[發(fā)明專利]尿液的處理方法、抗生素的檢測方法及應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710778104.9
• 申請日: 2017-08-31
• 公開（公告）號: CN107543885B
• 公開（公告）日: 2020-03-27
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 宗同強(qiáng);黃華;彭力;葉磊
• 申請（專利權(quán)）人: 嘉興中科檢測技術(shù)服務(wù)有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 北京超凡志成知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11371
• 代理人: 劉書芝

1.一種尿液的處理方法，其特征在于，包括如下步驟：

將尿液取樣后離心取上清液，然后向上清液中加入酸化乙腈后超聲處理，再加入無水硫酸鈉，然后離心取上清液，氮吹干后用溶劑定容，得到待檢測的樣品；超聲處理的時間為25-40min；尿液的上清液與酸化乙腈的體積比為1:1-2。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的尿液的處理方法，其特征在于，在加入無水硫酸鈉，然后離心取上清液的步驟中，離心速度為4000-5000轉(zhuǎn)/min，離心時間3-5min。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的尿液的處理方法，其特征在于，氮吹后用溶劑定容的步驟中，所用溶劑為甲酸水溶液與甲醇的混合溶液。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的尿液的處理方法，其特征在于，包括如下步驟：

(a)將尿液離心后取上清液，冷藏保存；

(b)向步驟(a)的上清液中加入酸化乙腈，上清液與酸化乙腈的體積比為1:1-2，然后超聲處理；

(c)向超聲處理后的液體中加入無水硫酸鈉，再以4000-5000轉(zhuǎn)/min的速度離心3-5min，取上清液；

(d)將步驟(c)得到的上清液氮吹干，再用溶劑定容，得到待檢測的樣品。

5.一種抗生素的檢測方法，其特征在于，采用權(quán)利要求1-3任一項所述的尿液的處理方法處理尿液，得到待檢測樣品，采用液質(zhì)聯(lián)用儀對尿液中的抗生素進(jìn)行檢測，得到尿液中抗生素的含量；

檢測條件為：

色譜柱選用C18柱，規(guī)格為100mm×2.1mm，1.7μm；

流動相：A液為0.1％甲酸水溶液，B液為甲醇溶液，采用梯度洗脫；

離子源：ES+；

檢測模式：多反應(yīng)MRM模式；

離子源電壓：2.5-3kV；

脫溶劑氣溫度：300-500℃；

脫溶劑氣流速：800-1000L/Hr；

反吹氣流速：50-100L/Hr；

最低檢出限：1ng/mL；

檢測時間：8min；

抗生素的含量計算公式為：

其中，C為尿液中抗生素的濃度，ng/mL；C_y為儀器檢測的抗生素的濃度，ng/mL；V_d為氮吹后溶劑定容的體積，mL；W為尿液取樣量，mL；

梯度洗脫的具體條件為：

0-2min，90％A液+10％B液；

2-4min，50％A液+50％B液；

4-6min，10％A液+90％B液；

6-8min，10％A液+90％B液；

8min以后，90％A液+10％B液；

流速為0.3mL/min；

抗生素為恩諾沙星、環(huán)丙沙星、達(dá)氟沙星、洛美沙星、培氟沙星、氧氟沙星、諾氟沙星、雙氟沙星、沙拉沙星、司帕沙星、氟羅沙星、奧比沙星、依諾沙星、氟甲喹、磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲惡唑、磺胺鄰二甲氧嘧啶、磺胺喹惡啉、磺胺氯噠嗪、磺胺間二甲氧嘧啶、磺胺嘧啶、磺胺間甲氧嘧啶、磺胺甲二唑、磺胺多辛、磺胺苯吡唑、磺胺硝苯、磺胺喹沙啉、磺胺苯酰、磺胺吡啶、磺胺索嘧啶、強(qiáng)力霉素、金霉素、土霉素和四環(huán)素。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的抗生素的檢測方法，其特征在于，還包括配制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的步驟。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的抗生素的檢測方法，其特征在于，配制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的步驟為：配制抗生素混標(biāo)儲備液和工作溶液，最后配制成梯度濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

8.權(quán)利要求1-4任一項所述尿液的處理方法或權(quán)利要求5-7任一項所述的抗生素的檢測方法在檢測尿液中抗生素中的應(yīng)用。