[發明專利]一種基于SPR的多種毒品檢測芯片的制備方法

在審

• 申請號: 201710649618.4
• 申請日: 2017-08-02
• 公開（公告）號: CN107478613A
• 公開（公告）日: 2017-12-15
• 發明（設計）人: 王鵬娟;孟凡偉;余杰
• 申請（專利權）人: 杭州晶百檢測技術有限公司
• 主分類號: G01N21/552
• 分類號: G01N21/552
• 代理公司: 北京慕達星云知識產權代理事務所(特殊普通合伙)11465
• 代理人: 王鵬

1.一種基于SPR的多種毒品檢測芯片的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

1)準備載體材料；

2)在載體材料上鍍一層金膜，金膜厚度范圍在40～45nm，并將鍍有金膜的載體材料浸泡在巰基烷酸中制得羧基芯片；

3)將羧基芯片的表面與EDC/NHS混合液充分接觸，活化羧基芯片表面的羧基基團制得活化羧基芯片；

4)將活化羧基芯片與多種毒品合成抗原溶液充分接觸，使多種毒品合成抗原偶聯到羧基芯片上；

5)將乙醇胺溶液與完成多種毒品合成抗原偶聯的羧基芯片充分反應，封閉未反應的羧基位點，制得多種毒品檢測芯片。

2.根據權利要求1所述的一種基于SPR的多種毒品檢測芯片的制備方法，其特征在于，步驟2)中浸泡金膜的條件為：在溫度范圍40～45℃的條件下孵育的時間保持30～35min，或者在常溫條件下孵育的時間保持12h以上。

3.根據權利要求1所述的一種基于SPR的多種毒品檢測芯片的制備方法，其特征在于，步驟2)還包括在鍍金膜后對載體材料上的金膜進行超聲清洗處理以及沖洗干燥處理；超聲條件為：清洗介質選用乙醇溶液，溫度條件為室溫，超聲強度為55-60％、超聲時間保持5min以上；沖洗干燥處理條件為：選用去離子水沖洗，沖洗之后用氮氣吹干。

4.根據權利要求1至3任一項所述的一種基于SPR的多種毒品檢測芯片的制備方法，其特征在于，在步驟2)與步驟3)之間還包括：在羧基芯片表面覆蓋PDMS，PDMS開設通道，通道有多條，通道兩端分別為進樣口和出樣口，并且通道在經過步驟3)、步驟4)和步驟5)處理之后制成檢測通道。

5.根據權利要求1所述的一種基于SPR的多種毒品檢測芯片的制備方法，其特征在于，步驟3)中EDC/NHS混合液為濃度400mM的EDC溶液和濃度100mM的NHS溶液按照等體積混合所得的溶液。

6.根據權利要求1所述的一種基于SPR的多種毒品檢測芯片的制備方法，其特征在于，步驟3)對羧基芯片進行活化的EDC/NHS混合液的體積在200μL以上。

7.根據權利要求6所述的一種基于SPR的多種毒品檢測芯片的制備方法，其特征在于，對采用EDC/NHS混合液活化后的羧基芯片通入PBS進行沖洗，沖洗流速為20μL/min。

8.根據權利要求1所述的一種基于SPR的多種毒品檢測芯片的制備方法，其特征在于，步驟4)中多種毒品合成抗原溶液的體積在100μL以上。

9.根據權利要求1所述的一種基于SPR的多種毒品檢測芯片的制備方法，其特征在于，在步驟4)和步驟5)之間還包括：對偶聯的羧基芯片通入PBS進行沖洗，沖洗流速為20μL/min。

10.根據權利要求1-3、5-9任一項所述的一種基于SPR的多種毒品檢測芯片的制備方法，其特征在于，步驟5)中封閉合成抗原偶聯的羧基芯片的未反應羧基位點的具體操作為通入濃度為1M、體積為200μL、PH＝8.5的乙醇胺溶液，完成之后再通入PBS進行沖洗。