[發明專利]用于構建布魯氏菌突變株的質粒pZF17-30及其構建方法和應用有效
| 申請號： | 201710696023.4 | 申請日： | 2017-08-14 |
| 公開（公告）號： | CN107619833B | 公開（公告）日： | 2021-03-02 |
| 發明（設計）人： | 劉正飛;鄭可;汪洋;李娜 | 申請（專利權）人： | 華中農業大學 |
| 主分類號： | C12N15/74 | 分類號： | C12N15/74;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 武漢宇晨專利事務所 42001 | 代理人： | 江麗麗;王敏鋒 |
| 地址： | 430070 湖*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 用于 構建 布魯氏菌 突變 質粒 pzf17 30 及其 方法 應用 | ||
【權利要求書】：
1.質粒pZF17-30，其特征在于，所述質粒pZF17-30的序列為SEQ ID NO.1所示。
2.利用權利要求1所述質粒pZF17-30構建得到的載體，其特征在于，所述載體的構建方法是：利用限制性內切酶Bsa I酶切質粒pZF17-30，將特異性sgRNA與線性化載體連接，所述的sgRNA為5′-TGGAACAGTCAAAAGAACACCAAGC-3′，5′-CAAAGCTTGGTGTTCTTTTGACTGT-3′，構建的載體的序列如SEQ ID NO.3所示。
3.權利要求2所述的載體在制備布魯氏菌的單堿基突變株中的應用，其特征在于，所述的單堿基突變為virB10基因CDS區478位堿基由C突變為T。
4.含有權利要求1所述質粒pZF17-30的大腸桿菌，其特征在于，所述的大腸桿菌保藏于中國典型培養物保藏中心，其保藏編號為CCTCC No：M 2017395。
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