[發明專利]基于活性染料的病理組織快速染色方法

在審

• 申請號: 201710767343.4
• 申請日: 2017-08-31
• 公開（公告）號: CN107478483A
• 公開（公告）日: 2017-12-15
• 發明（設計）人: 吳永紅
• 申請（專利權）人: 蘇州澤科生物科技有限公司
• 主分類號: G01N1/30
• 分類號: G01N1/30
• 代理公司: 蘇州周智專利代理事務所(特殊普通合伙)32312
• 代理人: 周雅卿

技術領域

本發明涉及生物技術領域，具體涉及一種基于活性染料的病理組織快速染色方法。

背景技術

活體組織病理診斷是外科的第一診斷，是金標準，醫生可以根據標本的檢測結果作出正確的診斷，制定疾病下一步的治療計劃。病理報告的準確性在相當程度上對疾病的診斷和治療起決定性作用，而正確處理病理標本不僅能給病理診斷及臨床診斷提供有效的保證，而且也維護了患者身心，杜絕了因不當標本處理帶來的糾紛。

病理標本制備是將取材后的病理組織依次經固定、脫水、透明、浸蠟、包埋、切片、染色和封固，因為未加染色的任何組織在鏡下只能辨認細胞和胞核的輪廓，看不清楚其他任何結構，因此，染色是標本制備的重要步驟。染色的目的就是將組織浸入染色劑內，經過一定的時間，將組織或細胞及其他異常成分染上不同深淺的顏色，便于在光學顯微鏡下進行觀察，研發一種安全、無毒、高效、適用性強的染色方法具有重要意義。

發明內容

本發明的目的在于提供一種基于活性染料的病理組織快速染色方法，用以實現安全、無毒、高效的病理組織染色。

本發明提供了一種基于活性染料的病理組織快速染色方法，具體包括如下步驟：

(1)首先配制一定pH值、一定濃度的磷酸鹽緩沖液，然后將活性染料添加到所述磷酸鹽緩沖液中配制染色液；

(2)將步驟(1)所得染色液預熱至一定溫度后加入病理組織切片；

(3)將步驟(2)所得產物脫水、透明、固封。

進一步的，所述磷酸鹽緩沖液的pH值為6.0-8.0，所述磷酸鹽緩沖液的濃度為0.01-0.03mol/L，所述染色液的濃度為1％(w/v)。

進一步的，所述步驟(2)中染色液預熱的溫度為60-80℃。

采用上述本發明技術方案的有益效果是：

本發明是利用活性染料替代酸性染料對組織切片進行染色，將病理組織切片利用不同活性染料進行染色，可以獲得染色穩固、色彩各異的組織切片，安全、無毒、高效、色譜廣、色澤鮮艷、性能優異、適用性強，其色相和性能滿足市場需求，采用經濟的染色工藝和簡單的染色操作獲得高水平的各項堅牢性能。

具體實施方式

為使本發明實施例的目的、技術方案和優點更加清楚，下面將對本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例是本發明一部分實施例，而不是全部的實施例。

本實施例提供了一種基于活性染料的病理組織快速染色方法，具體包括如下步驟：

(1)首先配制pH值為7.0、濃度為0.02mol/L的磷酸鹽緩沖液，然后將活性染料添加到該磷酸鹽緩沖液中配制染色液，該染色液的濃度為1％(w/v)；

(2)將步驟(1)所得染色液預熱至70℃后加入病理組織切片；

(3)將步驟(2)所得產物脫水、透明、固封。

本發明的原理為：活性染料分子包括母體染料和活性基兩個主要組成部分，活性染料上的活性基團能與纖維素纖維上的羥基、蛋白質纖維上的氨基、聚酰胺纖維上的氨基和羧羥基發生共價鍵結合，二者之間形成共價鍵，成為整體，使耐洗和耐摩擦牢度提高。

活性染料的反應特點、反應性主要取決于活性基，不同活性基取決于不同的反應性。在含有單活性基的活性染料中，X型活性染料的反應性最強，穩定性較低，易與水解，上染速率較快，能在室溫和較弱的堿性條件下反應；K型活性染料反應性最差，穩定性較高，所需上染溫度較高，必須在較高溫度、強堿性條件下才能反應；KN型活性染料的性能和染色條件介于X型和K型之間。在含有雙活性基的活性染料中，B型活性染料的染色性能穩定，溶解度高，適合低浴比染色；配伍性強；染色重現性好；滲透性和勻染性好，對染色工藝條件的變化有相當強的適應性；低親和力，能輕易洗除浮色；各項濕處理牢度優異，固色率高，染色后色光鮮艷純正；適用于浸染；可在60-80度下對纖維素纖維染色，在堿性物質的作用下，其混合型雙活性基團能與纖維束分子形成共價鍵結合而對其實現固著。

本發明的有益效果為利用活性染料替代酸性染料對組織切片進行染色，將病理組織切片利用不同活性染料進行染色，可以獲得染色穩固、色彩各異的組織切片，安全、無毒、高效、色譜廣、色澤鮮艷、性能優異、適用性強，其色相和性能滿足市場需求，采用經濟的染色工藝和簡單的染色操作獲得高水平的各項堅牢性能。

最后應說明的是：以上各實施例僅用以說明本發明的技術方案，而非對其限制；盡管參照前述各實施例對本發明進行了詳細的說明，本領域的普通技術人員應當理解：其依然可以對前述各實施例所記載的技術方案進行修改，或者對其中部分或者全部技術特征進行等同替換；而這些修改或者替換，并不使相應技術方案的本質脫離本發明各實施例技術方案的范圍。