[發明專利]一種硫堇伊紅染色液及制備方法和應用

在審

• 申請號: 201710732464.5
• 申請日: 2017-08-24
• 公開（公告）號: CN108287097A
• 公開（公告）日: 2018-07-17
• 發明（設計）人: 姚斌;左露露
• 申請（專利權）人: 南京福怡科技發展股份有限公司
• 主分類號: G01N1/30
• 分類號: G01N1/30
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明屬于生物醫藥領域，具體涉及一種硫堇和伊紅染色液及其制備方法，以及染色方法，硫堇染色液利用酸解的方法可打斷DNA分子鏈中的嘌呤?脫氧核糖鏈，即去嘌呤作用，然后DNA部分區域發生重排，暴漏出醛基，硫堇能與細胞中的醛基反應形成一種醌型化合物，使細胞核DNA染成藍色；伊紅是一種化學合成的酸性染料，在醇中離解成帶負電荷的陰離子，與蛋白質的氨基正電荷的陽離子結合使細胞漿、細胞質和細胞外基質染成不同程度的紅色或粉紅色，與藍色的細胞核形成鮮明對比。標本背景清晰，層析分明，染色效果好，色彩飽和，易于數字化圖像分析、醫生診斷。

技術領域

本發明屬于生物醫藥領域，具體涉及一種病理學診斷中組織學和細胞學標本染色的特殊染色試劑，具體涉及一種硫堇伊紅染色液及其制備方法和應用。

背景技術

硫堇伊紅染色法，區別于常用的染色方法，是一種特殊染色方法，可用于組織學、細胞學染色。

硫堇染色液利用酸解的方法可打斷DNA分子鏈中的嘌呤-脫氧核糖鏈，即去嘌呤，然后DNA部分區域發生重排，暴漏出醛基，硫堇能與細胞中的醛基反應形成一種醌型化合物，使細胞核DNA染成藍色。硫堇分子式C14H13N3O2S，結構式如下：

伊紅是一種化學合成的酸性染料，分水溶性和醇溶性兩種，主要使細胞質和細胞間質著紅色，在醇中離解成帶負電荷的陰離子，與蛋白質的氨基正電荷的陽離子結合使細胞漿、細胞質和細胞外基質、紅細胞、肌肉、結締組織、嗜伊紅顆粒等被染成不同程度的紅色或粉紅色，與藍色的細胞核形成鮮明對比。醇溶性伊紅結構式如下：

。

發明內容

本發明的目的是提供一種硫堇伊紅染色液的制備及染色方法，可用于人體組織學和細胞學的特殊染色。

本發明提供了所述硫堇伊紅染色液及制備方法：

本發明的硫堇伊紅染色液，包括硫堇染色液和伊紅染色液；

所述的硫堇染色液，每1000ml所述硫堇染色液中包括如下組分：

硫堇（硫堇勞氏紫粉末）0.5-3.0g；染料助劑0.5-2g；醇20-80ml；強酸10-15ml；余量為水；所述的伊紅染色液，每1000ml所述伊紅染色液中包括如下組分：

曙紅3-8g；弱酸30-50ml；水50ml；乙醇900-920ml；

所述染料助劑為亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉中的至少一種；

所述醇為乙醇、甲醇、乙二醇、丙二醇、丙三醇中的一種或多種混合物；

所述乙醇為95%乙醇或無水乙醇

所述強酸為鹽酸、硫酸或硝酸中的至少一種

所述弱酸為乙酸、水楊酸、檸檬酸、次氯酸、亞硫酸、偏硅酸的一種或多種的混合物；

所述伊紅為醇溶性伊紅；

所述水為蒸餾水、去離子水、純化水及體外診斷試劑用純化水；

本發明的一種硫堇伊紅染色液的制備方法，包括以下步驟：

1）硫堇染色液的配制：

a) 將水加熱至50-70℃，加入硫堇，攪拌1-2小時，冷卻室溫過濾；

b) 加入染料助劑和醇，攪拌均勻；

c）使用前，加入強酸，攪拌50-90min，攪拌溫度控制在20-30℃，攪拌結束后直接用于染色；

2）伊紅染色液的配制：

a）將伊紅加入水中，加熱攪拌至完全溶解，制備伊紅原液；