[發(fā)明專利]一種采用氣相色譜?質(zhì)譜法測定奶粉中3?氯丙醇酯含量的方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201710663510.0
• 申請日: 2017-08-05
• 公開（公告）號: CN107478739A
• 公開（公告）日: 2017-12-15
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 賀麗娜;張順濤;李春麗;崔曉輝;徐淑飛;李云
• 申請（專利權(quán)）人: 張順濤
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及氯丙醇酯的測定方法，特別是一種采用氣相色譜-質(zhì)譜法測定奶粉中3-氯丙醇酯含量的方法。

背景技術(shù)

目前，氯丙醇類化合物是公認的食品污染物，具有生殖、腎臟和神經(jīng)毒性以及潛在致癌作用。氯丙醇脂肪酸酯（氯丙醇酯）在生物體內(nèi)脂肪酶的作用下分解成氯丙醇，是近年來發(fā)現(xiàn)的一類新型食品污染物，在油和含油食品中的污染水平較高。其中3-氯-1,2丙二醇（3-MCPD）脂肪酸酯（簡稱3-MCPD酯）毒性最強、最典型、污染水平最高，因此備受關(guān)注。

由于氯丙醇酯的食品安全問題發(fā)現(xiàn)時間不長，且主要發(fā)現(xiàn)于精煉植物油中，因此有關(guān)食品中氯丙醇酯的報道不多，檢測的樣品也以食用油最為常見，有關(guān)其他食品基質(zhì)中氯丙醇酯的報道較少。由于棕櫚油在奶粉中廣泛使用，國際上已有奶粉中檢測出氯丙醇酯的相關(guān)文獻發(fā)表，目前相關(guān)檢測方法未見公開。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種采用氣相色譜-質(zhì)譜法測定奶粉中3-氯丙醇酯含量的方法。

本發(fā)明的目的是通過如下途徑實現(xiàn)的：一種采用氣相色譜-質(zhì)譜法測定奶粉中3-氯丙醇酯含量的方法，其測定步驟如下：

A.樣品預(yù)處理：

a.稱取4g奶粉樣品至100mL具塞玻璃試管中，加入20mL預(yù)先準備好的65℃熱水，攪勻后冷卻至室溫;

b.向冷卻后的樣品溶液中加入8mL氨水，蓋塞后渦旋混勻，加入65℃水域中加熱30min；

c.向試管中加入10mL乙醇，混合搖勻后加入25mL乙醚，渦旋1min后加入25mL石油醚，繼續(xù)渦旋30s;

d.靜置30min，待其完全分層后，取上層溶液倒入預(yù)先稱重的蒸發(fā)皿;

e.再加入15mL乙醚和15mL石油醚，重復(fù)提取2次，將上層液一并轉(zhuǎn)移至蒸發(fā)皿中;

f.將蒸發(fā)皿放于65℃水浴，加熱去除溶劑，擦去蒸發(fā)皿外壁水分，冷卻至室溫后稱重，前后2次差值即為脂肪的重量,將提取的脂肪置于4℃冰箱中保存；

B.樣品水解與凈化：

a.稱取0.1g脂肪，加入10mg/L的d5-3-氯-1，2-丙二醇棕櫚酸單酯內(nèi)標使用液60μL和甲基叔丁基醚-乙酸乙酯（8∶2，V/V）500μL，渦旋混勻;

b.加入1mL甲醇鈉/甲醇溶液（0.25mol/L），渦旋混勻，反應(yīng)4min，加入100μL冰乙酸，渦旋混勻，再加入3mL20%的氯化鈉溶液和3mL正己烷，渦旋1min，棄去上層溶液;

c.加入3mL正己烷重復(fù)萃取1次，將下層水相溶液轉(zhuǎn)入ChemElutTM硅藻土小柱中，平衡靜置5min;

d.加入30mL正己烷淋洗棄去，再用80mL乙酸乙酯洗脫，收集洗脫液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)近干，用2mL正己烷復(fù)解殘渣;

C.標準溶液的配制:

a.稱取3-氯-1,2丙二醇（3-MCPD）、d5-3-氯-1,2丙二醇（d5-3-MCPD）、3-氯-1，2-丙二醇棕櫚酸單酯（3-MCPD-P）、d5-3-氯-1，2-丙二醇棕櫚酸單酯（d5-3-MCPD-P）各10 mg，置于10mL棕色容量瓶中，以乙酸乙酯溶劑定容至刻度，分別制備濃度為1000mg/L的標準儲備液，保存于-20℃冰箱中；

b.將各標準儲備液再用正己烷逐級稀釋，配制成濃度為10.0mg/L的標準使用液;

D.樣品衍生化:

a.用氣密針迅速加入七氟丁酰基咪唑50μL，立即密塞,漩渦充分混合后，于75℃烘箱保溫30 min,取出后，放至室溫并加20%飽和氯化鈉溶液2mL，渦旋混合，靜置使兩相分離;

b.移取上層溶液到預(yù)先加有少許無水硫酸鈉的2mL樣品瓶中，放置1min，將樣品液轉(zhuǎn)移至另一2mL樣品瓶中待測；

E.測定條件和結(jié)果計算

色譜條件：色譜柱：DB-5（30m×0.25mm×0.25μm）；柱流量：1.0mL/min；柱壓力：20psi；程序升溫50℃保持1min，2℃/min升至90℃，再40℃/min升至250℃，保持5min；進樣口溫度：250℃；不分流進樣，進樣體積1μL;

質(zhì)譜條件：傳輸線溫度：280℃；離子源溫度：230℃；EI電壓：70eV；溶劑延遲5min；以M/Z 253作為3-氯丙醇的定量離子，以M/Z 257作為d5-3-氯丙醇的定量離子，按內(nèi)標法計算結(jié)果;

F.結(jié)果判定