[發明專利]胰島素樣生長因子結合蛋白2在制備胃神經內分泌癌術后預后評估試劑盒中的應用

在審

• 申請號: 201710759220.6
• 申請日: 2017-08-30
• 公開（公告）號: CN107643403A
• 公開（公告）日: 2018-01-30
• 發明（設計）人: 林堯;黃昌明;謝建偉;王清水
• 申請（專利權）人: 福建師范大學;福建醫科大學附屬協和醫院
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/531;G01N33/577
• 代理公司: 福州君誠知識產權代理有限公司35211
• 代理人: 戴雨君

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及胰島素樣生長因子結合蛋白2在制備胃神經內分泌癌術后預后評估試劑盒中的應用、胃神經內分泌癌預后評估試劑盒及方法。

背景技術

神經內分泌腫瘤是一組起源于各類神經內分泌細胞和肽能神經元的異質性腫瘤。胃神經內分泌腫瘤(Gastric neuroendocrine neoplasm，GNEN)是來源于類腸嗜鉻細胞(Enterochromaffin-like cell，ECL)或腸嗜鉻(Enterochromaffin，EC)細胞等神經內分泌細胞的腫瘤，約占所有神經內分泌腫瘤的6％，其發病率約為2/100萬。2010年WHO根據細胞分化程度、核分裂象及細胞增殖活性(Ki-67指數)，將GNEN分為G1、G2和G3三級，其中G 1和G 2屬于高分化的GNEN，G3屬于低分化的胃神經內分泌癌(Gastric neuroendocrine carcinoma，GNEC)，約占胃癌的0.16％-1.48％。由于其“罕見性”，對GNEC的認識度與關注度遠不及胃腺癌(Gastric adenocarcinoma，GAC)。大部分GNEC患者就診時已屬晚期，圍手術期輔助化療或姑息性化療是這一部分患者的唯一選擇。但由于缺乏針對GNEC的臨床化療藥物藥敏研究，我國目前GNEC的臨床化療方案基本參照GAC，主要采用以5-FU和及奧沙利鉑等常規化療藥物為基礎的聯合治療。

胰島素樣生長因子結合蛋白2(insulin-like growth factor binding protein-2，IGFBP2)，屬于IGFBPs家族，包括IGFBP1-IGFBP6，均可分泌表達，其中胰島素樣生長因子結合蛋白2的含量位于第二位。人胰島素樣生長因子結合蛋白2基因位于2號染色體q33-q34，編碼36kD的蛋白，由N端和C端，以及一個多差異位點中心區域組成，廣泛存在于胚胎時期的各組織，出生后顯著下調。胰島素樣生長因子結合蛋白2參與多種信號通路，其發揮作用依靠兩種方式，其一是核內編碼胞漿合成蛋白分泌至胞外，通過自分泌的方式影響胞內的信號通路，其二是由胞漿進入核內，影響核內活動。

在IGFBPs家族中，胰島素樣生長因子結合蛋白2與多種腫瘤的發生發展密切相關，參與前列腺癌、卵巢癌、乳腺癌、橫紋肌肉瘤、結腸癌等的增殖、侵襲和轉移，這使得它常常被作為腫瘤的分子標記物。在神經膠質瘤中胰島素樣生長因子結合蛋白2經常參與PTEN、AKT等相關通路的激活導致侵襲力和惡性程度加強。研究表明過表達胰島素樣生長因子結合蛋白2之后會增加膠質瘤的惡性程度，上調侵襲蛋白MMP2的表達等，增強細胞的侵襲力。在一些研究中發現，敲低胰島素樣生長因子結合蛋白2的表達可以明顯降低腫瘤細胞如GBM的侵襲能力。胰島素樣生長因子結合蛋白2在加強膠質瘤的侵襲力同時激活侵襲增強基因。研究顯示在肺癌患者的血清、惡性胸膜滲出液以及腫瘤組織中均發現高表達的胰島素樣生長因子結合蛋白2；在早期的非小細胞肺癌組織中胰島素樣生長因子結合蛋白2是明顯高表達的；在鱗癌和腺癌中，胰島素樣生長因子結合蛋白2能夠促進腫瘤的侵襲和增生。

至今胃神經內分泌癌發生的分子機制仍不清楚，對其的治療也缺少特異性的分子靶點，而胰島素樣生長因子結合蛋白2做為十分重要的腫瘤癌基因，目前尚無文獻報道胰島素樣生長因子結合蛋白2與判斷胃神經內分泌癌預后或轉移相關。本發明研究發現在胃神經內分泌癌中的胰島素樣生長因子結合蛋白2表達與病人術后預后存在顯著的關系，暗示胰島素樣生長因子結合蛋白2可作為胃神經內分泌癌的術后預后的有效預警蛋白。

發明內容

本發明目的在于提供胰島素樣生長因子結合蛋白2在制備胃神經內分泌癌術后預后評估試劑盒中的應用，并提供用于胃神經內分泌癌術后預后評估的試劑盒及方法。

本發明經過廣泛而深入的研究，首次發現，采用免疫組化方法檢測胰島素樣生長因子結合蛋白2在胃神經內分泌癌組織中的相對表達量，能夠判斷胃神經內分泌癌患者出現胃神經內分泌癌復發轉移的風險。基于胰島素樣生長因子結合蛋白2表達量與胃神經內分泌癌復發轉移的相關性，以胰島素樣生長因子結合蛋白2作為預后標記物對其表達量進行檢測可以用于指導胃神經內分泌癌的預后判斷。

因此，本發明提供了胰島素樣生長因子結合蛋白2在制備胃神經內分泌癌術后預后評估試劑盒中的應用，該應用是以胰島素樣生長因子結合蛋白2作為分子標記，利用胰島素樣生長因子結合蛋白2單克隆抗體或多克隆抗體，結合免疫組化實驗試劑，檢測胰島素樣生長因子結合蛋白2在胃神經內分泌癌組織中的相對表達量。