[發(fā)明專利]一種快速檢測地中海貧血常見突變基因的試劑盒

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710664559.8
• 申請日: 2017-08-04
• 公開（公告）號: CN107267648B
• 公開（公告）日: 2020-04-14
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 黃德珍
• 申請（專利權(quán)）人: 亞能生物技術(shù)(深圳)有限公司
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12N15/11
• 代理公司: 深圳市博銳專利事務(wù)所 44275
• 代理人: 林棟

1.一種快速檢測地中海貧血常見突變基因的試劑盒，其特征在于：包括針對缺失型地貧基因--^SEA、--^THAI、-α^2.4、-α^21.9、HPFH-SEA和^Gγ⁺(^Aγδβ)⁰設(shè)計的引物，針對缺失型地貧基因-α^4.2和-α^3.7采用Y1區(qū)段和Y2區(qū)段相對定量分析設(shè)計的引物，針對非缺失型地貧等位基因α^CSα、α^QSα、α^Westmeadα、Q-Thailand、β^-90、β^-29、β^-28、β^Cap+40-43、β^IntM、β^IntCD、β^CD14-15、β^CD17、β^CD26、β^27/28、β^IVS-I-1、β^IVS-I-5、β^CD37、β^CD41-42、β^CD43、β^CD71–72、β^CD95、β^IVS-II-654設(shè)計的引物，針對非缺失型地貧等位基因α^CSα、α^QSα、α^Westmeadα、β^-28、β^CD17、β^CD26、β^27/28、β^IVS-I-1、β^CD41-42、β^CD43、β^CD71–72、β^IVS-II-654設(shè)計的正常對照引物，以及檢測性別的AMXY引物，這些引物分2個檢測管分裝，2個檢測管分別記為tube1和tube2，其中：

tube1檢測管包含的引物名稱及序列如下：

Beta1-FAM-F：5’-6FAM-TCCTAAGCCAGTGCCAGAAGAGC-3’；

Beta2-FAM-R：5’-6FAM-CCTGAGACTTCCACACTGATGC-3’；

Beta3-FAM-R：5’-6FAM-AGTTGGACTTAGGGAACAAAGGAAC-3’；

CQW-co-ROX-R：5’-ROX-ACCTCCATTGTTGGCACATTCC-3’；

AMXY-6FAM-F：5’-6-FAM-CCCTGGGCTCTGTAAAGAATAGTG-3’；

AMXY–R：5’-ATCAGAGCTTAAACTGGGAAGCTG-3’；

CD37M-R：5’-GGACTCAAAGAACCTCTGGGACT-3’；

IntM-R：5’-AAAAAAACAAAAATCCTCAGGAGTCAGTTGCACT-3’；

-90M-R：5’-GTAGATTGGCCAACCCAAGGGTA-3’；

-28M-R：5’-CAAAACAATAGATGGCTCTGCCCTGACTAC-3’；

-29M-R：5’-GATGGCTCTGCCCTGCCTTTC-3’；

IntCD-R：5’-CCTCAGGAGTCAGATGCATCC-3’；

CD17M-R：5’-AAAAACAACTTCATCCACGTTCGCCTA-3’；

Cap+40-43M-R：5’-AAAAGATGCACCATGGTGTCTGAGG-3’；

CD14-15(+G)M-R：5’-CCACGTTCACCTTGCTCTACCA-3’；

CD26M-R：5’-ACCAACCTGCACAGGGTCTT-3’；

IVS-Ⅰ-1M-R：5’-CTGTCTTGTAACCTTGATGCCAAA-3’；

IVS-Ⅰ-5M-R：5’-AACTTAAACCTGTCTTGTAACCTTGACAG-3’；

CD27/28(+C)M-R：5’-TTTTGATACCAACCTGACCAGGAGC-3’；

CD71-72(+A)M-F：5’-CAAGAAAGTGCTCGGTGCCTGTAA-3’；

CD95M-F：5’-GTGAGCTGCACTGTGACGAAG-3’；

CD43M-F：5’-CCTTGGACCCAGAGGTTCGTTT-3’；

CD41-42M-F：5’-CAAAAAAAAAACAAAACTACCCTTGGACCCAGATGTTG-3’；

654M-F：5’-CAGTGATAATTTCTGGGTTGAGGT-3’；

WS-N-F：5’-AGTTCACCTCTGCGGTGCAC-3’；

CS-N-F：5’-CGTGCTGACCTCCAAATACTGTT-3’；

QS-N-F：5’-CTGCGGTGCAAGCCTACCT-3’；

Y1-Y2-HEX-F：5’-HEX-CAGGGATGCACCCACTGGCA-3’；

Y1-Y2-R：5’-CTCGACACGCATCTGCTCAGGGGTGAGGAAGGAAGGGGTG-3’；

Tube2檢測管包含的引物名稱及序列如下：

Beta1-TAMRA-F：5’-TAMRA-TCCTAAGCCAGTGCCAGAAGAGC-3’；

Beta2-TAMRA-R：5’-TAMRA-CCTGAGACTTCCACACTGATGC-3’；

Beta3-TAMRA-R：5’-TAMRA-AGTTGGACTTAGGGAACAAAGGAAC-3’；

CQW-co-HEX-R：5’-HEX-ACCTCCATTGTTGGCACATTCC-3’；

-28N-R：5’-TAGATGGCTCTGCCCTGACATT-3’；

CD17N-R：5’-CAACTTCATCCACGTTCACCAT-3’；

CD26N-R：5’-ACCAACCTGCTCAGGGACTC-3’；

IVS-Ⅰ-1N-R：5’-CTGTCTTGTAACCTTGATACCATC-3’；

CD27/28N-R：5’-AAAATGATACCAACCTGCCCAGCGC-3’；

CD71-72N-F：5’-CAAGAAAGTGCTCGGTGCCTTGAG-3’；

43/41-42N-F：5’-CCTTGGACCCAGAGGTTCCTTG-3’；

654N-F：5’-CAAAAAACAAAAAAAAAAAACAGTGATAAGTTCTGGGTTAAGGC-3’；

WS-M-F：5’-GAGTTCACCCCTGCGGTTCAG-3’；

CS-M-F：5’-CGTGCTGACCTCCAAATACAGTC-3’；

QS-M-F：5’-CTGCGGTGCACGGCTCACC-3’；

A1-74M-HEX-F：5’-HEX-AACGCCGTGGCGCACTTGC-3’；

A1-QT-R：5’-CAAAACAGCAGGCAGTGGCTTAGGAG-3’；

THAI-HEX-R：5’-HEX-CTTGGATCTGCACCTCTGGGTAGG-3’；

THAI-F：5’-GAATAAAGCGAGAGGAATCACATTCCTC-3’；

SEA-HEX-F：5’-HEX-AGAAGCTGAGTGATGGGTCCG-3’；

SEA-R：5’-TGGACTTAAGTGATCCTCCTGCCC-3’；

HPFH-F：5’-AAAACCAGCCTCATGGTAGCAGAATC-3’；

HPFH-M-FAM-R：5’-6FAM-TGGTATCTGCAGCAGTTGCC-3’；

DBT-M-FAM-F：5’-6FAM-CCAGAAATTGCCTCATGTCTCT-3’；

DBT-R：5’-CACATATAAAATGCTGCTAATGCTTCATTAC-3’；

2.4-HEX-F：5’-HEX-ACCACGACCTCTAGGCCAGT-3’；

2.4R：5’-CAACCAGCCCTCTGCTGTAC-3’；

21.9-F：5’-GGAGCTTTTCCTTCCCTGGAACG-3’；

21.9-HEX-R：5’-HEX-TGTGGTTGGAGAATGGAGGTGG-3’；

上述引物中，“M”代表突變位點(diǎn)，“N”代表正常對照位點(diǎn)，F(xiàn)AM是指羥基熒光素，ROX是指羧基-X-羅丹明，HEX是指六氯-6-甲基熒光素，TAMRA是指羧基四甲基羅丹明。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速檢測地中海貧血常見突變基因的試劑盒，其特征在于：該試劑盒還包括緩沖液、酶液、Mg²⁺和dNTP。