[發明專利]一種利用濁點萃取和熒光分析法分離測定腐殖酸的方法

在審

• 申請號: 201710697970.5
• 申請日: 2017-08-15
• 公開（公告）號: CN107505297A
• 公開（公告）日: 2017-12-22
• 發明（設計）人: 王紅艷;王聰;許文文
• 申請（專利權）人: 宿州學院
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;G01N1/34;G01N1/40
• 代理公司: 合肥市浩智運專利代理事務所(普通合伙)34124
• 代理人: 王林

技術領域

本發明涉及一種測定腐殖酸的方法，尤其涉及的是一種利用濁點萃取和熒光分析法分離測定腐殖酸的方法。

背景技術

腐殖酸(Humic acid，簡稱HA)是天然存在的一種有機污染物，它不僅存在于天然水中，而且在江、河、湖、海、土壤、以及灰炭、煤中也含有較多的腐殖酸，特別是灰炭和天然煤中。腐殖酸的分子結構比較復雜，其中存在很多活潑性較高的基團，如羥基、巰基和氨基等，這些基團的存在使得其表現出一定的物理和化學性質，而導致了對水體的危害。例如腐殖酸能夠提高一些對水體有輕微污染的物質在飲用水中的溶解度，以及與空氣中的Cl₂反應生成多種對人體有害的副產物，結果會使水體中某些海藻毒素的降解得到抑制，最后將使得水體酸化。在未受到有機物質污染的天然水源中，地下水中含有的腐植酸濃度大約為25μg/L，而地表水中其濃度可能會高達36mg/L。水體中含有腐殖酸的量越高，水源質量檢測結果就越差，一般腐殖酸的濃度大約在10mg/L的天然水源是能夠供人類以及動植物直接飲用的。

天然水源中腐殖酸含量較低，水樣基體較為復雜，因此，分析前的分離富集十非常必要。目前，對于腐殖酸等有機物有多種分離富集方法，如濁點萃取、活性炭吸附、大孔吸附樹脂吸附、電滲析法收集等。其中濁點萃取更常用，它通過調節體系萃取條件(如體系酸度、平衡時間、溫度等)從而引發相分離，可以應用在對水體中有機物質和對腐殖酸等有機污染物的測定等諸多方面。濁點萃取技術可以和多種光學檢測技術聯用，如熒光光度法、原子吸收光譜法、原子發射光譜法等。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的不足，提供了一種利用濁點萃取和熒光分析法分離測定腐殖酸的方法，能夠通過熒光強度判斷腐殖酸的濃度。

本發明是通過以下技術方案實現的，本發明包括以下步驟：

(1)在離心管中加入腐殖酸標準溶液；

(2)用磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液將腐殖酸的酸度調至pH＝2～6，再加入與腐殖酸體積比為20:1～5的5％TritonX-100溶液，最后定容、充分搖勻，將離心管置于60～100℃恒溫水浴中加熱4～12min，趁熱取出，以4000r/min轉速離心2～18min；

(3)室溫下自然冷卻，棄除上層清液，再將離心管底部沉淀轉移到比色管中，加二次蒸餾水定容至刻度、搖勻，使得沉淀完全溶解；

(4)檢測其在655nm處的熒光強度。

所述腐殖酸標準溶液的配置過程如下：將腐殖酸原粉配備成1.00g/L儲藏液避光保存，使用前再稀釋至100mg/L待用。

作為本發明的優選方式之一，所述步驟(2)中，用磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液將腐殖酸的酸度調至pH＝2.98。

作為本發明的優選方式之一，所述步驟(2)中，加入與腐殖酸體積比為20:3的5％TritonX-100溶液.

作為本發明的優選方式之一，所述步驟(2)中，將離心管置于80℃恒溫水浴中加熱8min。

作為本發明的優選方式之一，所述步驟(2)中，以4000r/min轉速離心10min。

本發明相比現有技術具有以下優點：本發明檢測方法簡單，以濁點萃取技術為富集手段并結合熒光分析法成功創建了分離測定環境水中腐殖酸等有機污染物的方法。利用5％的Triton X-100溶液對腐殖酸等有機污染物進行萃取、富集和分離，提高了熒光分析方法的選擇性。

附圖說明

圖1是本發明腐殖酸標準溶液的熒光發射光譜圖；

圖2是溶液酸度與熒光強度的關系示意圖；

圖3是TritonX-100溶液用量與熒光強度的關系示意圖；

圖4是體系平衡溫度與熒光強度的關系示意圖；

圖5是水浴加熱時間與熒光強度的關系示意圖；

圖6是離心時間與熒光強度的關系示意圖；

圖7是腐殖酸的工作曲線圖。

具體實施方式

下面對本發明的實施例作詳細說明，本實施例在以本發明技術方案為前提下進行實施，給出了詳細的實施方式和具體的操作過程，但本發明的保護范圍不限于下述的實施例。

優化各個測試條件如下：

本實施例的主要儀器為：

F-4500型熒光分光光度計；HH-1型恒溫水浴鍋；pHS-3C型精密pH計；80-2型電動離心機；FA 2004N型電子天平；JK-450B型超聲波清洗器。

主要試劑為：