[發明專利]一種評價煙草主流煙氣誘發炎癥反應用動物體外氣管模型建立方法、評價方法

有效

• 申請號: 201710796458.6
• 申請日: 2017-09-06
• 公開（公告）號: CN107607699B
• 公開（公告）日: 2019-12-27
• 發明（設計）人: 陳雪梅;李翔;謝復煒;劉惠民;薛博涵;李玉萍;周淑婭;石小雨;華辰鳳;喬梁峻;康彧
• 申請（專利權）人: 中國煙草總公司鄭州煙草研究院;鄭州大學
• 主分類號: G01N33/50
• 分類號: G01N33/50;G01N33/68;G01N33/533;G01N33/535;G01N33/543;C12Q1/6883
• 代理公司: 41119 鄭州睿信知識產權代理有限公司
• 代理人: 牛愛周

本發明涉及一種評價煙草主流煙氣誘發炎癥反應用動物體外氣管模型建立方法、評價方法，屬于卷煙危害評價技術領域。本發明的建立方法，包括如下步驟：1)分離氣管環；2)體外培養步驟1)得到的氣管環；3)將步驟2)培養后的氣管環在煙氣冷凝物下暴露1?24h。評價煙草主流煙氣誘發炎癥反應的方法還包括：選擇評價指標，劃分評價標準；評價炎癥反應的程度。本發明的方法具有以下優點：1)煙氣暴露后氣管炎癥檢測方法的效率高；2)煙氣暴露后氣管炎癥檢測方法的具有良好的可重復性，體系穩定準確性高；3)使用范圍廣：該方法可以適用于卷煙主流煙氣、側流煙氣、環境煙氣等煙氣氣溶膠的體外暴露模型。

技術領域

本發明涉及一種評價煙草主流煙氣誘發炎癥反應用動物體外氣管模型建立方法、評價方法，屬于卷煙危害評價技術領域。

背景技術

吸煙能引起氣管以及肺部的炎癥，是慢性阻塞性肺氣腫(COPD)首要的危險因素。通過氣管的體外實驗可初步理解炎癥反應的作用機制及過程。煙氣冷凝物(cigarettesmoke， CS)在呼吸道造成組織損傷，這種損傷涉及CS誘導的氣道疾病和相關肺部疾病的發展，如慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)(Murray LA,Dunmore R,Camelo A,Da Silva CA,Gustavsson MJ,Habiel DM,Hackett TL,HogaboamCM,Sleeman MA,Knight DA.Acute cigarette smoke exposure activates apoptoticand inflammatory programs but a second stimulus is required to induceepithelial to mesenchymal transition in COPD epithelium.Respir Res.2017,18(1):82.)、氣道上皮細胞是CS的主要靶點(Cui Y,Liu KW, Liang Y,Ip MS,MakJC.Inhibition of monoamine oxidase-B by selegiline reduces cigarette smoke-induced oxidative stress and inflammation in airway epithelial cells.ToxicolLett.2017, 268:44-50.)。動物模型是研究發病機制和臨床防治的基礎，同時也是研究的一個難點。嚙齒類動物是動物模型的最佳選擇，一般常用大、小鼠模型是通過暴露在煙霧等方式造模的 (Smith KR1,Uyeminami DL,Kodavanti UP,Crapo JD,Chang LY,PinkertonKE.Inhibition of tobacco smoke-induced lung inflammation by a catalyticantioxidant.Free Radic Biol Med.2002 Oct 15；33(8):1106-14.Stringer KA,FreedBM,Dunn JS,Sayers S,Gustafson DL,Flores SC. Particulate phase cigarette smokeincreases MnSOD,NQO1,and CINC-1in rat lungs.Free Radic Biol Med.2004Nov 15；37(10):1527-33.)。

然而由于動物實驗建立COPD模型周期較長，且影響因素眾多，各類研究的結果很難精確地進行比較，是因為缺乏標準化的煙霧暴露和標準化的分析，包括香煙的品種不同、香煙的劑量、研究儀器、暴露設計以及廣泛的鼠種系等多種影響因素(煙氣加氣管滴注博萊霉素制備慢性阻塞性肺疾病大鼠模型及白藜蘆醇對該疾病的干預作用及機制研究周敏博士論文2008)，因此非常有必要借助體外模型進一步研究CS染毒后氣道炎癥的機制。