[發明專利]一種北葶新苷E及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 201710796989.5
• 申請日: 2017-09-06
• 公開（公告）號: CN107446008B
• 公開（公告）日: 2020-10-02
• 發明（設計）人: 馮衛生;李孟;鄭曉珂;楊方方;張靖柯;趙璇;張志廣;呂錦錦
• 申請（專利權）人: 河南中醫藥大學
• 主分類號: C07H15/203
• 分類號: C07H15/203;C07H1/08;A61K31/7034;A61P9/00
• 代理公司: 鄭州天陽專利事務所(普通合伙) 41113
• 代理人: 聶孟民

本發明涉及北葶新苷E及其制備方法與應用，可有效解決從北葶藶子中提取北葶新苷E及用于制備治療心肌細胞H9c2損傷藥物的問題，北葶藶子清炒，加水煎煮提取，提取液濃縮，醇沉，上清液濃縮至無醇味，上Dianion HP?20柱，用水、乙醇梯度洗脫，收集60%乙醇洗脫液，用水溶解，離心，沉淀用甲醇溶解，硅膠拌樣，二氯甲烷︰甲醇為流動相梯度洗脫，收集二氯甲烷、甲醇5︰1的流份用水溶解，通過ODS柱色譜，用水洗脫，洗脫液用半制備HPLC分離，上YMC?Pack ODS?AQ色譜柱，流動相為乙腈：水=10：90，收集保留時間t_R=20.7~30.0min的流份，濃縮干燥，得北葶新苷E。本發明原料豐富，制備方法科學合理，該化合物對心肌細胞有保護作用，可有效用于制備治療心肌細胞H9c2損傷的藥物。

技術領域

本發明涉及醫藥，特別是一種北葶新苷E及其制備方法與應用。

背景技術

葶藶子為常用中藥材，始載于《神農本草經》，列為草部下品，該藥味辛、苦，性大寒，歸肺與膀胱經，具有宣泄平喘、行水消腫的功效。2015版《中國藥典》收錄的“葶藶子”有南北之分，其中十字花科植物獨行菜Lepidium apetalum Willd.的干燥成熟種子習稱“北葶藶子”，而播娘蒿Descurainia Sophia(L.)Webbex Prantl.的干燥成熟種子習稱“南葶藶子”。

從研究的試驗中發現，北葶藶子中含有一種鼠李糖酚苷類化合物，即北葶新苷E，但該類化合物如何從北葶藶子中提取出來，并有效用于制備治療心肌細胞H9c2損傷的藥物，至今未見有公開報導。

發明內容

針對上述情況，為克服現有技術之缺陷，本發明之目的就是提供一種北葶新苷E及其制備方法與應用，可有效解決從北葶藶子中提取北葶新苷E及用于制備治療心肌細胞H9c2損傷藥物的問題。

本發明解決的技術方案是，一種北葶新苷E及其制備方法與應用，其中北葶新苷E分子式為C₁₂H₁₆O₇，分子結構式見圖1，該北葶新苷E的制備方法是：

取北葶藶子，采用清炒法炮制，溫度240℃，炒制5.5min，取炒制的北葶藶子，每次加北葶藶子10倍重量的水煎煮提取三次，每次1.5h，提取液減壓濃縮至相當于含生藥2g/mL的浸膏，在室溫下，浸膏用浸膏5倍體積、體積濃度為80％的乙醇醇沉，靜置1h，將上清液倒出，沉淀再加入浸膏5倍體積、體積濃度為80％的乙醇醇沉，如此反復操作4次，將所得上清液濃縮至無醇味，上Dianion HP-20柱，依次用10倍柱體積的水、體積濃度20％、40％、60％乙醇梯度洗脫，流速6mL/min，收集60％乙醇洗脫液，記為組分A；在室溫下，組分A用5倍體積的水溶解，用6000r/min的轉速離心15min，溫度20℃，所得上清液記為水溶物組分B1，離心之后的沉淀記為水不溶物B2；組分B2用甲醇溶解，硅膠拌樣，組分B2與硅膠用量為1︰1，以二氯甲烷︰甲醇為流動相梯度洗脫，流速10mL/min，所用比例依次為100:0、20:1、10:1、5:1、1:1，每200mL檢識一次，每個流動相的用量以茴香醛-濃硫酸薄層檢識來判斷，3d洗脫完畢，合并二氯甲烷︰甲醇＝5︰1的流份標為組分C4；組分C4用水溶解，通過ODS柱色譜，用水洗脫，流速3mL/min，以茴香醛-濃硫酸薄層檢識來判斷每個梯度洗脫終點，每20mL檢識一次，4h洗脫完畢，收集水洗脫部位標為組分D1；組分D1用半制備HPLC分離，上規格型號為：250×10mm，粒徑5μm，孔徑12nm的YMC-Pack ODS-AQ色譜柱，流動相為乙腈：水＝10：90，流速3mL/min，收集保留時間t_R＝20.7～30.0min的流份，濃縮干燥，得到化合物北葶新苷E。

該化合物能夠顯著提高細胞活力，有效用于制備治療心肌細胞H9c2損傷的藥物。