[發明專利]一種微生物發酵法生產的癸二酸及其制備方法

有效

• 申請號: 201710653289.0
• 申請日: 2017-08-02
• 公開（公告）號: CN107326051B
• 公開（公告）日: 2021-06-08
• 發明（設計）人: 徐敏;郝英利;張明陽;楊晨;李乃強;劉修才
• 申請（專利權）人: 上海凱賽生物技術股份有限公司;CIBT美國公司
• 主分類號: C12P7/64
• 分類號: C12P7/64;C08G63/12;C08G69/26;C12R1/74
• 代理公司: 北京律智知識產權代理有限公司 11438
• 代理人: 王瑩;于寶慶

1.一種癸二酸的制備方法，其特征在于，首先將熱帶假絲酵母(Candida tropicalis)進行種子培養，然后將所得種子接入發酵培養基，并加入癸烷開始發酵轉化得到發酵液，最后將所述發酵液純化即得；

其中，所述發酵培養基包括以下成分：葡萄糖25～40g/L、硝酸鉀1.2～2.5g/L、玉米漿2～5g/L、酵母膏1～3g/L、磷酸二氫鉀1.8～3.5g/L以及硫酸銨1.2～2g/L；

所述發酵轉化過程中相對溶氧維持在10～70％。

2.根據權利要求1所述的癸二酸的制備方法，其特征在于，將種子培養所得種子接入發酵培養基后培養菌體，當菌體稀釋三十倍后OD₆₂₀達到0.5以上時加入癸烷開始發酵轉化，在發酵轉化過程中，控制菌體稀釋三十倍后OD₆₂₀為0.3～0.8。

3.根據權利要求2所述的癸二酸的制備方法，其特征在于，在發酵轉化過程中，控制菌體稀釋三十倍后OD₆₂₀為0.4～0.7。

4.根據權利要求2所述的癸二酸的制備方法，其特征在于，在發酵轉化過程中，控制菌體稀釋三十倍后OD₆₂₀為0.4～0.5。

5.根據權利要求1所述的癸二酸的制備方法，其特征在于，所述發酵轉化過程中相對溶氧維持在40～70％。

6.根據權利要求1所述的癸二酸的制備方法，其特征在于，所述發酵轉化過程中pH值控制為5.0～8.0。

7.根據權利要求1所述的癸二酸的制備方法，其特征在于，所述發酵轉化過程中通過連續流加或者批次補加的方式控制發酵體系中癸烷的量大于等于1％(v/v)，發酵過程結束后控制所得發酵液中癸烷的量小于等于0.5％(v/v)。

8.根據權利要求1所述的癸二酸的制備方法，其特征在于，所述熱帶假絲酵母(Candida tropicalis)為熱帶假絲酵母CAT N145。

9.根據權利要求1-8任一項所述的癸二酸的制備方法，其特征在于，所述發酵液的純化過程依次包括以下步驟：

S1：通過膜過濾、板框過濾、離心分離中的一種或多種分離方式除雜得到癸二酸粗品；

S2：將所得的癸二酸粗品經過一次或多次結晶得到癸二酸晶體；以及

S3：將所得的癸二酸晶體洗滌、干燥后即得所述癸二酸。

10.根據權利要求9所述的癸二酸的制備方法，其特征在于，步驟S2所述的結晶包括水結晶和/或溶劑結晶。

11.根據權利要求10所述的癸二酸的制備方法，其特征在于，所述溶劑結晶采用的溶劑為乙醇、乙酸、乙酸乙酯、乙酸丁酯中的一種或多種。

12.根據權利要求11所述的癸二酸的制備方法，其特征在于，所述溶劑結晶采用的溶劑為乙酸，并控制所得的癸二酸晶體中乙酸含量低于500ppm。

13.根據權利要求12所述的癸二酸的制備方法，其特征在于，控制所得的癸二酸晶體中乙酸含量低于300ppm。

14.根據權利要求12所述的癸二酸的制備方法，其特征在于，所述癸二酸的熱穩定性大于等于95％。

15.根據權利要求12所述的癸二酸的制備方法，其特征在于，所述癸二酸的熱穩定性大于等于97％。