[發(fā)明專利]一株海洋假交替單胞菌及其脫色絮凝劑制法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710707711.6
• 申請日: 2017-08-17
• 公開（公告）號: CN107805614B
• 公開（公告）日: 2020-01-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 穆軍;楊橋;崔霞;王東方;王玉霞
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江海洋大學(xué)
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P19/04;C02F3/34;C12R1/01
• 代理公司: 33213 杭州浙科專利事務(wù)所(普通合伙)
• 代理人: 吳秉中

1. 一株海洋假交替單胞菌的脫色絮凝劑制法，包括種子液培養(yǎng)、液體培養(yǎng)基的制備、擴(kuò)大發(fā)酵培養(yǎng)、脫色絮凝劑的制備，其特征在于：所述的液體培養(yǎng)基的成分為：農(nóng)作物廢棄物水解液150-250ml/L、硫酸銨0.5-1.0g/L、酵母膏0.4-0.6g/L、磷酸氫二鉀1.5-5 g/L、磷酸二氫鉀0.4-2g/L和余量陳化海水或人工海水；調(diào)節(jié)pH為7.2-7.4，115-121℃高壓滅菌20-30min,其中，人工海水配方為：氯化鈉25.0 g/L、氯化鎂1.9g/L、硫酸鎂3.1 g/L、氯化鈣1.3g/L、碳酸氫鈉0.2 g/L、氯化鉀0.68g/L、溴化鈉0.06 g/L、硼酸0.058 g/L、硅酸鈉0.0024g/L、磷酸0.002 g/L、六氯化二鋁 0.014 g/L、氨水 0.002 g/L、硝酸鋰 0.0014g/L、蒸餾水余量;將農(nóng)作物廢棄物切段烘干后粉碎過篩，按料液比1:4-10加入0.7-2.5%硫酸水解，水解溫度為105-121℃，水解時間為1-4h，水解完加入氫氧化鈣調(diào)節(jié)至中性，高速離心取上清液即為農(nóng)作物廢棄物水解液;所述的種子液培養(yǎng)步驟為先在斜面培養(yǎng)基上接種保藏號為CGMCC No. 12913的海洋細(xì)菌Pseudoalteromonas sp. GHS18，并于22-27℃恒溫培養(yǎng)24-72h，將菌種活化，再加入培養(yǎng)基體積0.7-1.3倍的無菌水，振蕩制得種子液;

所述的斜面培養(yǎng)基成分為：葡萄糖15-25g/L、尿素0.44-0.52g/L、硫酸銨0.19-0.24g/L、酵母膏0.4-0.6g/L、磷酸氫二鉀1.5-5 g/L、磷酸二氫鉀0.4-2g/L、瓊脂12-17g/L和余量陳化海水或人工海水；調(diào)節(jié)pH為7.2-7.4，115-121℃高壓滅菌20-35min,其中，人工海水配方為：氯化鈉25.0 g/L、氯化鎂1.9g/L、硫酸鎂3.1 g/L、氯化鈣1.3 g/L、碳酸氫鈉0.2 g/L、氯化鉀0.68g/L、溴化鈉0.06 g/L、硼酸0.058 g/L、硅酸鈉0.0024 g/L、磷酸0.002 g/L、六氯化二鋁 0.014 g/L、氨水 0.002 g/L、硝酸鋰 0.0014g/L、蒸餾水余量。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一株海洋假交替單胞菌的脫色絮凝劑制法，其特征在于：所述的擴(kuò)大發(fā)酵培養(yǎng)步驟為每100ml液體發(fā)酵培養(yǎng)基接入0.2-0.5ml種子液和6-9g載體，于22-27℃恒溫?fù)u床發(fā)酵培養(yǎng)；搖床速率為100-140r/min，發(fā)酵培養(yǎng)時間為24-72h；所述載體為沙土，所述沙土重量比組成為60-90%沙和10-40%土。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一株海洋假交替單胞菌的脫色絮凝劑制法，其特征在于：所述的脫色絮凝劑的制備步驟為將發(fā)酵液靜置或低速離心，取下層固體，噴霧干燥或冷凍干燥得到脫色絮凝劑。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一株海洋假交替單胞菌的脫色絮凝劑制法，其特征在于：所述的農(nóng)作物廢棄物為禾本科植物秸稈。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一株海洋假交替單胞菌的脫色絮凝劑制法，其特征在于：所述的沙土優(yōu)選菲律賓蛤仔養(yǎng)殖地的天然沙土。