[發明專利]一種用于測定禽蛋及禽蛋制品中五氯酚殘留量的方法

在審

• 申請號: 201710717458.2
• 申請日: 2017-08-21
• 公開（公告）號: CN107632080A
• 公開（公告）日: 2018-01-26
• 發明（設計）人: 金米聰;陳曉紅;潘勝東;趙永綱
• 申請（專利權）人: 寧波市疾病預防控制中心
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/08
• 代理公司: 寧波誠源專利事務所有限公司33102
• 代理人: 袁忠衛

1.一種用于測定禽蛋及禽蛋制品中五氯酚殘留量的方法，其特征在于包括如下步驟：

1)提?。喝【哂写硇缘那莸凹扒莸爸破窐悠罚浞只靹蚝蠓Q取1.0～5.0g于一離心管中，加入4～6μL的1.0mg/L ¹³C₆-PCP內標使用液和5～15mL的含5.0％～10.0％(V/V)三乙胺的乙腈-水溶液(60～80/40～20,V/V)，勻漿，超聲提取5～15min，渦旋5～15min，傾倒出上清液于另一離心管中，然后8000～9000r/min離心4～6min，吸取4～6mL上清液于具塞試管內，加入1.5～2.5mL水，混勻后，待凈化；

2)富集凈化：將上述提取液加入已經用水和甲醇活化和平衡的混合型陰離子交換小柱中，控制流速1.5～2.5mL/min，然后分別用甲醇、水以及含1.0％～5.0％(V/V)甲酸的甲醇/水溶液(50/50，V/V)進行淋洗，吹干后用含6.0％～15.0％(V/V)甲酸的甲醇溶液分次洗脫，并收集，洗脫液于35～45℃氮氣吹至近干，用甲醇復溶并定容至1.0mL，經0.18～0.22μm濾膜過濾后，供液相色譜串聯質譜測定。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述禽蛋及禽蛋制品為雞蛋、鴨蛋、鵪鶉蛋或蛋糕中的一種。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述步驟1)中的乙腈-水溶液的體積比為60:40、70:30、80:20中的一種，三乙胺-(乙腈-水溶液)的混合液中三乙胺與乙腈-水溶液的體積比為5～10:100。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于：所述乙腈-水溶液的體積比為70:30，三乙胺與乙腈-水溶液的體積比為8:100。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述步驟2)中的混合型陰離子交換小柱采用的填料是磁性胺基化陰離子交換復合材料和普通C18填料按重量比70mg/30mg、80mg/20mg、90mg/10mg、100mg/0mg混合而成，小柱是采用6mL空管填裝而成，填料量為150mg，用于淋洗的甲醇、水以及含1.0％～5.0％(V/V)甲酸的甲醇/水溶液均為6mL。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于：所述磁性胺基化陰離子交換復合材料是一種采用N-乙烯基吡咯烷酮和四乙烯五胺(TEPA)在已經包覆二氧化硅的磁性四氧化三鐵表面經聚合反應而獲得的復合材料，該復合材料為球形，直徑為30～80μm，比表面積300～600m²/g，碳載量2～5％，交換容量0.5～2meq/g，磁性胺基化陰離子交換復合材料與普通C18填料的重量比為80mg/20mg。

7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述步驟2)中含1.0％～5.0％(V/V)甲酸的甲醇/水溶液中甲酸的含量為1.0％、2.0％、3.0％、4.0％和5.0％(V/V)中的一種；含6.0％～15.0％(V/V)甲酸的甲醇溶液中甲酸的含量為6.0％、7.0％、8.0％、9.0％、10.0％、11.0％、12.0％、13.0％、14.0％和15.0％(V/V)中的一種。

8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于：所述步驟2)中含1.0％～5.0％(V/V)甲酸的甲醇/水溶液(50/50，V/V)中甲酸的含量為2.0％；含6.0％～15.0％(V/V)甲酸的甲醇溶液中甲酸的含量為10.0％。

9.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述液相色譜串聯質譜分析分析采用XR-ODS III(150mm×2.1mmi.d.,2.2μm)柱，以含5mmol/L乙酸銨和0.1％甲酸的水溶液(A相)和含5mmol/L乙酸銨和0.1％甲酸的乙腈溶液(B相)為流動相進行梯度洗脫。

10.根據權利要求9所述的方法，其特征在于：所述梯度洗脫的程序：0-1.00min：40％～90％(B相)，1.00-3.00min：90％(B相)，3.00-3.01min：90％～40％(B相)，3.01-5.00min：40％(B相)；離子源：電噴霧電離(ESI)；掃描方式：負離子掃描；定量方式：多反應監測模式(MRM)，同位素內標法；PCP定量離子對(m/z)：264.8>35.0，266.8>35.0；¹³C₆-PCP定量離子對(m/z)：270.8>35.0，272.8>35.0；離子源溫度(TEM)：500℃；掃描時間：50ms；碰撞室出口電壓(CXP)：10.0V；碰撞室入口電壓(EP)：10.0V。