[發明專利]一種基于組織自熒光的減少作為檢測肺癌組織標志的檢測方法及其應用

在審

• 申請號: 201710764585.8
• 申請日: 2017-08-30
• 公開（公告）號: CN107727617A
• 公開（公告）日: 2018-02-23
• 發明（設計）人: 殷衛海;張銘超;儲天晴
• 申請（專利權）人: 上海交通大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 上海順華專利代理有限責任公司31203
• 代理人: 陸林輝

技術領域

本發明涉及檢測肺癌組織的生物自熒光，具體是基于檢測肺部組織自熒光強度的減少，作為檢測肺癌組織的標志的檢測方法及其應用。

背景技術

肺癌是世界范圍內也是我國發病率和死亡率最高的惡性腫瘤，其具有惡性程度高、進展快、療效差等特點。對于一個首次出現肺癌疑似癥狀的人，進行一個胸片檢測能提示明顯的團塊，縱隔膜擴張，肺不張等問題。CT影像是可以提供更多的疾病信息。支氣管鏡檢以及CT常被用來提取腫瘤樣品用于組織病理學分析判斷。在胸片上，看到的肺部腫瘤一般是孤立性肺結節的形式。然而，由于許多其他疾病也有次特征，包括錯構瘤，傳染性肉芽瘤等。所以還需進一步的診斷。對于肺癌，決定性的診斷是取疑似腫瘤的腫塊樣品，利用組織病理學的方法判定。臨床實踐指南建議定期對肺結節進行檢查。但是CT由于其輻射危害，不建議高頻率或者長時間的使用。

目前臨床上使用CT影像技術可以檢測較早期的肺癌，如果腫瘤很小，5年存活率可以超過80％。但是主要的問題是，大部分人群沒有定期檢測肺癌的習慣。同時CT影像不便于人人檢測。而目前對于肺癌的檢測方法僅限于這些影像方法，以及咳嗽，呼吸困難,咳血,全身減肥和厭食等表觀粗略的判斷。對于患者很不方便，耗時相對較長而且價格較昂貴。

因此，發明一種新型、簡便、實時的肺癌檢測方法，具有重大的社會經濟意義以及臨床價值。

發明內容

本發明人的目的是突破現有技術的難題，提出一種可以用于活體實時檢測肺癌的新型檢測方法和應用。

本發明發現肺癌患者的肺癌病灶區域的組織自熒光的光強度顯著低于癌旁以及正常肺部組織的自熒光，以此作為檢測肺部組織中哪些部分為肺癌組織。本方法發現肺部組織特定波長自熒光的減少作為肺癌組織的標志。

基于本發現，也可以建立在臨床上快速診斷肺癌組織位置和大小的檢測方法和儀器。

本發明的具體技術方案是：

一種基于組織自熒光的減少作為檢測肺癌組織標志的檢測方法，包括以下步驟：

(1)被檢查人的肺部組織置于單光子470-700nm激發光或者雙光子700-1000nm激發光，以激發出該肺部組織的自熒光。

(2)檢測肺部組織樣本發出的波長在520-800nm范圍內的自熒光強度；

(3)將步驟(1)的自熒光強度與其自身其他肺部部位的自熒光強度結果進行對比

(4)將步驟(1)的自熒光強度與已知的肺癌患者、非肺癌人群的肺部組織自熒光強度結果進行對比；

(5)根據上述對比結果，完成基于肺部組織自熒光強度作為檢測肺癌發病的生物標志物的檢測方法。肺部組織所發出的波長為520-800nnm自熒光光強度，與該組織是肺癌組織的可能性呈負相關關系：自熒光光強度較高的區域為正常組織，而自熒光光強度越低的部分是肺癌組織的可能性越大。

進一步的，所述利用激發光激發肺部組織自熒光的方式包括使用普通的連續光輸出進行激發的方式、使用電調制進行調制激發的方式或者使用脈沖激光進行激發的方式中的至少一種。

進一步的，所述肺部組織可以活體直接檢測，也可以對離體樣本檢測。

進一步的，本發明的檢測方法中，激發光的波長優選為470-680nm的范圍內，更優選為480-643nm的范圍內。

進一步的本發明的檢測方法中，所檢測的自發熒光的波長優選為540-750nm的范圍內，更優選為550-741nm的范圍內。

本發明還提供了一種基于肺部組織自熒光水平的下降作為檢測肺癌組織的標志的應用。

本發明利用肺部組織自熒光強度，檢測肺癌患者肺癌發病以及肺癌組織區域，為臨床檢測肺癌疾病建立基礎，可以極大的降低肺癌檢測的時間，使醫生可以在手術時更準確的判斷肺癌區域，同時比傳統染色的診斷方法更快高效的診斷肺癌組織，使病人可以得到及時治療。同時，本發明提供了檢測方法，作為一種簡化肺癌檢測方法。

附圖說明

圖1：激發光488nm激發樣本肺部組織自熒光，接受波長范圍500-530nm的接受光。自熒光改變圖。

圖2：激發光543.5nm激發樣本肺部組織自熒光，接受波長范圍553-618nm的接受光。自熒光改變圖。

圖3：雙光子激發光760nm激發樣本肺部組織自熒光，接受波長范圍500-550的接受光。自熒光改變圖。

圖4：雙光子激發光760nm激發樣本肺部組織自熒光，接受波長范圍640nm-700nm的接受光。自熒光改變圖。

具體實施方式