[發明專利]一種軟棗獼猴桃花藥培養成單倍體植株的方法

有效

• 申請號: 201710658541.7
• 申請日: 2017-08-04
• 公開（公告）號: CN107306793B
• 公開（公告）日: 2019-08-06
• 發明（設計）人: 秦紅艷;王廣富;艾軍;孫丹;范書田;楊義明;許培磊;劉迎雪;趙瀅;王振興;張寶香;李昌禹
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院特產研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙) 11371
• 代理人: 李進

本發明提供了一種軟棗獼猴桃花藥培養成單倍體植株的方法，包括如下步驟：(A)采集軟棗獼猴桃小孢子發育的花蕾，低溫冷藏處理1?10d，剝離花藥；(B)將所述花藥置于愈傷組織誘導培養基中黑暗培養20d以上，再在植株分化培養基上培養40d以上，最后轉移到生根培養基上培養生根，即可。本發明實施例的軟棗獼猴桃花藥培養成單倍體植株的方法，為軟棗獼猴桃育種提供多種純合的育種材料，提高了選擇和育種材料，同時也為基礎的理論研究提供了理想的受體材料，而且本發明的花藥培養方法相較于離體小孢子培養、體細胞染色體消除等方式操作簡便，所以人工培養離體花藥是軟棗獼猴桃獲得單倍體植株的一條有效途徑，非常值得廣泛推廣應用。

技術領域

本發明涉及軟棗獼猴桃培植領域，具體而言，涉及一種軟棗獼猴桃花藥培養成單倍體植株的方法。

背景技術

軟棗獼猴桃，又名軟棗子，獼猴梨，藤瓜，藤梨，屬于獼猴桃科，獼猴桃屬大型落葉藤本植物，果實較小，表面光滑，整果可食，是獼猴桃屬中最耐寒的種之一。軟棗獼猴桃享有“水果之王”的美譽，以其優良的品質、風味、豐富的營養成分、較高的醫療保健功效及良好的加工適性等特點，備受消費者青睞。軟棗獼猴桃是世界很多地區尤其是寒冷地區極具發展前景的小漿果樹種。軟棗獼猴桃果實表面光滑無毛，果汁多，風味好，果肉中含有豐富的維生素和氨基酸，其中維生素C含量尤為突出，100g果肉中維生素C含量達430mg，是蘋果和梨的80～100倍，是柑橘的5～10倍，即可生食，也是加工果酒、果醬等食品的優質原料，具有“水果之王”的美譽。軟棗獼猴桃具有較強的抗蟲、抗病性，尤其耐寒性極強，在-38℃條件下可安全越冬，是獼猴桃品種改良的重要種質資源，具有很好的開發利用前景。

軟棗獼猴桃一般為四倍體，染色體116條(2n＝116，4X)，基因高度雜合，具有豐富的遺傳多樣性，傳統的雜交育種周期長，效率低，具有很大的不確定性，因此通過傳統的雜交育種獲得純合植株幾乎是不可能的。

因為細胞、組織培養系統為植物基因轉化提供了較為理想的受體材料，并使其后代植株的再生成為可能。那么在基因轉化的一系列程序中，受體材料的選擇尤為重要，單倍體材料作為轉基因受體有著其他外植體材料所不具備的優勢。將轉基因和單倍體細胞、組織培養技術相結合，可使外源基因在轉基因后代中迅速純合，加快優良品種的選育進程，因此在軟棗獼猴桃培植領域，如何培育出單倍體植株是現如今亟待解決的技術問題。

有鑒于此，特提出本發明。

發明內容

本發明的目的在于提供一種軟棗獼猴桃花藥培養成單倍體植株的方法，通過采用本發明的培養方法能夠成功獲得軟棗獼猴桃單倍體的純合植株，為軟棗獼猴桃育種提供多種純合的育種材料，提高了選擇和育種材料，同時也為基礎的理論研究提供了理想的受體材料，而且本發明的花藥培養方法相較于離體小孢子培養、體細胞染色體消除等方式操作簡便，所以人工培養離體花藥是軟棗獼猴桃獲得單倍體植株的一條有效途徑，非常值得廣泛推廣應用。

為了實現本發明的上述目的，特采用以下技術方案：

本發明提供了一種軟棗獼猴桃花藥培養成單倍體植株的方法，具體包括如下步驟：

(A)采集軟棗獼猴桃小孢子不同發育時期花蕾，低溫冷藏處理1-10d，剝離花藥；

(B)將所述花藥置于愈傷組織誘導培養基中黑暗培養20d以上，再在植株分化培養基上培養40d以上，最后轉移到生根培養基上培養生根，即可。