[發明專利]一種檢測孔雀石綠的SiO2@ROX納米粒子熒光探針陣列的制備方法

有效

• 申請號: 201710808902.1
• 申請日: 2017-09-09
• 公開（公告）號: CN107421938B
• 公開（公告）日: 2019-08-16
• 發明（設計）人: 高大明;侯晶晶;蘇學軍;王中華;席小倩;漆天瑤;周楊群;陳紅
• 申請（專利權）人: 合肥學院;泰州職業技術學院
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種檢測孔雀石綠的SiO₂@ROX納米粒子熒光探針陣列的制備方法，其特征在于：所述SiO₂@ROX納米粒子表面擁有氨丙基，其表面的氨丙基可進一步與目標分子孔雀石綠作用，使其表面富電子的氨丙基作為電子供體同缺電子的孔雀石綠受體之間通過電荷轉移作用形成藍綠色的復合物，此藍綠色復合物通過熒光共振能量轉移可以吸收SiO₂@ROX納米粒子熒光探針陣列的發射光譜帶為紅色熒光，利用熒光強度的改變，實現對孔雀石綠的檢測，所述SiO₂@ROX納米粒子熒光探針陣列的制備過程包括如下三個步驟：

1.1第一步是ROX-APTS前驅體的制備：首先，分別準確量取10 mL ~ 12 mL無水乙醇，1mL ~ 3 mL 3-氨丙基三乙氧基硅烷（3-aminopropyl triethoxysilane，APTS），100 μL ~300 μL 5-羧基-X-羅丹明琥珀酰亞胺酯（5-Carboxy-X-rhodamine N-succinimidylester，ROX）置于50 mL單頸磨口燒瓶中，然后加入1 mL ~ 3 mL去離子水，將上述單頸磨口燒瓶在常溫下遮光以600 rpm ~ 700 rpm攪拌10 h ~ 12 h，最后得到含有過量未反應APTS的ROX-APTS前驅體的溶液；

1.2第二步是表面修飾ROX染料及氨丙基的SiO₂納米粒子熒光探針制備：首先，依次準確量取87.1 mL ~ 89.1 mL無水乙醇，2.6 mL ~ 4.6 mL正硅酸四乙酯（tetraethylorthosilicate，TEOS），10.9 mL ~ 12.9 mL的氨水置于250mL單頸磨口燒瓶中，再加入2 mL ~ 4 mL去離子水，常溫下將上述250 mL單頸磨口燒瓶用磁力攪拌器在N₂氛圍下攪拌10 h ~ 12 h，然后將上述制備的含有過量未反應的APTS的ROX-APTS前驅體的溶液加入到上述250 mL單頸磨口燒瓶中，繼續用磁力攪拌器在N₂氛圍下遮光攪拌20 h ~ 24h，得到表面修飾了氨丙基和ROX染料的SiO₂納米粒子懸浮液，用無水乙醇超聲清洗三次，最后將其分散在無水乙醇中，得到表面富含氨丙基和ROX染料的SiO₂@ROX納米粒子熒光探針；

1.3第三步是SiO₂@ROX納米粒子熒光探針陣列制備：首先，采用光刻膠聚甲基丙烯酸乙酯均勻的涂抹在硅片上，在光掩膜下經過紫外燈曝光后，沉浸在顯影液中顯影，然后通過微加工技術和等離子蝕刻的方法，在硅片表面制作出微洞陣列，留在硅片表面的光掩膜用丙酮清洗去除，然后將上述SiO₂@ROX納米粒子熒光探針的懸浮液滴到硅片上，讓其自然干燥，微洞里自發地填滿了納米粒子熒光探針，用擦鏡紙擦去上述硅片表面上的SiO₂@ROX納米粒子，留在微洞里的SiO₂@ROX納米粒子構成了熒光探針陣列，得到能夠檢測目標分析物的SiO₂@ROX納米粒子熒光探針陣列。

2.根據權利要求1所述的一種檢測孔雀石綠的SiO₂@ROX納米粒子熒光探針陣列的制備方法，其特征是：所述SiO₂@ROX納米粒子熒光探針基質是二氧化硅。

3.根據權利要求1所述的一種檢測孔雀石綠的SiO₂@ROX納米粒子熒光探針陣列的制備方法，其特征是：所述SiO₂@ROX納米粒子熒光探針粒徑可控，可以通過調節TEOS、氨水和水的量來加以控制。

4.根據權利要求1所述的一種檢測孔雀石綠的SiO₂@ROX納米粒子熒光探針陣列的制備方法，其特征是：所述SiO₂@ROX納米粒子熒光探針制備過程中用無水乙醇清洗三次，其目的是去除懸浮液中雜質和未反應的底物。

5.根據權利要求1所述的一種檢測孔雀石綠的SiO₂@ROX納米粒子熒光探針陣列的制備方法，其特征是：所述SiO₂@ROX納米粒子熒光探針制備過程中正硅酸四乙酯發生水解反應，生成SiO₂凝膠納米粒子。