[發明專利]無刺蜂蜂蜜多酚物質的提取及其在免疫調節中的應用

有效

• 申請號: 201710696882.3
• 申請日: 2017-08-15
• 公開（公告）號: CN107432877B
• 公開（公告）日: 2019-11-26
• 發明（設計）人: 王凱;梁馨文;王亮;吳黎明;薛曉鋒
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院蜜蜂研究所
• 主分類號: A61K35/644
• 分類號: A61K35/644;A61P37/02;A61P29/00
• 代理公司: 11002 北京路浩知識產權代理有限公司
• 代理人: 王文君;王文紅<國際申請>=<國際公布>

本發明提出一種無刺蜂蜂蜜多酚物質的提取方法，包括步驟：1)無刺蜂蜂蜜用醋酸水溶液溶解，經過攪拌和超聲處理后，過濾，分離出無刺蜂蜂蜜水溶液；2)將大孔樹脂倒入無刺蜂蜂蜜水溶液中，攪拌吸附0.5～2h；3)將吸附后的大孔樹脂填入柱中，分別用醋酸水溶液、純水淋洗，最后用乙醇溶液洗脫，4)洗脫液減壓真空濃縮至成為固形物，復溶于純水，并用乙酸乙酯萃取。本發明通過XAD?2柱層析提取富集無刺蜂蜂蜜有效成分，進行了無刺蜂蜂蜜提取物的成分分析、應用研究，發現無刺蜂蜂蜜提取物具有豐富的黃酮、多酚類活性成分，具有顯著的抗氧化、抗炎活性，對于預防和治療炎癥疾病藥物、食品、保健品的開發和應用具有廣泛的應用價值。

技術領域

本發明屬于生物化學領域，具體涉及一種蜂蜜的提取方法和提取產物。

背景技術

無刺蜂(Stingless bees)是一類營群體生活并能釀蜜的昆蟲，隸屬于膜翅目(Hymenoptera)、蜜蜂總科(Apoidea)、蜜蜂科(Apidae)，蜜蜂亞科(Apinae)，麥蜂族(MeliPonini)，無刺蜂屬(Trigona Jurine)，體呈黑色，體小靈活，是熱帶地區植物的主要傳粉蜂種，主要分布于熱帶和亞熱帶地區，我國僅在云南、海南和臺灣地區的田間森林有分布。無刺蜂蜂蜜是無刺蜂從植物蜜腺或其他部位采來的花蜜，經充分釀造，存儲于巢房的甜蜜物質，與西方蜜蜂蜂蜜相比，具有水分含量高、酸度高、酶值低、粘度低等特點。蜂蜜早已被人們作為一種天然的甜味劑，由于其存在的活性成分，也被廣泛應用于臨床實踐。已有報道證明蜂蜜具有多種生物活性，而對無刺蜂蜂蜜的活性成分的提取和分離研究進行的還比較少。

無刺蜂蜂蜜含有豐富的營養物質和生物活性成分，世界范圍內，主要產自秘魯、瓜地馬拉、墨西哥、委內瑞拉等國家。Melipona spp，Scaptotrigona spp，Trigona spp等無刺蜂屬蜂蜜已廣泛應用于傳統醫學，具有顯著的抗氧化、抗菌、抗突變、促進傷口愈合等生物活性功能。無刺蜂蜂蜜的化學成分復雜，尤其是其主要活性成分酚酸黃酮類物質，因蜂種、采集植物、地理環境、氣候、季節的變化而導致無刺蜂蜂蜜成分、活性的差異。

我國已發現的無刺蜂蜂種有黃紋無刺蜂(Trigona ventralis Smith)、頂無刺蜂(T.terminate Smith)、暗翅無刺蜂(T.vidua Lepeletier)、蜜色無刺蜂(T.luteaBingham)、黑胸無刺蜂(T.pagdeni Sehwarz)、棕足無刺蜂(T.smithii Smith)、棕胸無刺蜂(T.thoracica Smith)、黑腿無刺蜂(T.vidua Smith)、黑腹無刺蜂(T.canifrons Smith)、黃跗無刺蜂(T.iridipennis Smith)，其中以黃紋無刺蜂分布最廣、數量最多。但無有關我國無刺蜂蜂蜜成分和活性的研究報道。

發明內容

針對本領域的不足之處，本發明的目的是提供一種無刺蜂蜂蜜的提取方法。

本發明的另一目的是提出所述提取方法獲得的提取物。

本發明的第三個目的是提出所述提取物的應用。

實現本發明上述目的的技術方案為：

一種無刺蜂蜂蜜多酚物質的提取方法，包括步驟：

1)無刺蜂蜂蜜用醋酸水溶液溶解，經過攪拌和超聲處理后，過濾，分離出無刺蜂蜂蜜水溶液；

2)將大孔樹脂倒入無刺蜂蜂蜜水溶液中，攪拌吸附0.5～2h；

3)將吸附后的大孔樹脂填入柱中，分別用醋酸水溶液、純水淋洗(以除去極性物質，糖等)，最后用乙醇溶液洗脫并收集洗脫液，

4)洗脫液減壓真空濃縮至成為固形物，復溶于純水，并用乙酸乙酯萃取。收集乙酸乙酯層，氮氣吹干，得無刺蜂蜂蜜提取物。該提取物放置于-20℃冰箱中備用。

本提取方法可針對黃紋無刺蜂的蜂蜜但不限于此。