[發明專利]百樂眠膠囊指紋圖譜的建立方法

有效

• 申請號: 201710773933.8
• 申請日: 2017-08-31
• 公開（公告）號: CN107727753B
• 公開（公告）日: 2020-08-14
• 發明（設計）人: 趙靜;陳煒偉;譚琴;姚仲青;宋敏;朱建華;李鵬
• 申請（專利權）人: 揚子江藥業集團有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 南京思拓知識產權代理事務所(普通合伙) 32288
• 代理人: 呂鵬濤

1.一種百樂眠膠囊指紋圖譜的建立方法，其特征在于其包括以下步驟：

(1)供試品溶液的制備：取百樂眠膠囊內容物，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入體積分數為70％-100％甲醇水溶液，稱定重量，加熱回流30-90min或超聲20-40min進行溶解，放冷，用體積分數為70％-100％甲醇水溶液補足減失的重量，搖勻，過0.45μm的微孔濾膜，取續濾液作為供試品溶液；

(2)對照品溶液的制備：精密稱取槲皮苷對照品、2,3,5,4′—四羥基二苯乙烯-2-O-D葡萄糖苷對照品、五味子醇甲對照品、丹酚酸B對照品、大黃素對照品，加體積分數為70％-100％甲醇水溶液分別制成每1mL含65μg槲皮苷、45μg 2,3,5,4′-四羥基二苯乙烯-2-O-D葡萄糖苷、48μg五味子醇甲、72μg丹酚酸B、4μg大黃素對照品溶液；

(3)HPLC色譜條件：色譜柱采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料，柱溫30℃，流速為1.0mL/min，檢測波長為256nm，以乙腈為流動相A，以體積分數為0.1％磷酸水溶液為流動相B進行梯度洗脫，流動相A、B的比例變化為：

0～30min，A：B為5％：95％→15％：85％；

30～60min，A：B為15％：85％→22％：78％；

60～70min，A：B為22％：78％→28％：72％；

70～90min，A：B為28％：72％→45％：55％；

90～100min，A：B為45％：55％→60％：40％；

100～105min，A：B為60％：40％→80％：20％；

105～110min，A：B為80％：20％；

110～113min，A：B為80％：20％→5％：95％；

(4)分別精密吸取供試品溶液、對照品溶液5～20μL，注入高效液相色譜儀，測定，分別得到供試品溶液、對照品溶液的液相色譜；

(5)利用中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統，經液相色譜數據導入、多點校正和數據匹配，分析得到百樂眠膠囊指紋圖譜。

2.根據權利要求1所述的百樂眠膠囊指紋圖譜的建立方法，其特征在于其包括以下步驟：

(1)供試品溶液的制備：取百樂眠膠囊內容物1.0g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入體積分數為70％甲醇水溶液25mL，稱定重量，加熱回流30min或超聲30min進行溶解，放冷，用體積分數為70％甲醇水溶液補足減失的重量，搖勻，過0.45μm的微孔濾膜，取續濾液作為供試品溶液；

(2)對照品溶液的制備：精密稱取槲皮苷對照品、2,3,5,4′-四羥基二苯乙烯-2-O-D葡萄糖苷對照品、五味子醇甲對照品、丹酚酸B對照品、大黃素對照品，加體積分數為70％甲醇水溶液分別制成每1mL含65μg槲皮苷、45μg 2,3,5,4′-四羥基二苯乙烯-2-O-D葡萄糖苷、48μg五味子醇甲、72μg丹酚酸B、4μg大黃素對照品溶液；

(3)HPLC色譜條件：色譜柱采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料，柱溫30℃，流速為1.0mL/min，檢測波長為256nm，以乙腈為流動相A，以體積分數為0.1％磷酸水溶液為流動相B進行梯度洗脫，流動相A、B的比例變化為：

0～30min，A：B為5％：95％→15％：85％；

30～60min，A：B為15％：85％→22％：78％；

60～70min，A：B為22％：78％→28％：72％；

70～90min，A：B為28％：72％→45％：55％；

90～100min，A：B為45％：55％→60％：40％；

100～105min，A：B為60％：40％→80％：20％；

105～110min，A：B為80％：20％；

110～113min，A：B為80％：20％→5％：95％；

(4)分別精密吸取供試品溶液、對照品溶液5μL，注入高效液相色譜儀，測定，分別得到供試品溶液、對照品溶液的液相色譜；

(5)利用中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統，經液相色譜數據導入、多點校正和數據匹配，分析得到百樂眠膠囊指紋圖譜。

3.根據權利要求1～2中任意一項所述的百樂眠膠囊指紋圖譜的建立方法，其特征在于所述色譜柱采用C18色譜柱。

4.權利要求1～2中任意一項所述的百樂眠膠囊指紋圖譜的建立方法在百樂眠膠囊的質量檢測或質量控制中的應用。