[發明專利]蛋白質溶液光學清晰度的測量方法、靜注免疫球蛋白及其乳光的測量方法

在審

• 申請號: 201710701795.2
• 申請日: 2017-08-16
• 公開（公告）號: CN107462538A
• 公開（公告）日: 2017-12-12
• 發明（設計）人: 李光飛;梁雪爽;馬小偉;潘若文;張學成;張寶獻
• 申請（專利權）人: 華蘭生物工程股份有限公司;華蘭生物工程重慶有限公司;華蘭生物工程技術（北京）有限公司;華蘭生物工程（蘇州）有限公司
• 主分類號: G01N21/33
• 分類號: G01N21/33
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙)11371
• 代理人: 魏彥

技術領域

本發明涉及生物制藥領域，具體而言，涉及一種蛋白質溶液光學清晰度的測量方法、靜注免疫球蛋白及其乳光的測量方法。

背景技術

2015版《中華人民共和國藥典》對靜注免疫球蛋白(pH4)外觀的檢定要求表述為“應為無色或淡黃色澄明液體，可帶輕微乳光，不應出現渾濁”。控制制品的乳光是本版藥典所提出的外觀檢定指標之一。現有對制品乳光程度的判斷方法依靠人工在澄明度檢測儀下進行肉眼判斷，缺少定量評價方法。

發明內容

本發明的目的在于提供一種蛋白質溶液光學清晰度的測量方法、靜注免疫球蛋白及其乳光的測量方法，其旨在提供一種新的蛋白質溶液光學清晰度的測量方法以及一種更加靈敏的靜注免疫球蛋白乳光的測量方法。

本發明提供一種技術方案：

一種蛋白質溶液光學清晰度的測量方法，其包括：用分光光度計對蛋白質溶液的吸光度進行測定。

進一步地，用紫外分光光度計對蛋白質溶液的吸光度進行測定。

進一步地，用分光光度計測定310-320nm波長處蛋白質溶液的吸光度。

進一步地，用分光光度計測定318nm波長處蛋白質溶液的吸光度。

進一步地，上述蛋白質為免疫球蛋白。

進一步地，上述免疫球蛋白來源于人體血液。

本發明還提供一種技術方案：

一種靜注免疫球蛋白乳光的測量方法，其包括用分光光度計對靜注免疫球蛋白的吸光度進行測定。

進一步地，用分光光度計測定310-320nm波長處靜注免疫球蛋白的吸光度。

進一步地，用分光光度計測定318nm波長處靜注免疫球蛋白的吸光度。

本發明還提供一種技術方案：

一種靜注免疫球蛋白，該靜注免疫球蛋白在318nm波長處吸光度低于0.26。

本發明實施例提供的蛋白質溶液光學清晰度的測量方法、靜注免疫球蛋白及其乳光的測量方法的有益效果是：

采用分光光度計可以對蛋白質的光學清晰度進行檢測，并且檢測得到的結果可信，且檢測的靈敏度高。進一步地，在310-320nm波長處，蛋白質溶液對入射光的散射效應最強，可以更加靈敏的測定出蛋白質的光學清晰度的差異。是一種適合用于取代肉眼觀察主觀評價法作為定量評價蛋白質光學清晰度的檢測方法。且本發明提供的蛋白質溶液光學清晰度的測量方法比濁度計的靈敏度更高。

附圖說明

為了更清楚地說明本發明實施例的技術方案，下面將對實施例中所需要使用的附圖作簡單地介紹，應當理解，以下附圖僅示出了本發明的某些實施例，因此不應被看作是對范圍的限定，對于本領域普通技術人員來講，在不付出創造性勞動的前提下，還可以根據這些附圖獲得其他相關的附圖。

圖1為試驗例1三個樣品的全波長光譜吸收特征疊加分析圖譜；

圖2為試驗例2中4號樣品全波長掃描光吸收圖譜；

圖3為試驗例2中5號樣品全波長掃描光吸收圖譜；

圖4為試驗例2中6號樣品全波長掃描光吸收圖譜。

具體實施方式

為使本發明實施例的目的、技術方案和優點更加清楚，下面將對本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述。實施例中未注明具體條件者，按照常規條件或制造商建議的條件進行。所用試劑或儀器未注明生產廠商者，均為可以通過市售購買獲得的常規產品。

在低溫乙醇沉淀工藝中，蛋白質沉淀后重溶操作易導致蛋白質在溶液中溶解分散不完全而產生多聚體；另外靜注免疫球蛋白的病毒巴氏滅活步驟導致制品中部分蛋白質發生不完全熱變性，蛋白質結構遭受熱損傷，疏水核心暴露而產生聚集體，這些聚集體致使靜注免疫球蛋白制品溶液產生乳光。蛋白質溶液的乳光程度與蛋白質濃度和溶液離子強度等也有關系。

現有技術中，使用垂直散射濁度計對蛋白質溶液乳光進行分析，垂直散射濁度計采用發射可見光的鎢絲燈作為光源，光源覆蓋波長400-900nm。濁度計設計原理主要為：測量溶液中粒徑較大的可見異物引起的溶液渾濁度，溶液中顆粒物的直徑對光線的散射消減有數量關系。

發明人發現，靜注免疫球蛋白溶液中的蛋白質多聚體的粒徑尺度為肉眼不可見的納米級別。在可見光區粒徑較小的蛋白質多聚體對可見光中波長最短的藍光有較強的散射能力，所以靜注免疫球蛋白制品在澄明度檢測儀下顯示淡藍色乳光。進一步地，在波長更短的非可見光區，濁度計和肉眼都無法探測到光的散射現象，可能會忽略具有乳光特性制品的更為顯著的光譜學特征。