[發明專利]GIPC2蛋白在制備直腸癌術后預后評估試劑盒中的應用、直腸癌預后評估試劑盒及方法

在審

• 申請號: 201710759223.X
• 申請日: 2017-08-30
• 公開（公告）號: CN107389948A
• 公開（公告）日: 2017-11-24
• 發明（設計）人: 林堯;王清水
• 申請（專利權）人: 福建師范大學
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 福州君誠知識產權代理有限公司35211
• 代理人: 戴雨君

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及GIPC2蛋白在制備直腸癌術后預后評估試劑盒中的應用、直腸癌預后評估試劑盒及方法。

背景技術

直腸癌是常見的消化道惡性腫瘤，占胃腸道腫瘤的第二位，好發部位為直腸及直腸與乙狀結腸交界處，占60％，發病多在40歲以后，男女患病比例為2：1。

直腸癌在早期缺少癥狀，病人無明顯異常改變。當腫塊達1～2cm時，由于腫瘤的侵蝕，腸粘膜遭受到腫塊的異物性刺激，分泌物增多，因此在排便時也有少量的粘液排出，多數在大便的前端或于糞便的外面附著。隨著腫瘤的增大，分泌粘液也增加，有時隨著排氣或突然咳嗽腹內壓增加，可有粘液從肛門流出。當腫瘤增大，形成潰瘍或有壞死合并感染時，便會出現明顯的直腸刺激癥狀，出現排便次數和糞便性質的改變。排便次數增加，每天2～3次，呈粘液便，稀便，粘液血便。常被誤診為“腸炎”“痢疾”“潰瘍性結腸炎”等。但是，直腸癌腹瀉癥狀并不象結腸炎那樣，來勢急，好轉快；也不象痢疾那樣典型的出現里急后重癥狀。直腸癌的直腸刺激癥狀是既緩慢又逐漸進展，在合并感染時刺激癥狀明顯，一經對癥處理也可以暫時好轉，但是經過較長時間的治療仍有粘液血便者，應引起足夠的重視。

直腸癌的病因尚未完全清楚。直腸癌的早期發現、早期診斷，是提高療效的關鍵。直腸癌的發生發展及預后與癌基因的激活和抑癌基因功能失活密切關聯，是多因素誘導，多基因參與的復雜病理過程。近年來，直腸癌早期復發轉移的分子機制是該領域的熱門課題，深入闡明該分子機制，并在其特異性環節中導入靶向性治療措施，有望很大幅度提高直腸癌術后總體治療效果。因此，探尋切實有效的直腸癌直腸切除術后早期復發相關預警分子標志，闡明其與直腸癌早期復發轉移的關系，這對提高直腸癌術后治療效果、評估直腸癌早期復發風險、判斷預后和個體化治療有著至關重要的意義。

GIPC2(GIPC PDZ domain containing family member 2)是一種包含PDZ結構域的接頭蛋白。目前發現GIPC2在胃癌中上調，但是在白血病和腎癌中則是下調，顯示其可能與腫瘤的發生相關。

直腸癌做為對人類健康威脅最大的腫瘤之一，至今其發生的分子機制仍不清楚，對其的治療也缺少特異性的分子靶點，而GIPC2做為十分重要的腫瘤癌基因，目前尚無文獻報道GIPC2蛋白與判斷直腸癌預后或直腸癌轉移相關。而本發明研究發現在直腸癌中的GIPC2表達與病人術后預后存在顯著的關系，暗示GIPC2可作為直腸癌的術后預后的有效預警蛋白。

發明內容

本發明目的在于提供GIPC2蛋白在制備直腸癌術后預后評估試劑盒中的應用，并提供用于直腸癌術后預后評估的試劑盒及方法。

本發明經過廣泛而深入的研究，首次發現，采用免疫組化方法檢測GIPC2蛋白在直腸癌組織中的相對表達量，能夠判斷直腸癌患者出現直腸癌復發轉移的風險。基于GIPC2蛋白表達量與直腸癌復發轉移的相關性，以GIPC2蛋白作為預后標記物對其表達量進行檢測可以用于指導直腸癌的預后判斷。

因此，本發明提供了GIPC2蛋白在制備直腸癌術后預后評估試劑盒中的應用，該應用是以GIPC2蛋白作為分子標記，利用GIPC2單克隆抗體或多克隆抗體，結合免疫組化實驗試劑，檢測GIPC2蛋白在直腸癌組織中的相對表達量。

本發明還提供了所述應用中用于直腸癌術后預后評估的試劑盒，該試劑盒包括：人源GIPC2單克隆抗體或GIPC2多克隆抗體、免疫組化實驗試劑。所述免疫組化實驗試劑為本領域免疫組化實驗中的常用試劑。

發明人研究發現，GIPC2在復發轉移直腸癌組織中表達低于未復發轉移直腸癌組織，可以推測GIPC2在直腸癌術后復發轉移發揮重要作用。查閱國內外文獻，GIPC2與直腸癌的發生以及復發轉移的相關研究少，在本研究中，GIPC2在直腸癌組織中的表達下調，而在癌旁和正常直腸組織中則表達上調，且與未復發轉移組相比，GIPC2在復發轉移組中表達也下調，表明GIPC2可能作為抑制因子參與直腸癌發生發展過程。通過Kaplan-Meier生存曲線分析，GIPC2表達程度與直腸癌患者的預后有關，GIPC2低表達的患者預后不良(P<0.05)。

綜上所述，GIPC2在直腸癌組織中低表達，GIPC2的低表達與直腸癌患者術后復發轉移有關。GIPC2可以作為直腸癌預后的一個重要候選分子標記物。

優選的，所述人源GIPC2多克隆抗體由序列為SEQ ID NO.1所示的GIPC2蛋白免疫兔子獲得，可自行制備，也可采用市購商品。