[發(fā)明專利]一種糊粉層花青素合成型鮮食玉米參考系及其選育方法和應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710702336.6
• 申請(qǐng)日: 2017-08-16
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107278881B
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-01-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李廷春;楊華應(yīng);董慶;張瑋;劉桂虎;周應(yīng)兵;陳洪儉
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院煙草研究所
• 主分類號(hào): C12Q1/6895
• 分類號(hào): C12Q1/6895;C12N15/11;C12N15/29;A01H1/02;A01H5/10;A01H6/46
• 代理公司: 合肥中谷知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 34146
• 代理人: 曾弦

1.一種糊粉層花青素合成型鮮食玉米參考系的選育方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)在常規(guī)玉米種質(zhì)中選擇糊粉層富含花青素的玉米自交系與糊粉層無(wú)色的玉米自交系為親本進(jìn)行雜交，再連續(xù)自交七代，獲得糊粉層無(wú)色的玉米自交系；

(2)利用R、B基因的核苷酸序列設(shè)計(jì)實(shí)時(shí)熒光定量PCR引物，對(duì)步驟(2)經(jīng)雜交和多次自交獲得的糊粉層無(wú)色的玉米自交系進(jìn)行R/B基因表達(dá)量的測(cè)定，篩選僅攜帶R基因的R基因型玉米自交系和僅攜帶B基因的B基因型玉米自交系，作為糊粉層花青素合成型鮮食玉米參考系；其中，所述R基因型玉米自交系為含如SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的R基因的糊粉層無(wú)色的玉米自交系，所述B基因型玉米自交系為含如SEQ ID NO.2所示核苷酸序列的B基因的糊粉層無(wú)色的玉米自交系。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種糊粉層花青素合成型鮮食玉米參考系的選育方法，其特征在于，所述步驟(2)中，鑒定R基因的實(shí)時(shí)熒光定量PCR引物為：

SEQ ID NO.3：R-F：AGCGACGAGAGAAGCTCAAC

SEQ ID NO.4：R-R：TAGGCTATCGTTTCGGCGAG。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種糊粉層花青素合成型鮮食玉米參考系的選育方法，其特征在于，所述步驟(2)中，鑒定B基因的實(shí)時(shí)熒光定量PCR引物為：

SEQ ID NO.5：B-F：CCATCCTCGCCGAAACGATA

SEQ ID NO.6：B-R：TGGAGCCCACACAGACTTTC。

4.一種利用糊粉層花青素合成型鮮食玉米參考系鑒定玉米自交系基因型的方法，其特征在于，所述參考系包括R基因型玉米自交系和B基因型玉米自交系，所述R基因型玉米自交系為含如SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的R基因的糊粉層無(wú)色的玉米自交系，所述B基因型玉米自交系為含如SEQ ID NO.2所示核苷酸序列的B基因的糊粉層無(wú)色的玉米自交系，所述方法的步驟包括：

將R基因型玉米自交系和B基因型玉米自交系分別與待鑒定的玉米自交系進(jìn)行雜交，若：

①與R基因型玉米自交系雜交的F0代種子為紫色，與B基因型玉米自交系雜交的F0代種子為無(wú)色，則該玉米自交系為B基因型自交系；

②與R基因型玉米自交系雜交的F0代種子為無(wú)色，與B基因型玉米自交系雜交的F0代種子為紫色，則該玉米自交系為R基因型自交系；

③與R、B基因型玉米自交系雜交的F0代種子均為無(wú)色，則不屬于R、B任一基因型自交系。

5.一種利用糊粉層花青素合成型鮮食玉米參考系定向培育彩色玉米品種的方法，其特征在于，所述參考系包括R基因型玉米自交系和B基因型玉米自交系，所述R基因型玉米自交系為含如SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的R基因的糊粉層無(wú)色的玉米自交系，所述B基因型玉米自交系為含如SEQ ID NO.2所示核苷酸序列的B基因的糊粉層無(wú)色的玉米自交系，所述方法包括以下步驟：

(Ⅰ)將參考系中的兩種基因型的玉米自交系分別與常規(guī)玉米種質(zhì)中的糊粉層無(wú)色的玉米自交系進(jìn)行測(cè)配，根據(jù)F0代玉米籽粒糊粉層顏色的呈現(xiàn)，判定測(cè)配玉米自交系的基因型，篩選得到基因型為R型和B型的自交系品種；

(Ⅱ)將R型和B型的自交系進(jìn)行雜交，即可得到糊粉層富含花青素的F0代種子，以及色素分離的F1代種子。