[發明專利]一種獲得甜瓜屬野生種與栽培厚皮甜瓜雜交種的方法

有效

• 申請號: 201710702688.1
• 申請日: 2017-08-16
• 公開（公告）號: CN107306788B
• 公開（公告）日: 2019-05-07
• 發明（設計）人: 孫春青;馬志虎;戴忠良;潘躍平;毛忠良;張振超;吳國平;秦文斌;姚悅梅;潘永飛
• 申請（專利權）人: 江蘇丘陵地區鎮江農業科學研究所
• 主分類號: A01H1/02
• 分類號: A01H1/02;A01H4/00
• 代理公司: 南京申云知識產權代理事務所(普通合伙) 32274
• 代理人: 王云

本發明涉及一種獲得甜瓜屬野生種與栽培厚皮甜瓜雜交種的方法，屬于植物育種技術領域。其主要技術措施是：甜瓜屬種間雜交后，將授粉后15?21d的子房進行無菌處理，將其中的幼胚取出，后將幼胚置于添加激素的1/2MS培養基中進行培養，經過繼代培養后得到幼苗。培養溫度26℃，每日光照10?12 h，光照度1600?2000 lx。本發明能夠解決甜瓜屬種間雜交生殖障礙這一關鍵技術問題，同時可得到甜瓜屬種間的雜交種實生苗。

技術領域

本發明涉及一種獲得甜瓜屬野生種與栽培厚皮甜瓜雜交種的方法，屬于植物育種技術領域。

背景技術

甜瓜(Cucumis melo L.)為葫蘆科甜瓜屬一年生蔓性草本植物，在國內外廣泛栽培。由于長期忽略甜瓜抗性資源的收集、保存和利用，已經造成甜瓜種質資源品種較單一、品種間遺傳差異小、種質資源遺傳背景狹窄等問題。而且，隨著重茬加重，甜瓜病害已經有提前和加重趨勢，其中白粉病和蔓枯病已經成為我國甜瓜生產的主要病害，尤其在高濕多雨的東部沿海地區，蔓枯病常導致厚皮甜瓜栽培毀滅性的后果。而利用甜瓜屬野生種改良栽培甜瓜抗性是目前提高甜瓜抗性的最有效方法之一，然而，由于雜交生殖障礙等因素制約，導致甜瓜屬野生種與栽培甜瓜雜交很難成功。因此解決這一難題對甜瓜高抗新品種的選育具有重要的意義。

而利用胚培養技術來克服甜瓜種間雜交生殖障礙可以直接獲得甜瓜野生種與栽培甜瓜雜交種。這一技術的公布不僅可以填補國內甜瓜胚培養技術的空白，而且可以提供一種改良栽培甜瓜抗性的方法，從而加速栽培甜瓜的栽培范圍和面積。

發明內容

針對現有技術存在的缺陷，本發明的目的在于提供一種獲得甜瓜屬野生種與栽培厚皮甜瓜雜交種的方法，此方法能夠解決甜瓜屬種間雜交生殖障礙這一關鍵技術問題，同時可得到種間雜交種實生苗。

本發明通過以下技術方案解決技術問題：一種獲得甜瓜屬野生種與栽培厚皮甜瓜雜交種的方法，主要包括以下步驟：

步驟一、以栽培甜瓜為母本，以甜瓜屬野生種‘馬泡瓜’為父本進行雜交授粉，授粉后進行套袋隔離；

步驟二、在授粉后一定時間段內，將雜交花序的子房用解剖針輕輕剝出并且不能傷及胚，之后將子房進行消毒殺菌，然后在超凈工作臺用滅菌的刀片劃開種皮并取出幼胚；

步驟三、將幼胚置于培養基中進行培養；40d后轉入繼代培養基中繼代培養，培養溫度26℃，每日光照10-12h，光照度1600-2000lx。

進一步地，步驟一中，開花前一天，將母本雌花去雄套袋隔離，父本雄花套袋隔離；人工授粉工作選擇在晴天進行，花朵開放當天進行授粉。

進一步地，所述步驟二中，取子房的時間為授粉后15-21d。

進一步地，所述步驟二中，消毒殺菌的具體方法為：將子房用流水沖洗10min，再用0.4％的NaCl浸泡30min，后再用水沖洗5-6次，再用2％的NaOH浸泡30min，取出后放于2％的NaClO中消毒10min左右，無菌水沖洗5-6次。

進一步地，步驟三中，所述培養基為：1/2MS+NAA 2.0mg/L+KT 2.0mg/L+30g/L蔗糖+6.5g/L瓊脂粉。

進一步地，步驟三中，所述繼代培養基為MS+KT 1.5mg/L+NAA 0.2mg/L+30g/L蔗糖+6.5g/L瓊脂粉。

有益效果：本發明提供的獲得甜瓜屬野生種與栽培厚皮甜瓜雜交種的方法，與現有技術相比具有如下優點和積極效果：

(1)本發明利用甜瓜屬野生種與栽培甜瓜雜交，結合胚培養技術進行種質創新，拓寬了栽培甜瓜的遺傳基礎，交換了甜瓜屬野生種的優異基因，實現了種間雜交，創造了一批新種質。