[發(fā)明專利]一種護(hù)膚品的制備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710794154.6
• 申請日: 2017-09-06
• 公開（公告）號: CN107519032A
• 公開（公告）日: 2017-12-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 武曉丹
• 申請（專利權(quán)）人: 武曉丹
• 主分類號: A61K8/60
• 分類號: A61K8/60;A61Q19/08;C12N15/82;A01H5/00
• 代理公司: 溫州名創(chuàng)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司33258
• 代理人: 陳加利

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種護(hù)膚品的其制備方法，特別地涉及一種利用植物為發(fā)生器制造生物活性物質(zhì)作為抗衰老因子添加入護(hù)膚品的方法。

背景技術(shù)

表皮由多層上皮細(xì)胞組成，對環(huán)境和刺激起到保護(hù)屏障作用。表皮既是在基底層內(nèi)部發(fā)生的細(xì)胞增生的場所，還是在中間層細(xì)胞分化的場所，最終形成一種完全分化的保護(hù)結(jié)構(gòu)，即角質(zhì)層。表皮主要由角質(zhì)形成細(xì)胞組成，這些細(xì)胞在表皮的最深層增生，然后開始分化，并從表皮的深層遷移到表面，完成該循環(huán)大概需要20天。該過程對應(yīng)于多種特定基因按照一定的順序和協(xié)調(diào)的方式接連地被激活、隨后被抑制的表達(dá)。

隨著生物學(xué)，特別是分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，給美容化妝品行業(yè)帶來了全新的發(fā)展機(jī)遇，護(hù)膚品已經(jīng)從精細(xì)化工美容、植物美容向生物美容、基因美容發(fā)展。生物護(hù)膚品的主要成分生物活性多肽大部分是細(xì)胞生長因子，它們在體內(nèi)含量極微，但生物活性極高，對多種細(xì)胞生理功能和代謝活動(dòng)發(fā)揮生物調(diào)節(jié)作用，直接、間接地影響多種類型細(xì)胞的生長、分裂、分化、增殖和遷移，在美容護(hù)膚、整形外科、燒傷潰瘍以及各種皮膚病的傷口修復(fù)與愈合中有重要作用。

生物活性物質(zhì)微RNA(miRNA，miRNA)是一類在轉(zhuǎn)錄后水平上通過與靶基因mRNA的3'-非翻譯區(qū)(untranslated regions，UTR)結(jié)合后調(diào)控基因表達(dá)的小分子非編碼RNA。在細(xì)胞衰老中都發(fā)現(xiàn)有miRNA的異常表達(dá)，并且這些miRNA在細(xì)胞衰老的發(fā)生過程中扮演著重要的角色。

本發(fā)明采用微陣列芯片技術(shù)篩選表皮細(xì)胞衰老過程中的差異miRNA并進(jìn)行功能分析，首次發(fā)現(xiàn)并提供了與表皮細(xì)胞衰老相關(guān)的miRNA，并提供了所述含有抗衰老生物活性物質(zhì)的護(hù)膚品的制備方法。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種護(hù)膚品組合物及其制備方法。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，一種制備護(hù)膚品的方法，包括向護(hù)膚品中添加生物活性物質(zhì)。

進(jìn)一步地，所述生物活性物質(zhì)為miRNA。

更進(jìn)一步地，所述制備護(hù)膚品的方法具體步驟如下：

步驟1、構(gòu)建在植物中穩(wěn)定表達(dá)miRNA的載體，構(gòu)建miR-3667-5p、miR-381和miRNA-355表達(dá)的骨架載體，針對miR-3667-5p、miR-381和miRNA-355序列設(shè)計(jì)引物，利用重疊PCR擴(kuò)增方法獲得miR-3667-5p、miR-381和miRNA-355的前體序列，最后將miR-3667-5p、miR-381和miRNA-355的前體序列克隆到植物表達(dá)載體中表達(dá)；

步驟2、鑒定出陽性質(zhì)粒并轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌，栽培無菌苗，利用農(nóng)桿菌侵染法獲得植物愈傷，在誘芽培養(yǎng)基以及幼苗誘根培養(yǎng)基上培養(yǎng)植物愈傷至轉(zhuǎn)化植株，檢測確定轉(zhuǎn)化植株中獲得的miRNA為miR-3667-5p、miR-381和miRNA-355，獲得了含有與表皮細(xì)胞抗衰老相關(guān)的miR-3667-5p、miR-381和miRNA-355的植物，大面積種植含有與表皮細(xì)胞抗衰老相關(guān)的miR-3667-5p、miR-381和miRNA-355的植物，獲得與抗衰老護(hù)膚品相關(guān)的生物活性物質(zhì)miR-3667-5p、miR-381和miRNA-355；

步驟3、制備護(hù)膚品基質(zhì)，包括油相A與水相B，將油相部分加熱至82攝氏度，水相部分加熱至96攝氏度，高壓滅菌，冷卻到82攝氏度，將油相加入至水相中并同時(shí)攪拌至乳化生成護(hù)膚品基質(zhì)；

步驟4、制備抗衰老護(hù)膚品，成分比例如下：原料及配比為護(hù)膚品基質(zhì)1份，miRNA-134為0.1份，miRNA-1207為0.1份，miRNA-720為0.1份，乳化基質(zhì)冷卻至33攝氏度以下加入miRNA共0.3份，攪拌至混勻，獲得護(hù)膚品混合物。

優(yōu)選地，所述植物包括但不限于：禾本科、蕨科、菊科、唇形科、百合科、石蒜科、傘形科、十字花科、豆科、葫蘆科或其組合。

進(jìn)一步地，所述植物為十字花科植物。

更進(jìn)一步地，所述植物為擬南芥。

優(yōu)選地，所述誘芽培養(yǎng)基為以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基并附加0.5mg/L6-芐基腺嘌呤和0.1mg/Lα-萘乙酸的培養(yǎng)基。