[發明專利]一種tRF-Gly反義鏈抑制劑及其應用

有效

• 申請號: 201710686389.3
• 申請日: 2017-08-11
• 公開（公告）號: CN107459546B
• 公開（公告）日: 2018-05-15
• 發明（設計）人: 何松青;鐘伏弟;江克清
• 申請（專利權）人: 廣西醫科大學第一附屬醫院
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;A61K31/7088;A61P1/16
• 代理公司: 廣州科粵專利商標代理有限公司 44001
• 代理人: 劉明星

本發明公開了一種tRF?Gly反義鏈抑制劑及其應用。本發明利用小鼠酒精性肝病模型，對酒精性肝病小鼠肝組織和正常對照肝組織進行小分子RNA深度測序，通過分析差異表達的小分子RNA，篩選得到tRF?Gly。通過甲基化和膽固醇修飾以及在兩端添加修飾序列，化學合成tRF?Gly反義鏈抑制劑，進行小鼠體內實驗，結果表明tRF?Gly反義鏈抑制劑有效地降低ALT和AST，同時明顯降低肝臟中脂肪累積，說明tRF?Gly反義鏈抑制劑可以保護肝功能和減輕酒精性脂肪肝病。人體中tRF?Gly序列與小鼠是相同的，因此，tRF?Gly反義鏈抑制劑有望開發成為一種新的治療酒精性脂肪肝病的小分子RNA藥物。

技術領域：

本發明屬于生物醫學技術領域，具體涉及一種tRF-Gly反義鏈抑制劑及其應用。

背景技術：

酒精性肝病(alcoholic liver disease,ALD)是長期大量攝入酒精所誘發的肝臟疾病，早期表現為酒精性脂肪肝，隨著病情惡化可進一步發展為酒精性肝炎、肝硬化，甚至肝癌。在所有致病和死亡的危險因素中，濫用酒精排在第五位，已成為全球性的公共衛生問題。ALD在我國的發病率逐年上升，已成為第二大肝病病因，威脅人類健康。目前其發病機制尚不完全清楚，缺乏有效治療方法。

非編碼小分子RNA是一類20-30個核苷酸的內源性非蛋白質編碼的小RNA。研究發現：無論是動物模型標本還是人體樣本，酒精性肝病組織都存在小分子RNA表達的失調，并且通過不同的機制參與ALD的發病過程。雖然已經有相關的研究報道，但小分子RNA調控肝臟脂質代謝分子機制還有待深入研究。隨著小分子RNA深度測序技術的推廣，科學家發現細胞中存在一類來源于tRNA的新型小分子RNA(tRNA-derived fragments，tRFs)。我們知道，tRNA除了參與蛋白質合成，還有許多重要功能，比如與細胞信號通路、細胞凋亡、細胞存活以及細胞應激反應等生物學過程緊密相關。tRNA不僅是各種生物學功能的直接執行分子還是許多小分子RNA的前體。研究發現從細菌到哺乳動物，包括人類在內各種細胞中都存在tRFs。哺乳動物中的tRFs是2009年在人的HCT116結腸癌細胞中發現的。起初，人們認為這些小分子RNA是tRNA的降解產物。隨著tRNA來源的小分子RNA的功能和機制取得突破進展，現在可以明確這些tRNA來源的小RNA片段是一類具有重要功能的新型小分子RNA。最近，有一項研究結果顯示，高脂飲食雄性小鼠的后代會出現糖耐量減低和胰島素抵抗，而且這種糖耐量減低與tRF有關。在高脂飲食小鼠的后代中，不少代謝基因的表達水平顯著減少。另一研究結果揭示了tRF在哺乳動物精子成熟和受精過程中的功能，他們發現睪丸中未成熟精子的小RNA與低蛋白飲食沒有對應關系，但附睪中成熟精子的小RNA受到了顯著的影響。以上研究結果充分說明tRF在生物體內具有重要的功能。

發明內容：

本發明的目的是提供一種可以保護肝功能和減輕酒精性脂肪肝病的tRF-Gly反義鏈抑制劑及其應用。

本發明的第一個目的是提供一種tRF-Gly反義鏈抑制劑，其為SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列或者在SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列的5’端和/或3’端添加有修飾序列的核苷酸序列。

所述的在SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列的5’端和/或3’端添加有修飾序列的核苷酸序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

本發明的第二個目的是提供上述的tRF-Gly反義鏈抑制劑在制備預防或治療酒精性脂肪肝病藥物或保健品中的應用。

本發明的第三個目的是提供上述的tRF-Gly反義鏈抑制劑在制備保肝降脂藥物或保健品中的應用。