[發明專利]一種用于保護體外血液中核酸的保存劑及采血管

有效

• 申請號: 201710650279.1
• 申請日: 2017-08-01
• 公開（公告）號: CN109321561B
• 公開（公告）日: 2022-03-08
• 發明（設計）人: 張介中;韓典昂;杜洋;李艷秋;玄兆伶;李大為;梁峻彬;陳重建
• 申請（專利權）人: 安諾優達基因科技（北京）有限公司;浙江安諾優達生物科技有限公司;安諾優達（義烏）醫學檢驗有限公司
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明涉及一種用于保護體外血液中核酸的保存劑及采血管，具體的，按照百分比計，包括5～15重量％抗凝劑、2～40重量％防腐劑、0.74～0.79重量％滲透壓調節劑，及調節PH值至6.0～8.0的緩沖劑。使用本發明的保存劑，可有效防止細胞破裂釋放染色體DNA，維持外周血中游離DNA的整體穩定。

技術領域

本發明屬于基因檢測領域，具體涉及一種用于保護體外血液中核酸的保存劑及采血管。

背景技術

近年來，隨著生物醫學和臨床診斷技術的不斷發展，人們對于血液中循環游離DNA在疾病的早期診斷、預后、監測等方面的研究也越來越多，例如無創產前基因檢測和腫瘤診斷等。

無創產前基因檢測是對孕婦血漿中游離胎兒DNA進行的診斷，孕婦從懷孕七周開始即可檢測到胎兒游離DNA，利用胎兒游離DNA可以早期、特異地進行產前篩查和診斷。

腫瘤診斷是對外周血中循環腫瘤DNA(ctDNA)進行測序，對ctDNA的檢測可作為腫瘤復發及耐藥動態檢測的有利工具。

無創產前基因檢測和腫瘤診斷都以外周血中的游離DNA為檢測目標。在檢測過程中游離DNA的含量是一個關鍵的指標，很大程度上會影響檢測結果的可靠性。基因檢測的高成本和高度專業性使得樣本的獲得和檢測通常相分離，需要檢測的樣本大多需要經過短途或者長途的運輸才能進入到檢測流程。由于血液中游離DNA具有含量低、半衰期短等特點，加之天氣情況和地理條件等因素，使得運輸過程中的血液保存尤為困難。目前商業化的游離核酸采血管，在運輸條件下通常只能保存3～4天，這就需要對樣本的運輸時間做嚴格限制。若運輸期限內不能到達檢測目的地進行檢測，會導致游離DNA的降解或者有核細胞的破裂，對以游離DNA為檢測目標的檢測結果造成影響或無法獲得檢測結果。

因此，有必要開發一種在運輸條件下能夠為血液提供穩定環境，防止細胞破裂，游離DNA降解，維持血液原狀態的保存劑，以消除對后續檢驗檢測的不利影響。

發明內容

鑒于上述現有技術中存在的問題，本發明的目的在于提供一種用于保護體外血液中核酸的保存劑及采血管。

本發明人為解決上述問題進行了深入研究，通過研發及實驗發現：對抗凝劑、防腐劑、滲透壓調節劑、緩沖劑按照比例進行混合，可長時間維持血液的原狀態，保護血漿中游離DNA，從而完成本發明。

1.一種用于保護體外血液中核酸的保存劑，包括：5～15重量％的抗凝劑、2～40重量％的防腐劑、0.74～0.79重量％的滲透壓調節劑、及調節PH值至6.0～8.0的緩沖劑。

2.根據項1所述的保存劑，其中，所述保存劑包括7～11重量％的抗凝劑，3～20重量％的防腐劑，0.77～0.79重量％的滲透壓調節劑，及調節PH值至7.2的緩沖劑。

3.根據項1或2所述的保存劑，其中，所述保存劑與血液的體積比為1:40～1:60。

4.根據項1或2所述的保存劑，其中，所述保存劑與血液的體積比為1:45～1:55。

5.根據項1或2所述的保存劑，其中，所述抗凝劑選自乙二胺四乙酸鉀鹽、乙二胺四乙酸鈉鹽、檸檬酸鈉、肝素及枸櫞酸納中的一種或多種組合。

6.根據項1或2所述的保存劑，其中，所述防腐劑選自雙咪唑烷基脲、咪唑烷基脲、1,3-二氯-5，5-二甲基乙內酰脲、鈉羥甲基甘氨酸、二羥甲基尿、2-溴-2-硝基-1,3-二醇、惡唑烷、鈉羥甲基甘氨酸及金剛烷季銨中的一種或多種組合。

7.根據項1或2所述的保存劑，其中，所述緩沖劑選自磷酸二氫鉀，磷酸二氫鈉、磷酸氫二鉀、磷酸氫二鈉的一種或多種組合。

8.根據項1或2所述的保存劑，其中，所述滲透壓調節劑選自氯化鈉、氯化鉀、氯化銨的一種或多種組合。