[發(fā)明專利]LIPUS對三維支架材料上MC3T3?E1細(xì)胞內(nèi)RNA表達(dá)影響的研究方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201710690605.1 | 申請日： | 2017-08-14 |
| 公開（公告）號： | CN107345255A | 公開（公告）日： | 2017-11-14 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 吳琳;劉潔;馮麗芳;曹洪娟;劉笑涵 | 申請（專利權(quán)）人： | 中國醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 沈陽東大知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司21109 | 代理人： | 趙嬛嬛 |
| 地址： | 110002 遼寧*** | 國省代碼： | 遼寧;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | lipus 三維 支架 材料 mc3t3 e1 細(xì)胞內(nèi) rna 表達(dá) 影響 研究 方法 | ||
1.LIPUS對三維支架材料上MC3T3-E1細(xì)胞內(nèi)RNA表達(dá)影響的研究方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)將MC3T3-E1細(xì)胞接種到三維支架材料上；
(2)將接種完畢的三維支架材料和超聲探頭浸入水中，保持超聲探頭和材料的距離為5cm，從材料底部加載LIPUS，加載參數(shù)為：超聲頻率1～3.3MHz，強(qiáng)度10～100mW/cm2，10～30min/次，1次/d，加載周期為1～21d，加載過程中每2～3天更換一次MC3T3-F1細(xì)胞的培養(yǎng)基；
(3)停止加載LIPUS后，收集材料上的MC3T3-E1細(xì)胞，進(jìn)行全轉(zhuǎn)錄組和miRNA的高通量測序，篩選差異表達(dá)的mRNA、lncRNA、miRNA，并結(jié)合GO和KEGG進(jìn)行整合分析。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的LIPUS對三維支架材料上MC3T3-E1細(xì)胞內(nèi)RNA表達(dá)影響的研究方法，其特征在于，所述將MC3T3-E1成骨細(xì)胞接種到三維支架材料上，具體接種方法為：將經(jīng)過真空除氣和預(yù)濕的三維支架材料放入六孔板中；將融合度達(dá)到80％的MC3T3-E1細(xì)胞用胰蛋白酶消化得到細(xì)胞懸液；將細(xì)胞懸液均勻接種到三維支架材料上，然后在六孔板中加入培養(yǎng)基孵育。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的LIPUS對三維支架材料上MC3T3-E1細(xì)胞內(nèi)RNA表達(dá)影響的研究方法，其特征在于，所述三維支架材料為Ti-6Al-4V多孔支架材料。
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