[發明專利]一種檢測肺炎球菌10A血清型的試劑盒

有效

• 申請號: 201710655873.X
• 申請日: 2017-08-03
• 公開（公告）號: CN107312862B
• 公開（公告）日: 2021-01-01
• 發明（設計）人: 趙澤坤;翟振華;楊子義
• 申請（專利權）人: 北京華安科創生物技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/689
• 分類號: C12Q1/689;C12Q1/04;C12N15/11
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君;陳征

本發明提供了一種檢測肺炎球菌10A血清型的試劑盒，屬于PCR檢測技術領域。本發明的試劑盒含有一對特異性引物對，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1?2所示。本發明還提供了檢測肺炎球菌10A血清型的方法，利用本發明的特異性引物對對待測樣品進行PCR檢測，若擴增產物為607bp，則待測樣品含有肺炎球菌10A血清型。本發明的試劑盒具有檢測準確，靈敏度高、特異性強，簡便快速的優點，適合對肺炎球菌流行病學調查也適用于對23價肺炎球菌多糖疫苗生產用菌種快速檢測和菌株鑒定，具有良好的應用前景。

技術領域

本發明涉及PCR檢測技術領域，特別是涉及一種檢測肺炎球菌10A血清型的試劑盒及其應用。

背景技術

肺炎鏈球菌是一種常見的人類致病菌，是發展中國家和發達國家各個年齡組人群獲得性肺炎最常見病因，同時也是引起中耳炎、肺炎、腦膜炎和敗血癥等疾病的主要致病菌。肺炎球菌屬于革蘭氏陽性菌，呈單球或雙球排列，無鞭毛，芽孢，有莢膜，且不同型別的莢膜厚度有所不同。肺炎球菌的莢膜是其毒力的必要條件，并且莢膜多糖有群/型特異性，是肺炎球菌分群/型的基礎。迄今為止肺炎球菌可分為46個群，90多個血清型，引起疾病的肺炎球菌型別常因地區、年代和人群的不同而不同。

針對肺炎球菌中引起疾病的20多個主要血清型,目前都以提純的莢膜多糖制成疫苗,并根據WHO規程確定疫苗所包含的的血清型,主要為1、2、3、4、5、6B、7F、8、9N、9V、10A、11A、12F、14、15B、17F、18C、19A、19F、20、22F、23F和33F,即23價肺炎球菌多糖疫苗。這23個血清型對美國、法國、中國等常見血清型的覆蓋率均在85％以上,可作為全球普遍使用的疫苗。已有實驗證明23價肺炎球菌多糖疫苗對控制和預防肺炎球菌感染，特別是老年人肺部感染,兒童中耳炎和腦膜炎有明顯的效果。

23價肺炎球菌多糖疫苗生產用菌種的檢定主要通過肺炎球菌的培養特性，革蘭氏染色，奧普脫欣，膽汁溶解，生化反應等實驗完成。而菌種的分型常用的方法是血清凝集和莢膜腫脹實驗，并且莢膜腫脹實驗也稱為肺炎球菌分型的金標準。但血清凝集和莢膜腫脹實驗所用標準血清費用昂貴，并且專業技術要求高，對結果的解釋帶有一定的主觀性，成為制約血清學分型技術普及應用的巨大障礙。此外，對于多種血清型共同攜帶的現象，莢膜腫脹實驗只能識別其中的優勢血清型，而無法同時識別多種血清型。