[發明專利]人甲狀腺未分化癌細胞系及其應用

有效

• 申請號: 201710726446.6
• 申請日: 2017-08-22
• 公開（公告）號: CN107460171B
• 公開（公告）日: 2020-06-12
• 發明（設計）人: 劉小珍;葛明華;鄭智國;凌志強;孫文勇;徐海苗;王佳峰
• 申請（專利權）人: 浙江省腫瘤醫院
• 主分類號: C12N5/09
• 分類號: C12N5/09;C12Q1/02;C12R1/91
• 代理公司: 上海精晟知識產權代理有限公司 31253
• 代理人: 周麗娟

本發明公開了人甲狀腺未分化癌細胞系及其應用，其命名為人甲狀腺未分化癌細胞ZJB?ATC1，于2017年03月31日保藏于武漢大學的中國典型培養物保藏中心，保藏編號為CCTCC NO：C201753。本發明的人甲狀腺未分化癌細胞系，可長期體外傳代，大量擴增，具有較強的增殖活性；分化類型為未分化，可作為有效的研究細胞模型，為研究者深入開展人甲狀腺未分化癌的病因學、轉移機制、耐藥機理、新藥篩選等提供新的實驗模型。

技術領域

本發明屬于細胞系領域，具體涉及人甲狀腺未分化癌細胞系及其應用。

背景技術

甲狀腺未分化癌(Anaplastic thyroid cancer,ATC)是惡性程度(致死率)較高的實體性腫瘤，其發病率不超過甲狀腺癌的5％，但死亡率占甲狀腺癌的50％(甲狀腺未分化癌死亡患者占甲狀腺癌死亡患者的一半)。由于甲狀腺未分化癌病程發展迅猛，確診時往往局部已侵犯周圍的器官，如氣管、食管、血管、肌肉等，且約50％病人已有肺、骨、腦、肝等遠處轉移，即使給予積極的治療，也僅極少病人能長期生存，一般從診斷到死亡的中位生存期僅4～8個月。UICC、AJCC將所有ATC都分為Ⅳ期。ATC可采用手術、放療、化療、靶向治療等治療方式，但各治療手段往往不能控制疾病的進展，目前仍然缺乏標準治療模式。

人惡性腫瘤細胞系的建立，為了解腫瘤的生物學特性、研究其癌變、分子遺傳以及轉移演變機制等提供豐富的實驗材料，從而為建立標準治療模式提供幫助。由于甲狀腺未分化癌發病率低、死亡率高，進行大樣本的隨機對照研究較困難，因此，豐富甲狀腺未分化癌細胞株庫具有重要作用。目前甲狀腺未分化癌細胞系種類較少，甲狀腺未分化癌常用永生細胞系主要為CAL-62、8305C、KMH-2、DRO、FRO等。Rebecca E.Schweppe通過STR方法對ATC細胞庫中40株甲狀腺癌細胞進行DNA分析，研究結果發現僅23株保持獨立的基因型，其他株細胞系被污染或為其他細胞系來源，其中，甲狀腺未分化癌DRO90-1為黑色素瘤A-375細胞系來源；甲狀腺未分化癌ARO81-1為結腸癌細胞系HT-29衍生物，甲狀腺未分化癌細胞系庫告急。因此，迫切需要科研工作者建立新的人甲狀腺未分化癌細胞系，從而建立較為完備的甲狀腺未分化癌細胞系庫，為研究腫瘤異質性提供合適的體外模型。

發明內容

有鑒于此，本發明提供了一種人甲狀腺未分化癌細胞系及其應用，該人甲狀腺未分化癌細胞系能夠大量擴增，且可長期在體外傳代培養。

本發明解決上述技術問題所采用的技術方案是：

人甲狀腺未分化癌細胞系，命名為人甲狀腺未分化癌細胞ZJB-ATC1，于2017年03月31日保藏于中國典型培養物保藏中心(CCTCC)，保藏編號為CCTCC NO：C201753。

本發明還提供如上所述的人甲狀腺未分化癌細胞系的子代細胞系。

在本發明的一些實施例中，如上所述人甲狀腺未分化癌細胞系或其子代細胞系中，CK表達為陽性(+)，CD68表達為陰性(－)，DES表達陰性(－)，Ki67表達為陽性(+,60％)，Pax-8表達為陰性(－)，SMA表達陰性(－)，TG表達為陰性(－)，TTF1表達為陰性(－)。

本發明還提供如上所述人甲狀腺未分化癌細胞系或其子代細胞系在作為人甲狀腺未分化癌的細胞模型中的應用。

本發明還提供如上所述人甲狀腺未分化癌細胞系或其子代細胞系在研究人甲狀腺未分化癌發生、發展、轉移機理中的應用。

本發明還提供如上所述人甲狀腺未分化癌細胞系或其子代細胞系在研究人甲狀腺未分化癌的耐藥機理或篩選治療人甲狀腺未分化癌藥物中的應用。

本發明中，提供了一種人甲狀腺未分化癌細胞系的建立方法：獲取甲狀腺未分化癌患者的癌組織標本進行酶消化原代培養，原代培養3周進行單細胞懸液克隆純化，后開始每周傳代1次，持續穩定培養至今，已傳代數50代以外，活性較強且能穩定傳代，命名該甲狀腺未分化癌細胞系為ZJB-ATC1。