[發明專利]一種pH響應型超靈敏納米熒光探針及制備方法

在審

• 申請號: 201710703148.5
• 申請日: 2017-08-16
• 公開（公告）號: CN107638572A
• 公開（公告）日: 2018-01-30
• 發明（設計）人: 王忠良;王永東;張瑞麗;賈茜;胥強強;喬晁強;田捷
• 申請（專利權）人: 西安電子科技大學
• 主分類號: A61K49/00
• 分類號: A61K49/00
• 代理公司: 西安長和專利代理有限公司61227
• 代理人: 黃偉洪

1.一種pH響應型超靈敏納米熒光探針，其特征在于，所述pH響應型超靈敏納米熒光探針由pH響應性基質材料和有熒光有機小分子染料組成；

所述pH響應性基質材料為帶正電或帶負電pH響應性材料：磷酸鈣、羥基磷酸鈣、氟磷灰石、碳酸鈣、ZIF系列；

所述熒光有機小分子染料為帶正電染料或帶負電染料。

2.如權利要求1所述的pH響應型超靈敏納米熒光探針，其特征在于，所述帶正電染料為：IR780，RhB，IR800。

3.如權利要求1所述的pH響應型超靈敏納米熒光探針，其特征在于，所述帶負電染料為：Cy3、Cy5、Cy5.5、Cy7、ICG、ICG-Der-01、ICG-Der-02、ICG-Der-03、IR820、Alexa Fluor 750、Alexa Fluor 700、Alexa Fluor 680、Alexa Fluor 660、Alexa Fluor 647、Alexa Fluor 635、Alexa Fluor 633、Alexa Fluor 610、Alexa Fluor 594、Alexa Fluor 568、Alexa Fluor 555、Alexa Fluor 546、Alexa Fluor 532、Alexa Fluor 514、Alexa Fluor 500、Alexa Fluor 488、FITC。

4.一種如權利要求1所述pH響應型超靈敏納米熒光探針的制備方法，其特征在于，所述pH響應型超靈敏納米熒光探針的制備方法包括以下三種方法，具體為：

第一種方法，帶負電基質材料包覆帶正電染料，通過PAA與帶正電染料靜電作用而使染料吸附于PAA分子鏈上，吸附染料后的PAA在異丙醇中自組裝形成模版，同時通過聚集淬滅染料的熒光；PAA上裸露羧基通過與Ca²⁺配位，通過調節pH并加入磷酸鹽礦化使磷酸鈣沉積在PAA球表面，形成染料包覆的納米粒子；

第二種方法，帶負電基質材料包覆帶負電染料，通過PEI對帶負電染料的吸附使染料富集在PEI鏈，同時加入帶負電的PAA，PEI同時吸附染料和PAA，自組裝成PEI/PAA納米球，PAA上裸露羧基通過與Ca²⁺配位，通過調節pH并加入磷酸鹽礦化使磷酸鈣沉積在PAA球表面，形成染料包覆的納米粒子；

第三種方法，帶正電的基質材料包覆帶負電的染料，利用甲基咪唑和包覆染料的互相靜電吸附作用使染料分子吸附配體分子，同時導致染料的聚集，加入金屬離子與配體配位形成穩定的三維立體結構，形成染料包覆的納米粒子。

5.如權利要求4所述的pH響應型超靈敏納米熒光探針的制備方法，其特征在于，所述第一種方法中：pH響應性基質材料是磷酸鈣，碳酸鈣，羥基磷酸鈣，氟磷灰石；帶正電染料是IR780、RhB、IR800。

6.如權利要求4所述的pH響應型超靈敏納米熒光探針的制備方法，其特征在于，所述第二種方法中：pH響應性基質材料是磷酸鈣(CaP)，碳酸鈣，羥基磷酸鈣，氟磷灰石；負電染料是ICG、IR820、Alexa Fluor系列染料以及Cy系列染料。

7.如權利要求4所述的pH響應型超靈敏納米熒光探針的制備方法，其特征在于，所述第三種方法中：pH響應性基質材料是ZIF系列的MOF材料；負電染料可以是ICG、IR820、Alexa Fluor系列染料以及Cy系列染料。

8.一種如權利要求1或4所述pH響應型超靈敏納米熒光探針的使用方法，其特征在于，所述使用方法包括：

納米粒子尾靜脈注射進入小鼠體內，通過EPR效應到達腫瘤部位并在腫瘤部位達到富集，在正常組織和血液中，pH呈中性或弱堿性，納米粒子中熒光分子處于聚集淬滅狀態，在腫瘤部位由于其弱酸性條件引起基質材料CaP溶解并釋放熒光分子，IR780恢復自由分子狀態后熒光恢復，實現熒光增強。

9.一種由權利要求1～3任意一項所述pH響應型超靈敏納米熒光探針制備的CaP/IR780探針、CaCO₃/RhB探針。

10.一種由權利要求1～3任意一項所述pH響應型超靈敏納米熒光探針制備的CaP/ICG探針、CaCO₃/Cy5探針、ZIF-8/ICG探針。