[發(fā)明專利]一種聲輻射力強化炎性細胞致動脈粥樣硬化仿生微泡復合體富集與靶向系統(tǒng)

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710690846.6
• 申請日: 2017-08-14
• 公開（公告）號: CN107625970B
• 公開（公告）日: 2021-03-19
• 發(fā)明（設計）人: 張鵬飛;嚴飛;李飛;毛洋
• 申請（專利權）人: 山東大學齊魯醫(yī)院;中國科學院深圳先進技術研究院
• 主分類號: A61K49/22
• 分類號: A61K49/22;A61K47/68;A61K47/54;G01N29/06
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 王志坤

1.一種炎性細胞致動脈粥樣硬化仿生微泡復合體在制造聲輻射力強化炎性細胞致動脈粥樣硬化仿生微泡復合體富集與靶向系統(tǒng)中的應用，其特征在于，所述微泡復合體包括相互連接的CD11b靶向微泡和炎性細胞；

所述CD11b靶向微泡包括脂質外殼和氣體內芯，所述脂質外殼的外表面連接有CD11b配體；

所述應用中包括超聲輻射力發(fā)生裝置，所述超聲輻射力發(fā)生裝置包括任意波形發(fā)生器、射頻功率放大器和低頻超聲探頭；

所述應用中超聲設置參數(shù)為：聚焦超聲探頭2.25MHz，焦距4.25cm，焦點面積1.00mm2，輸出電壓100mvpp，RF 50-70%，峰值負壓為 0.11MPa-0.28Mpa；

所述CD11b靶向微泡粒徑為1-2μm；

炎性細胞致動脈粥樣硬化仿生微泡復合體的制備方法包括如下步驟：

S1. 以二硬脂酰基磷脂酰膽堿（DSPC）、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺（DSPE）-聚乙二醇2000及生物素化的DSPE-聚乙二醇2000為膜材，通過薄膜-水化法制備得到超聲微泡造影劑；

步驟S1中超聲微泡造影劑的具體制備方法為：

S11. 將二硬脂酰基磷脂酰膽堿（DSPC）、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺（DSPE）-聚乙二醇2000及生物素化的DSPE-聚乙二醇2000按質量比7：2：1溶于氯仿中制成懸浮液，將所述懸浮液充分混勻，在干燥氮氣（N₂）作用下形成磷脂薄膜；

S12. 在磷脂薄膜中加入水化液，在搖床中恒溫水化，后置于水浴式超聲振蕩器中震蕩至均一且通明的液體即得超聲微泡造影劑；

S2. 向超聲微泡造影劑通入生物惰性氣體，振蕩制備超聲脂質微泡；

S3. 將超聲脂質微泡與CD11b配體通過生物素-鏈霉素反應連接制備CD11b靶向微泡；

S4. CD11b靶向微泡與炎性細胞通過抗原抗體反應構建炎性細胞-CD11b-微泡復合體即炎性細胞致動脈粥樣硬化仿生微泡復合體；

所述炎性細胞為ApoE-/-小鼠外周血中中性粒細胞。

2.如權利要求1所述的一種炎性細胞致動脈粥樣硬化仿生微泡復合體在制造聲輻射力強化炎性細胞致動脈粥樣硬化仿生微泡復合體富集與靶向系統(tǒng)中的應用，其特征在于，

所述CD11b配體包括多克隆抗體、單克隆抗體、天然抗體片段、重組抗體片段和多特異性抗體中的任意一種。

3.如權利要求2所述的一種炎性細胞致動脈粥樣硬化仿生微泡復合體在制造聲輻射力強化炎性細胞致動脈粥樣硬化仿生微泡復合體富集與靶向系統(tǒng)中的應用，其特征在于，所述CD11b配體為單克隆抗體。

4.如權利要求1所述的一種炎性細胞致動脈粥樣硬化仿生微泡復合體在制造聲輻射力強化炎性細胞致動脈粥樣硬化仿生微泡復合體富集與靶向系統(tǒng)中的應用，其特征在于，所述氣體內芯為全氟丙烷氣體(C₃F₈)。

5.如權利要求1所述的一種炎性細胞致動脈粥樣硬化仿生微泡復合體在制造聲輻射力強化炎性細胞致動脈粥樣硬化仿生微泡復合體富集與靶向系統(tǒng)中的應用，其特征在于，其中，所述水化液為pH7.4的0.1M Tris緩沖液；

所述搖床設定溫度為50~70℃，水化時間為0.5~2h。

6.如權利要求5所述的一種炎性細胞致動脈粥樣硬化仿生微泡復合體在制造聲輻射力強化炎性細胞致動脈粥樣硬化仿生微泡復合體富集與靶向系統(tǒng)中的應用，其特征在于，所述搖床設定溫度為65℃。

7.如權利要求1所述的一種炎性細胞致動脈粥樣硬化仿生微泡復合體在制造聲輻射力強化炎性細胞致動脈粥樣硬化仿生微泡復合體富集與靶向系統(tǒng)中的應用，其特征在于，所述CD11b配體經過生物素修飾形成生物素化CD11b配體，鏈霉親和素一端與生物素化的DSPE-聚乙二醇2000連接，一端與生物素化的CD11b配體連接，通過生物素-鏈霉素反應，形成生物素-鏈霉親和素-生物素結構。