[發明專利]一種增殖培養基制作工藝

在審

• 申請號: 201710655250.2
• 申請日: 2017-08-03
• 公開（公告）號: CN109380113A
• 公開（公告）日: 2019-02-26
• 發明（設計）人: 王平
• 申請（專利權）人: 王平
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京易光知識產權代理有限公司 11596
• 代理人: 李韻

1.一種增殖培養基制作工藝，其特征在于：它采用如下的技術方案：

步驟一：大量元素母液制備：其采用如下的方法步驟：

1)取硝酸鉀KNO₃ 190g/L，硝酸銨NH₄NO₃ 165g/L，磷酸二氫鉀KH₂PO₄ 17g/L，硫酸鎂MgSO₄.7H₂O 37g/L，氯化鈣CaCl₂.2H₂O 44g/L；

2)將上述步驟1)的各物質分別置于攪拌杯中，加入蒸餾水徹底溶解，然后混合定容到1L，形成大量元素母液貯備液；

步驟二：微量元素母液制備：其采用如下的方法步驟：

1)取碘化鉀KI 0.083g/L，硼酸H₃BO₃ 0.62g/L，硫酸錳MnSO₄.4H₂O 2.23g/L，硫酸鋅ZnSO₄.7H₂O 0.86g/L，鉬酸鈉Na₂MoO₄.2H₂O 0.025g/L，硫酸銅CuSO₄.5H₂O 0.0025g/L，氯化鈷CoCl₂ 0.0025g/L；

2)將步驟1)中的各物質分別置于攪拌杯中，加入蒸餾水徹底溶解，然后混合定容到1L，形成微量元素母液貯備液；

步驟三：鐵鹽母液制備：其采用如下的方法步驟：

1)取乙二胺四乙酸二鈉Na₂.EDTA 3.73g/L，硫酸亞鐵FeSO₄.7H₂O 2.78g/L；

2)將步驟1)中的各物質分別置于攪拌杯中，加入蒸餾水徹底溶解，然后混合定容到1L，形成鐵鹽母液貯備液；

步驟四：有機成分母液制備：其采用如下的方法步驟：

1)取肌醇10g/L，甘氨酸0.2g/L，鹽酸硫胺素VB1 0.01g/L，鹽酸吡哆醇VB6 0.05g/L，煙酸VB5 0.05g/L；

2)將步驟1)中的各物質分別置于攪拌杯中，加入蒸餾水徹底溶解，然后混合定容到1L，形成有機成分母液貯備液；

步驟五：吲哚丁酸植物生長調節物質母液的制備：其采用如下方法步驟：

1)稱取吲哚丁酸10mg；

2)將吲哚丁酸用1mL的物質的量濃度為0.1mol/L的HCL溶液溶解，溶解過程需要水浴加熱，最后定容至100mL，得質量濃度為0.1mg/mL的吲哚丁酸植物生長調節物質母液；

或α-萘乙酸植物生長調節物質母液的制備：其采用如下方法步驟：

1)稱取α-萘乙酸10mg；

2)將α-萘乙酸用少量75％酒精溶液溶解，最后定容至100mL，得質量濃度為0.1mg/mL的α-萘乙酸植物生長調節物質母液；

步驟六：6-芐基嘌呤植物生長調節物質母液制備：其采用如下的方法步驟：

1)稱取6-芐基嘌呤10mg；

2)將6-芐基嘌呤用1mL的物質的量濃度為0.1mol/L的NaOH溶液溶解，溶解過程需要水浴加熱，最后定容至100mL，得質量濃度為0.1mg/mL的6-芐基嘌呤植物生長調節物質母液；

步驟七：在燒杯中放入一些蒸餾水，稱取7g左右瓊脂粉，放在電爐上加熱至沸騰，直到瓊脂粉溶化；

步驟八：用量筒或移液管，取步驟一中的大量元素母液貯備液1-15ml、步驟二中的微量元素母液貯備液1-15ml、步驟三中的鐵鹽母液貯備液1-15ml、步驟四中的有機成分母液貯備液1-15ml、步驟五中的吲哚丁酸植物生長調節物質母液0.01-5ml或步驟五中的α-萘乙酸植物生長調節物質母液0.1-5ml、步驟六中6-芐基嘌呤植物生長調節物質母液1-8ml，倒入燒杯中；

步驟九：稱取30g蔗糖倒入燒杯中，攪拌溶解，形成混合液；

步驟十：將燒杯中加蒸餾水，然后將混合液定容至1L；

步驟十一：用精密試紙或酸度計測定，用1mol/L的NaOH或1mol/LHCL調整PH至5.7-5.8；

步驟十二：稍微冷卻后，分裝入培養容器中，無蓋的培養容器要用封口膜或牛皮紙封口，用橡皮筋或繩子扎緊；

步驟十三：上步驟十二中的培養容器，放入消毒滅菌鍋滅菌，121℃滅菌20分鐘左右；

步驟十四：滅菌后從滅菌鍋中取出培養基，在室溫下自然冷卻后，形成成品培養基。