，另一種是T細胞表面的CD28與APC表面的B7分子的結合提供的第二信號，只有兩個信號都存在時T細胞才被激活，若缺乏第二信號的輔助，T細胞則處于克隆無能或無應答狀態。細胞毒性T淋巴細胞相關抗原-4(cytotoxic T lymphocyte associated antigen 4,CTLA-4)與CD28分子在基因結構、染色體定位、序列的同源性都具有非常相近的關系，都是B7的受體，主要表達于被激活的T細胞表面。但是CTLA-4與CD28的功能是相反的，CTLA-4與B7結合后抑制T細胞的激活，起負調節作用。CTLA-4與B7的結合的親和力比CD28與B7的親和力高10～20倍，只需少量CTLA-4即可阻斷CD28與B7的結合，抑制T細胞的活化。CTLA4-Ig是通過基因重組產生的CTLA4分子胞外功能區與免疫球蛋白IgG恒定區結合的融合蛋白，與B7分子具有高度的親和力可以和CD28競爭結合APC上的B7家族分子CD80(B7-1)和CD86(B7-2)，阻斷CD28與B7的信號通路。

CD40-CD154作為重要的共刺激信號通路，介導B細胞的激活、增殖、分化以及T細胞的激活等重要過程，阻斷該通路被公認為可以顯著降低免疫排斥反應。早期針對CD154的抗體在臨床試驗中引起了嚴重血栓反應而被終止開發，因此研究方向轉為靶向CD40抗體的開發。大量體內試驗證實，針對CD40抗體可以顯著降低免疫排斥，且不會引起血栓等毒副作用，具有良好的開發前景。CD40表達在B細胞、巨噬細胞和樹突狀細胞表面，對B細胞活化、免疫球蛋白類型轉換至關重要，理想的CD40抗體是可以抑制B細胞的活化而不激活B細胞或引起B細胞減少。

發明內容