[發明專利]一種轉基因豬外源基因整合位置效應和表達產物生理功能的評價方法、修復方法以及飼料

有效

• 申請號: 201710728980.0
• 申請日: 2017-08-22
• 公開（公告）號: CN107328947B
• 公開（公告）日: 2018-09-25
• 發明（設計）人: 華文君;華再東;鄭新民;畢延震;任紅艷;肖紅衛;李莉;劉西梅;張立蘋
• 申請（專利權）人: 湖北省農業科學院畜牧獸醫研究所
• 主分類號: G01N35/00
• 分類號: G01N35/00;A23K50/30;A23K20/158;A23K10/22;A23K20/174
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙) 11371
• 代理人: 魏彥

本發明公開了一種轉基因豬外源基因整合位置效應和表達產物生理功能的評價方法，涉及轉基因豬檢測領域。本發明公開的轉基因豬外源基因整合位置效應和表達產物生理功能的評價方法，其包括：檢測轉fat?1基因豬的血液生理生化指標和尿液生理生化指標。該評價方法可以對轉基因豬外源基因整合位置效應和表達產物對轉基因豬的生長性能的影響進行準確、可靠地評價，有助于在轉fat?1基因豬育種過程中準確控制fat?1基因表達。

技術領域

本發明涉及轉基因豬檢測領域，具體而言，涉及一種轉基因豬外源基因整合位置效應和表達產物生理功能的評價方法、修復方法以及飼料。

背景技術

飲食中總脂肪和飽和脂肪的攝入量占總熱量的比例不斷減少，ω -6脂肪酸(ω-6PUFAs，polyunsaturated fatty acids)攝入增加和ω-3脂肪酸(ω-3PUFAs)減少，會導致ω-6和ω-3比例達到18:1以上，這種情況對心血管疾病、慢性疾病具有明顯影響，而且會使超重和肥胖的患病率顯著增加。

紅細胞(RBC)膜磷脂中ω-6脂肪酸和ω-6與ω-3比例提高了肥胖的風險，紅細胞膜磷脂高水平ω-3減少肥胖的風險。通過增加攝入二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)能夠減少疾病產生，ω -6/ω-3比率平衡對身體健康和肥胖的預防具有重要意義。ω-3PUFAs 能夠降低膜脂中膽固醇含量，增加細胞膜的流動性，降低心腦血管疾病產生的比例，具有抗炎、抗凝血等作用，抑制腫瘤生長，影響多種人類神經性疾病。

人和哺乳動物缺少多不飽和脂肪酸脫氫酶，不能夠生成ω-6和ω-3PUFAs，兩種物質必須從食物中獲取。秀麗線蟲Fat-1(Fatty acid desaturases，ω-3多聚不飽和脂肪酸脫氫酶)基因編碼的ω-3多聚不飽和脂肪酸脫氫酶具有將ω-6PUFAs轉化生成ω-3PUFAs的能力。采用轉基因動物方法生產長鏈ω-3PUFAs是解決ω-3PUFAs食物短缺的有效方法之一，轉fat-1基因豬提高豬肉營養價值,具有很好的應用前景。

轉fat-1基因豬育種需要采用PCR和Southern印跡雜交方法對轉 fat-1基因原代及傳代生產仔豬進行檢測，確定fat-1基因在豬基因組中的整合情況。轉fat-1基因豬外源fat-1基因是否有效表達，表達產物能否到達預期生理效果以及基因整合表達對轉基因豬和人體健康有沒有危害，是轉基因豬育種和實現商業應用的重要測試內容。

發明內容

本發明的目的在于提供一種轉基因豬外源基因整合位置效應和表達產物生理功能的評價方法，該評價方法可以對轉基因豬外源基因整合位置效應和表達產物對轉基因豬的生長性能的影響進行準確、可靠地評價，有助于在轉fat-1基因豬育種過程中準確控制fat-1基因表達。

本發明的另一目的在于提供一種轉基因豬基因整合位置效應副作用的修復方法，該修復方法可消除轉基因豬基因整合位置效應對轉基因豬生長發育帶來的副作用，恢復轉基因豬受損器官的正常生理功能。

本發明的另一目的在于提供一種用于修復轉基因豬基因整合位置效應副作用的飼料，轉基因豬食用該飼料后，可消除基因整合位置效應對生長發育帶來的副作用。

本發明是這樣實現的：

一種轉基因豬外源基因整合位置效應和表達產物生理功能的評價方法，其包括：檢測轉fat-1基因豬的血液生理生化指標和尿液生理生化指標。

一種轉基因豬基因整合位置效應副作用的修復方法，其包括：

將F1代轉基因豬與陰性生產豬雜交，得到F2代轉基因陽性豬；

對獲得的F2代轉基因陽性豬飼喂含紅花籽油復合添加劑的飼料。

一種用于修復轉基因豬基因整合位置效應副作用的飼料，其含有紅花籽油復合添加劑，所述紅花籽油復合添加劑包括：紅花籽食用油、魚粉以及維生素添加劑。