[發明專利]一種肝素化的細菌納米纖維素/殼聚糖復合管及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201710712647.0
• 申請日: 2017-08-18
• 公開（公告）號: CN107376015B
• 公開（公告）日: 2020-11-13
• 發明（設計）人: 洪楓;包露涵;李雪;唐敬玉;陳琳
• 申請（專利權）人: 東華大學
• 主分類號: A61L27/20
• 分類號: A61L27/20;A61L27/34;A61L27/50;A61L27/58;A61L33/10
• 代理公司: 上海泰能知識產權代理事務所 31233
• 代理人: 黃志達;魏峯

1.一種肝素化的細菌納米纖維素/殼聚糖復合管，其特征在于：具有3D纖維網絡結構，先讓殼聚糖沉積在納米纖維的表面和纖維網絡內部，然后肝素接枝在細菌納米纖維素和殼聚糖上，所述肝素與殼聚糖生成酰胺鍵，又與細菌納米纖維素生成酯鍵。

2.一種肝素化的細菌納米纖維素/殼聚糖復合管的制備方法，包括：

(1)通過原位培養得到細菌納米纖維素BNC管，置于堿性溶液中水浴反應，然后清洗，得到預處理的BNC管；其中堿性溶液的濃度為0.5～5％(w/v)；

或通過原位培養得到BNC充分粉碎得到BNC勻漿，灌注到模具中，反復凍融，然后冷凍，經冷凍干燥得到預處理的BNC管；其中BNC勻漿中的纖維素干重含量為0.5～1％；

(2)將步驟(1)得到的預處理的BNC管置于殼聚糖CH的酸性溶液中，水浴震蕩，然后浸入堿性溶液中靜置3～5h，然后清洗，得到殼聚糖/細菌納米纖維素BNC/CH復合管；其中殼聚糖的濃度為0.1～5％(w/v)，酸性溶液的濃度為0.5～5％(v/v)，堿性溶液的濃度為0.5～5％(w/v)；

(3)將步驟(2)得到的BNC/CH復合管置于pH＝5～6的緩沖液中，水浴震蕩，然后置于肝素Hep交聯體系中再次水浴震蕩，然后清洗，得到肝素化的細菌納米纖維素/殼聚糖BNC/CH-Hep復合管。

3.根據權利要求2所述的一種肝素化的細菌納米纖維素/殼聚糖復合管的制備方法，其特征在于：所述步驟(1)中的通過原位培養得到的BNC管的內徑為2～15mm，外徑為8～20mm，長度為30～200mm；堿性溶液為NaOH溶液；模具為直徑為2～3mm的玻璃棒與內徑為5～8mm，厚度為0.8～1.2mm的聚丙烯管之間的空腔，兩端用橡膠塞固定，或為外徑為2～3mm，厚度為0.5～1mm的聚四氟乙烯管/硅膠管與內徑為5～8mm，厚度為0.5～1.2mm的聚丙烯管之間的空腔，兩端用硅膠塞固定。

4.根據權利要求2所述的一種肝素化的細菌納米纖維素/殼聚糖復合管的制備方法，其特征在于：所述步驟(1)中原位培養為原位靜置培養或原位動態培養；水浴反應的工藝參數為：反應溫度為75～85℃，反應時間為3～5h；凍融的工藝參數為：在-20℃和30℃反復凍融3～5次；冷凍的工藝參數為：冷凍溫度為-85～-75℃，冷凍時間為3～5h。

5.根據權利要求2所述的一種肝素化的細菌納米纖維素/殼聚糖復合管的制備方法，其特征在于：所述步驟(1)、(2)和(3)中清洗的工藝為：用超純水反復清洗至中性。

6.根據權利要求2所述的一種肝素化的細菌納米纖維素/殼聚糖復合管的制備方法，其特征在于：所述步驟(2)中的酸性溶液為醋酸、鹽酸或檸檬酸溶液中的一種或幾種；堿性溶液為氫氧化鈉、氫氧化鈣、碳酸鈉或碳酸氫鈉溶液中的一種或幾種。

7.根據權利要求2所述的一種肝素化的細菌納米纖維素/殼聚糖復合管的制備方法，其特征在于：所述步驟(2)中水浴震蕩的工藝參數為：震蕩溫度為25～35℃，震蕩轉速為90～110rpm，震蕩時間為10～14h。

8.根據權利要求2所述的一種肝素化的細菌納米纖維素/殼聚糖復合管的制備方法，其特征在于：所述步驟(3)中的緩沖液為濃度為0.01～0.1M的2-嗎啉乙磺酸MES緩沖液；肝素交聯體系為碳化二亞胺/N-羥基琥珀酰亞胺EDC/NHS肝素交聯體系，其中含有0.5～10mg/mL的肝素鈉，0.2～0.3M的NaCl，0.03～0.1M的NHS，0.03～0.2M的EDC以及0.01～0.1M的MES緩沖液。

9.根據權利要求2所述的一種肝素化的細菌納米纖維素/殼聚糖復合管的制備方法，其特征在于：所述步驟(3)中水浴震蕩的工藝參數為：震蕩溫度為25～35℃，震蕩轉速為90～110rpm，震蕩時間為2～4h；再次水浴震蕩的工藝參數為：震蕩溫度為25～35℃，震蕩轉速為90～110rpm，震蕩時間為12～24h。

10.一種如權利要求1所述的肝素化的細菌納米纖維素/殼聚糖復合管的應用，其特征在于：用于人工血管，神經導管，人工氣管，導尿管，尿道修復的醫療器械和組織工程領域。