[發(fā)明專利]人中低分化結腸癌細胞株、其建立方法及應用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710665422.4
• 申請日: 2017-08-07
• 公開（公告）號: CN109370990A
• 公開（公告）日: 2019-02-22
• 發(fā)明（設計）人: 陳錦飛;薛毅琪;霍新穎;陳虹;韋棟平
• 申請（專利權）人: 南京市第一醫(yī)院
• 主分類號: C12N5/09
• 分類號: C12N5/09
• 代理公司: 北京信慧永光知識產(chǎn)權代理有限責任公司 11290
• 代理人: 朱學珺;張淑珍

本發(fā)明涉及一種新的人中低分化結腸癌細胞株cc?006cpm8及其建立方法和應用，所述細胞株保藏在中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號為CCTCC NO：C2016153。本發(fā)明的人中低分化結腸癌細胞株cc?006cpm8能夠穩(wěn)定傳代且增殖較快，為研究結直腸癌的發(fā)生、發(fā)展轉移，進而揭示結直腸癌的發(fā)病機制提供一定的研究線索和實驗模型。同時，建立cc?006cpm8細胞株不僅為結直腸癌的分子生物學、免疫學研究及臨床綜合診治等提供了有利條件，而且為篩選防治結直腸癌藥物提供了方便的平臺。

技術領域

本發(fā)明涉及生物技術領域，具體涉及一種人中低分化結腸癌細胞株及其建立方法和應用。

背景技術

大腸癌是常見的惡性腫瘤，包括結腸癌和直腸癌。就發(fā)病部位而言，大腸癌的發(fā)病率從高到低依次為直腸、乙狀結腸、盲腸、升結腸、降結腸及橫結腸，近年有向近端(右半結腸)發(fā)展的趨勢。其發(fā)病與生活方式、遺傳、大腸腺瘤等關系密切。發(fā)病年齡趨老年化，男女之比為1.65:1。

據(jù)文獻報道，每年全球約有120萬患者被確診為結直腸癌，其中超過60萬直接或間接死于該疾病。在美國，2009年約有14.7萬新確診的結直腸癌病例，并有4.99萬患者死亡。在我國，2005年結直腸癌的發(fā)病數(shù)和死亡數(shù)分別為17.2萬例和9.9萬例，且新發(fā)病例以每年4.2％的速度增加，遠超2％的國際水平。

腫瘤細胞體外培養(yǎng)是研究癌變機理和腫瘤細胞生物學特性的較好手段，在組織培養(yǎng)中占有重要地位。鑒于人們目前對結直腸癌發(fā)病、復發(fā)、轉移機制認識的局限性，建立體外培養(yǎng)的人結直腸癌細胞株可以進一步明晰結直腸癌細胞的生物學特性和發(fā)生發(fā)展機制。另一方面，腫瘤細胞系/株的建立還為抗癌藥物篩選等提供了方便和相對廉價的細胞模型。目前世界范圍內(nèi)報道的人結直腸部位的腫瘤細胞系/株已有數(shù)十種，如國外建立的SW480、W403、Colo-320、LoVo、CW-2、HT-29、LIM l215、LS l74T、T84、Caco-2、HCT-8、Colo205、SW620、HCTl16、HR-78、CoLo320MD等。這些細胞系大多數(shù)來自原發(fā)腫瘤部位，個別來源于腹水。我國是結直腸癌的高發(fā)區(qū)，但建立結腸或直腸癌細胞株的工作起步較晚。已報道的源于我國的結直腸癌細胞系/株僅有THC8908、SIC-8101、HR-8348、Hce8693、HRC-99和DXH-1。這其中，多數(shù)細胞株由于細胞污染或保存不當而已無法使用；另外一些細胞株由于未提交國際公認的保藏機構進行標準化鑒定，其是否能夠有利地用于科研和工業(yè)用途是存在疑問的。目前在國家實驗細胞資源共享平臺上公布的僅DXH-1一個結直腸癌細胞系。因此，更多地建立中國人遺傳背景的結腸癌細胞株，并利用其進行我國結直腸癌生物學特性和發(fā)病機制的研究尤為重要。

由于腫瘤具有異質(zhì)性、復雜性、以及由不同種族和地域帶來的差異性等特點，即使是用相同部位的腫瘤原代培養(yǎng)建立起來的細胞系/株，相關研究結果也可能不能完全反映疾病的全部特點。此外，體外培養(yǎng)的腫瘤細胞處于與體內(nèi)完全不同的生存環(huán)境，同一細胞株經(jīng)反復傳代后生物學特性也可能發(fā)生改變，造成實驗結果的不確定性。基于此，選擇已建立較長時間的西方人種來源的細胞株進行我國結直腸癌的研究并不利于準確分析我國結直腸癌發(fā)病機理及治療策略。因此，本領域存在使用來源于中國人遺傳背景的結直腸癌進行腫瘤細胞原代培養(yǎng)研究的需求，建立更多的結直腸癌細胞系/株是非常必要的。

發(fā)明內(nèi)容

針對上述具有中國人遺傳背景的結直腸癌細胞株/系匱乏的現(xiàn)狀，在第一方面，本發(fā)明提供了一種新的具有中國人遺傳背景的中低分化結腸癌細胞株cc-006cpm8，該細胞株保藏在中國典型培養(yǎng)物保藏中心(地址：中國湖北省武漢市武昌區(qū)武漢大學保藏中心)，保藏編號為CCTCC NO：C2016153，保藏日期為2016年8月9日，分類命名為：人中低分化結腸癌細胞株。

本發(fā)明的cc-006cpm8細胞株性狀穩(wěn)定，可穩(wěn)定傳代超過100代，成瘤率高，均一性好，為我國結直腸癌研究提供了一種具有新的臨床腫瘤生物學特性的實驗材料。