[發明專利]一種利用氣生根誘導綠蘿愈傷組織的方法

在審

• 申請號: 201710668825.4
• 申請日: 2017-08-07
• 公開（公告）號: CN107347648A
• 公開（公告）日: 2017-11-17
• 發明（設計）人: 王健;劉坤;申亮;施金玉;盧迪浩;鄭德助;李健
• 申請（專利權）人: 東方上彩現代農業有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙)11371
• 代理人: 王玉桂

1.一種利用氣生根誘導綠蘿愈傷組織的方法，其特征在于，包括以下步驟：

選取母株，經預處理后取氣生根；

將所述氣生根進行機械損傷，并分別接種至愈傷組織誘導培養基1號和愈傷組織誘導培養基2號中，得愈傷組織；

將所述愈傷組織轉接至繼代培養基中培養，即得；

所述愈傷組織誘導培養基1號包括如下成分：

改良MS培養基1號、6-芐氨基腺嘌呤、6-糖基氨基嘌呤、吲哚-3-乙酸、D丁酯、蔗糖、椰子水和瓊脂粉；

所述愈傷組織誘導培養基2號包括如下成分：

改良MS培養基2號、6-芐氨基腺嘌呤、6-糖基氨基嘌呤、萘乙酸、吲哚-3-乙酸、蔗糖、椰子水和瓊脂粉。

2.如權利要求1所述利用氣生根誘導綠蘿愈傷組織的方法，其特征在于，所述選取母株，經預處理后取氣生根，包括：

選取母株運用多菌靈灌根；

取所述母株生長點處莖段；

將所述莖段消毒，得氣生根外植體。

3.如權利要求2所述利用氣生根誘導綠蘿愈傷組織的方法，其特征在于，所述選取母株運用多菌靈灌根，包括：

選取母株使用80％多菌靈1000倍溶液進行灌根30天，每10天1次。

4.如權利要求1-3任一項所述利用氣生根誘導綠蘿愈傷組織的方法，其特征在于，

所述愈傷組織誘導培養基包括愈傷組織誘導培養基1號和愈傷組織誘導培養基2號；

所述將所述氣生根進行機械損傷，并接種至愈傷組織誘導培養基中，得愈傷組織，包括：

將所述氣生根修剪后，得修剪莖段；

將所述修剪莖段進行機械損傷；

將所述機械損傷的修剪莖段接種至愈傷組織誘導培養基1號中，在溫度25℃-28℃和濕度50％-65％的條件下進行培養，得第一愈傷組織；

將所述第一愈傷組織轉入愈傷組織誘導培養基2號中，在溫度25-28℃，濕度為50-65％的條件下進行培養，獲得第二愈傷組織。

5.如權利要求1所述利用氣生根誘導綠蘿愈傷組織的方法，其特征在于，所述愈傷組織誘導培養基1按如下方法配置：

在改良MS培養基1號中，按照濃度加入5.0mg/L的6-芐氨基腺嘌呤、1mg/L的6-糖基氨基嘌呤、0.2mg/L的吲哚-3-乙酸、0.05mg/L的D丁酯、30g/L的蔗糖、100ml/L的椰子水和7g/L的瓊脂粉，調節PH值至5.6-5.8，即得；

所述愈傷組織誘導培養基2按如下方法配置：

在改良MS培養基2號中，按照濃度加入1.0mg/L的6-芐氨基腺嘌呤、0.1mg/L的6-糖基氨基嘌呤、0.2mg/L的萘乙酸、0.1mg/L的吲哚-3-乙酸、蔗糖、30g/L的椰子水和7g/L的瓊脂粉，調節PH值至5.6-5.8，即得。

6.如權利要求5所述利用氣生根誘導綠蘿愈傷組織的方法，其特征在于，所述改良MS培養基1號按如下方法配置：

以MS培養基為基礎，還包括以下成分，并調整含量為：

肌醇：1-5mg/L；

鹽酸硫胺素：3-6mg/L；

鹽酸吡哆醇：0.5-2mg/L；

煙酸：0.5-3mg/L；

精氨酸：50mg/L；

天冬氨酸：100mg/L；

谷氨酸：150mg/L。

7.如權利要求1所述利用氣生根誘導綠蘿愈傷組織的方法，其特征在于，所述將所述愈傷組織轉接至繼代培養基中培養，即得，包括：

將所述愈傷組織轉接至亟待培養基中在預設培養條件下進行培養；

每40天繼代一次，即得。

8.如權利要求7所述利用氣生根誘導綠蘿愈傷組織的方法，其特征在于，所述預設培養條件，包括：

光照強度：1500-20001x；

光照時間：12小時/日；

溫度：25℃-28℃；

濕度：50％-65％。

9.如權利要求7所述利用氣生根誘導綠蘿愈傷組織的方法，其特征在于，所述繼代培養基包括如下組分：

改良MS培養基2號、6-芐氨基腺嘌呤、吲哚-3-乙酸、蔗糖、瓊脂粉。

10.如權利要求7所述利用氣生根誘導綠蘿愈傷組織的方法，其特征在于，所述繼代培養基，按如下方法進行配制：

制備改良MS培養基2號：以MS培養基為基礎，調整其中大量元素為所述MS培養基原有含量的1/2；還包括以下成分，并調整含量為：肌醇：1-5mg/L、鹽酸硫胺素：3-6mg/L、鹽酸吡哆醇：0.5-2mg/L、煙酸：0.5-3mg/L、精氨酸：100mg/L、天冬氨酸：50mg/L和谷氨酸：200mg/L；

在改良MS培養基2號中，按照濃度加入2.0mg/L的6-芐氨基腺嘌呤、0.3mg/L的吲哚-3-乙酸、30g/L的蔗糖和7g/L的瓊脂粉，調節PH值至5.6-5.8，即得。