[發明專利]一種樹蝴蝶精制多糖及其制備方法與應用

在審

• 申請號: 201710778412.1
• 申請日: 2017-09-01
• 公開（公告）號: CN107586345A
• 公開（公告）日: 2018-01-16
• 發明（設計）人: 陳健;耿佳歡;申超群;董芳
• 申請（專利權）人: 華南理工大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A61P35/00;A61P37/04;A61P39/06
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司44245
• 代理人: 陳智英

技術領域

本發明屬于食品的技術領域，具體涉及一種樹蝴蝶精制多糖及其制備方法與應用。

背景技術

多糖是除了蛋白質和核酸以外的一類重要的生物高分子化合物。現代藥理研究表明多糖具有多種生理活性，包括抗氧化、抗腫瘤、抗病毒、降血脂、延緩衰老、增強免疫功能等。而大多數高等植物來源的多糖均為無不良反應的物質，不會對機體產生較大的副作用，因此，從植物中分離的多糖在生物醫學上引起極大關注。目前已對百余種植物多糖進行了活性相關的研究報道。研究表明植物多糖可通過與免疫細胞表面的多種受體結合、激活不同的信號通路來調控動物機體內的免疫系統，包括：刺激巨噬細胞、T/B淋巴細胞、自然殺傷細胞的分泌或增殖；調節細胞因子的釋放；促進抗體的分泌；激活補體系統等。

對這些活性物質的作用機制也在不斷發展，其中多糖對非特異性誘導的免疫機制更受到人們的重視。植物多糖是最理想的免疫候選藥物。

樹蝴蝶為子囊地衣類(Ascolichenes)茶漬目(Lecanorales)牛皮葉科(Stictaceae)肺衣屬(Lobaria Hoffm)植物光肺衣、裂芽肺衣和網肺衣的干燥葉狀地衣體，具有良好的藥理作用，具有健脾利水、祛風止癢等功效。對樹蝴蝶多糖的研究報道幾乎沒有。大多數天然活性多糖是無毒副作用的天然綠色產品。隨著研究的不斷深入，天然多糖越來越成為食品、保健品、醫藥等領域的研究熱點。

發明內容

為了克服現有技術的不足和缺點，本發明的首要目的在于提供一種樹蝴蝶精制多糖的制備方法。

本發明的另一目的在于提供由上述制備方法制備得到的樹蝴蝶精制多糖，使其多糖獲得率較高。

本發明的再一目的在于提供上述樹蝴蝶精制多糖的應用。

本發明的目的通過下述方案實現：

一種樹蝴蝶精制多糖的制備方法，包括以下步驟：

(1)將樹蝴蝶在蒸餾水中進行回流提取，采用大孔吸附樹脂對提取液進行脫色處理，再采用沉淀劑進行沉淀，離心，收集沉淀物并干燥，得到樹蝴蝶粗多糖；

(2)將樹蝴蝶粗多糖配制成多糖溶液，轉入裝有經過預處理的DEAE-52樹脂的層析柱中，用蒸餾水洗脫，收集洗脫液，苯酚-硫酸法跟蹤檢測洗脫液，測定490nm下的吸光度，繪制洗脫曲線，同一吸收峰內的洗脫液合并；然后旋蒸濃縮，真空冷凍干燥，得到精制多糖，其中，蒸餾水洗脫得到的精制多糖記為LKY-I。

步驟(2)中所述的DEAE-52樹脂預處理的方法為：將DEAE-52樹脂用水4～40℃浸泡12～24h；再用0.5mol/L的鹽酸溶液浸泡0.5～2h；0.5mol/L的NaOH溶液浸泡0.5～2h，過濾，水洗至中性，得到經過預處理的DEAE-52樹脂；

步驟(2)中所述旋蒸濃縮的溫度為40～60℃。

步驟(2)中所述層析柱為Z型層析柱。

步驟(2)中所述蒸餾水進行洗脫時流速為5～10s/滴。

步驟(2)中所述裝有經過預處理的DEAE-52樹脂的層析柱是通過以下方法裝填而成：將經過預處理的DEAE-52樹脂于40～60℃旋轉蒸發除氣泡后轉入Z型層析柱中，用恒流泵泵送蒸餾水以使填料裝柱均勻，平衡后流速5～10s/滴。

步驟(1)中所述樹蝴蝶粗多糖的具體制備方法為：

(1-1)將樹蝴蝶粉碎過篩，得到樹蝴蝶粗粉；向樹蝴蝶粗粉中加入蒸餾水進行超聲處理，加熱回流提取，抽濾，并將濾液濃縮，得到濃縮的樹蝴蝶粗多糖溶液；

(1-2)將樹蝴蝶粗多糖溶液和經過預處理的大孔吸附樹脂混合，脫色處理，過濾出多糖溶液，并用水反復洗出樹脂中吸附的多糖，將脫色后的多糖溶液合并，減壓濃縮，得到濃縮糖液；

(1-3)向濃縮糖液中加入沉淀劑進行沉淀，離心，收集沉淀物并干燥，得到樹蝴蝶粗多糖。

步驟(1-1)中所述超聲時間為10～20min；超聲功率為60～400W；

步驟(1)和(1-1)所述加熱回流的溫度為75～100℃；步驟(1)和(1-1)所述加熱回流提取的時間為2～4h；步驟(1)和(1-1)中加熱回流提取的次數為2～4次；

步驟(1)和(1-1)中所述樹蝴蝶粗粉與蒸餾水的質量比為1:20～1:30；熱水回流提取多次時，樹蝴蝶粗粉與每一次使用的蒸餾水的質量比為1:20～1:30。

步驟(1-1)中所述濃縮為減壓濃縮，濃縮的溫度為40～60℃；步驟(1-2)中所述減壓濃縮的溫度為40～60℃。

步驟(1)和(1-2)所述脫色處理的條件為于40～60℃水浴2～4h；