[發明專利]一種治療丙型肝炎病毒藥物的制備方法和用途

有效

• 申請號: 201710668064.2
• 申請日: 2017-08-07
• 公開（公告）號: CN107216388B
• 公開（公告）日: 2020-05-05
• 發明（設計）人: 廖化新;張遠旭;袁曉輝;王月明;昝利鵬;吳昌文;李楠
• 申請（專利權）人: 廣州泰諾迪生物科技有限公司;珠海泰諾麥博生物技術有限公司;暨南大學
• 主分類號: C07K16/10
• 分類號: C07K16/10;C12N15/13;A61K39/42;A61P31/14;A61P1/16;A61P35/00;A61P17/00;A61P7/00;A61P9/00;G01N33/569
• 代理公司: 北京預立生科知識產權代理有限公司 11736
• 代理人: 高倩倩;李紅偉

本發明公開了一種全人源抗HCV的單克隆中和抗體。驗證表明該抗體能夠與HCV特異性結合，因此本發明的抗體可用于制備診斷HCV的產品。另外，本發明的抗體有較好的HCV中和活性，進而能夠阻止HCV感染導致相關疾病，并且本發明的抗體是全人源抗體，其具有較鼠源、嵌合及人源化抗體更低的免疫原性，因此本發明的抗體可用于制備治療或預防HCV相關疾病的藥物。

技術領域

本發明屬于細胞免疫學、分子生物學領域，涉及一種全人源的單克隆抗體藥物，尤其涉及一種全人源抗丙型肝炎病毒的單克隆中和抗體藥物。另外，本發明還涉及該中和抗體藥物的制備方法和用途。

背景技術

丙型肝炎由丙型肝炎病毒(HCV)感染所致，主要由血液/體液傳播。據世界衛生組織估計，全球有1.7億人感染HCV。在我國健康人群抗HCV陽性率為0.7％～3.1％，約3800萬人。由于病毒生物學特點和宿主免疫功能等多方面因素，機體免疫往往難以有效清除病毒，致使約50％～80％HCV感染者發展為慢性肝炎，其中20％～30％將發展成肝硬化。肝硬化患者中每年有1％～4％發展成為肝細胞癌癥。

目前，針對丙型肝炎的治療藥物有干擾素、核苷類似物、多肽類藥物及中草藥、以及小分子藥物等，每種藥物雖具有不同程度的療效，但均未能徹底根除HCV。隨著研究的發展，治療性抗體成為了丙型肝炎治療的新方向。

治療性抗體是近年來增長勢頭較強勁的生藥產品，至目前為止，已有約30種單克隆抗體獲批上市用于多種疾病的診斷和治療。在各種急慢性病毒性肝炎的治療及研究中，單克隆抗體的應用尤為廣泛且具有不可替代的作用。就發展進程而言，單克隆抗體可分為鼠源性單抗、鼠源抗體人源化以及全人源性單抗三種階段類型的抗體。鼠源性單克隆抗雖然具有獲取方法較為成熟，且抗體具有高親和力等優勢，但是伴隨著該內抗體在體內半衰期短、人抗鼠排斥反應(human anti-murine-antibody response，HAMA)強烈、抗體依賴的細胞毒(antibody-dependent cell cytotoxicity，ADCC)和補體依賴的細胞毒(complement-dependent cytotoxicity，CDC)作用激發強度不合適弊端的出現，從而限制此類抗體的有效應用。鼠源抗體人源化即嵌合抗體是將鼠抗體的部分序列置換成人的序列，該方法在一定程度上降低了HAMA，但親和力也隨之降低。為了獲得更安全、高效的單克隆抗體，研究人員嘗試了多種獲得全人源性的單克隆抗體方法，較為常見的有，利用基因工程小鼠制備單克隆抗體，噬菌體抗體庫技術以及單個B淋巴細胞抗體制備技術等。

本發明所涉及的單個B淋巴細胞抗體制備技術，是將單細胞分離鑒定技術結合多種PCR技術形成的一種單克隆抗體的體外表達系統，即從人B淋巴細胞中直接獲取全人源的單克隆抗體的方法。產生的抗體具有全人源性、高度抗原特異性、親和性等優勢，在治療腫瘤、感染性疾病、自身免疫性疾病和器官移植等方面顯出了獨特的優勢和良好的應用前景。因此，非常有必要選擇先進高效的單克隆抗體制備技術制備抗體治療和預防HCV感染。

發明內容

本發明的目的在于提供一種與丙型肝炎病毒(HCV)的結合分子，該結合分子對丙型肝炎病毒具有有效的中和作用。

為了實現上述目的，本發明采用了如下技術方案：

本發明提供了一種分離的結合分子，所述結合分子包括：

(1)SEQ ID NO:2所示的重鏈CDR1、SEQ ID NO:3所示的重鏈CDR2、SEQ ID NO:4所示的重鏈CDR3；和/或

(2)SEQ ID NO:6所示的輕鏈CDR1、SEQ ID NO:7所示的輕鏈CDR2、SEQ ID NO:8所示的輕鏈CDR3。

作為本發明的一個方面，本發明的結合分子包括：

(1)重鏈可變區，所述重鏈可變區具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列；和/或