[發(fā)明專利]一種建立制吳茱萸標準湯劑指紋圖譜的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710683717.4
• 申請日: 2017-08-11
• 公開（公告）號: CN107478743B
• 公開（公告）日: 2020-09-04
• 發(fā)明（設計）人: 劉雪松;欒連軍;張慧;楊英士
• 申請（專利權）人: 洛陽澤達慧康醫(yī)藥科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 洛陽公信知識產(chǎn)權事務所(普通合伙) 41120
• 代理人: 狄干強

一種建立制吳茱萸標準湯劑指紋圖譜的方法包括標準湯劑的制備，供試品溶液的制備，對照品溶液的制備，高效液相色譜分析條件及通過指紋圖譜軟件分析所得制吳茱萸標準湯劑的對照指紋圖譜。本發(fā)明具有方法簡便，穩(wěn)定，精密度高及重現(xiàn)性好等特點；且所得標準湯劑的指紋圖譜的峰多，峰型好，易于鑒別，相似度高，準確可靠；所建立的對照指紋圖譜能有效地表征制吳茱萸標準湯劑的質(zhì)量，為制吳茱萸配方顆粒的質(zhì)量提供了新的對照標準，從而提高制吳茱萸配方顆粒的質(zhì)量和療效。

技術領域

本發(fā)明涉及到指紋圖譜的建立領域，具體的說是一種建立制吳茱萸標準湯劑指紋圖譜的方法。

背景技術

吳茱萸為蕓香科植物吳茱萸、石虎或疏毛吳茱萸的干燥近成熟果實，在8-11月果實尚未開裂時，剪下果枝，曬干或低溫干燥，除去枝、葉、果梗等雜質(zhì)，其有散寒止痛，降逆止嘔，助陽止瀉之功效，用于厥陰頭痛，寒疝腹痛，寒濕腳氣，經(jīng)行腹痛，脘腹脹痛，嘔吐吞酸，五更泄瀉。吳茱萸主要含有生物堿、檸檬苦素、萜類、黃酮、香豆精、甾體、揮發(fā)油等多種成分，研究表明，對其中一種或幾種活性成分進行檢測，就有失全面，不能真實反映吳茱萸藥效的整體性。要有效的控制吳茱萸及其成方制劑的質(zhì)量，就必須對它的物質(zhì)群整體予以控制。指紋圖譜為整體控制中藥材及中成藥的質(zhì)量提供了可能，而且已成為國際共識。

傳統(tǒng)中藥飲片越來越不能滿足快節(jié)奏的生活方式，人們渴望通過現(xiàn)今的科學技術實現(xiàn)傳統(tǒng)中藥飲片全成分的轉移，于是中藥配方顆粒應用而生。為了保持中藥配方顆粒與傳統(tǒng)飲片湯劑的一致性，標準湯劑的概念被引入，標準湯劑的質(zhì)量標準的研究變得尤為重要，而標準湯劑指紋圖譜的研究又是重中之重。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種建立制吳茱萸標準湯劑指紋圖譜的方法，通過本發(fā)明的方法建立的標準湯劑指紋圖譜，能夠更好地控制制吳茱萸配方顆粒，從而彌補現(xiàn)有的制吳茱萸質(zhì)量控制技術的不足。

本發(fā)明為實現(xiàn)上述技術目的所采用的技術方案為：一種建立制吳茱萸標準湯劑指紋圖譜的方法，包括以下步驟：

1）取制吳茱萸，依次經(jīng)浸泡、煎煮、濾過、濃縮、冷凍干燥后得到粉末，備用；

2）取步驟1）得到的粉末加水后進行超聲處理，而后過濾，即得供試品溶液，備用；

3）取吳茱萸作為對照藥材，重復步驟1）和步驟2）制得對照藥材溶液，備用；

4）取綠原酸對照品加水制成綠原酸對照品溶液，備用；

5）分別精密吸取供試品溶液、對照藥材溶液和綠原酸對照品溶液注入液相色譜儀中，分別測定三種溶液的指紋圖譜；

6）以綠原酸對照品溶液色譜峰的保留時間為1，計算供試品溶液、對照藥材溶液各峰的相對保留時間，用指紋圖譜軟件對所得的數(shù)據(jù)和圖譜進行處理，即得制吳茱萸標準湯劑對照指紋圖譜。

所述步驟1）中，浸泡、煎煮、濾過、濃縮、冷凍干燥的具體操作為：稱制吳茱萸，將其用水浸泡30分鐘，煎煮兩次，第一次加水為制吳茱萸重量的8倍，煎煮30分鐘，濾過，濾液備用；第二次加水為制吳茱萸重量的6倍，煎煮25分鐘，濾過，濾液備用；將兩次煎煮得到的濾液合并減壓濃縮，直至形成投料量：濃縮液質(zhì)量為1:1的清膏后，先在-40℃、40Pa條件下預凍1h，而后在-50-60℃、15-25Pa條件下凍干成粉末；所述投料量：濃縮液質(zhì)量投料量是指，稱取的制吳茱萸重量與最后形成的清膏重量比例為1:1。

本發(fā)明所述步驟1）中制吳茱萸在浸泡之前先經(jīng)過以下處理：將制吳茱萸浸泡在溫度為50-60℃的乙酸鈉、硫酸鉀、維生素C和谷氨酸的乙醇溶液中2-4h，浸泡結束后，采用600-800MHz的微波對其進行處理2-3min，而后過濾并用清水清洗，即完成對制吳茱萸的處理；所述乙酸鈉、硫酸鉀、維生素C和谷氨酸的乙醇溶液是指，按照重量比，取4-6份的乙酸鈉、3-5份的硫酸鉀、1-2份的維生素C和2-3份的谷氨酸與40-50份的乙醇溶液混合形成。