[發明專利]一種干細胞活性因子凝膠的制備方法及在難愈合傷口治療中的應用

在審

• 申請號: 201710680551.0
• 申請日: 2017-08-10
• 公開（公告）號: CN107468708A
• 公開（公告）日: 2017-12-15
• 發明（設計）人: 杜麗英;劉雅珉
• 申請（專利權）人: 山東景源生物科技有限公司
• 主分類號: A61K35/28
• 分類號: A61K35/28;A61K9/06;A61K47/36;A61K47/34;A61P17/02
• 代理公司: 泰安市泰昌專利事務所37207
• 代理人: 姚德昌

1.一種干細胞活性因子凝膠的制備方法，其特征在于：包括以下步驟：(1)活性因子懸液的制備：從臍帶、脂肪、胎盤分離、純化所述間充質干細胞，使用含10％胎牛血清的DMEM或DF12培養基、常規培養，待細胞融合度達80-90％時，用胰蛋白酶消化，使用上述完全培養基進行中止，離心收集細胞，再用無血清DMEM或DF12培養基懸浮細胞沉淀，調整細胞濃度傳代培養，收集10代以內的培養上清，離心除掉不溶性雜質和變性蛋白，取上清液用于活性因子的分離純化；

(2)活性因子分離純化：將上清液與經過無菌處理的質量濃度為1～10g/L殼聚糖10:1-20:1混合，調節pH值，然后置于搖床中振搖，離心，沉淀經弱堿性水溶液洗滌溶解；

(3)干細胞活性因子凝膠的配制：在上述活性因子濃縮液逐滴添加保濕劑，邊添加，邊進行混合，所述保濕劑劑與活性因子懸液的體積比為1∶3；混合均勻后，分裝到預充注射器中，放到-20℃冰箱中凍存待用。

2.根據權利要求1所述的一種干細胞活性因子凝膠的制備方法，其特征在于：步驟3中的保濕劑為透明質酸鈉或γ-聚谷氨酸。

3.根據權利要求1或2所述的一種干細胞活性因子凝膠的制備方法，其特征在于：步驟3所述保濕劑與活性因子懸液的體積比為1∶3。

4.一種如權利要求1所述的干細胞活性因子凝膠的制備方法制得的干細胞活性因子凝膠在難愈合傷口治療中的應用。