[發明專利]一種蛹蟲草復壯育種工藝

在審

• 申請號: 201710644652.2
• 申請日: 2017-08-01
• 公開（公告）號: CN109526537A
• 公開（公告）日: 2019-03-29
• 發明（設計）人: 王弘
• 申請（專利權）人: 遼寧弘僑生物科技股份有限公司
• 主分類號: A01G18/00
• 分類號: A01G18/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種蛹蟲草復壯育種工藝，具體步驟如下：將退化的蛹蟲草菌株進行活化培養；將活化后的蛹蟲草菌株接種于搖瓶培養基中培養后接種于小麥或大米栽培培養基上培養；選擇子實體截取尖端懸掛于栽培培養基瓶蓋上培養，至培養基表面孢子萌發透徹，取出子實體尖端，繼續培養30?40d；將培養成熟的蛹蟲草采摘烘干，檢測其主要有效成分蟲草素，直至性狀穩定即作為栽培原種使用。本發明不必使用孢子收集器，簡化操作，節約了育種成本；其次，由于是單孢子純化復壯，因此可保證菌種的純度，定向篩選出性狀穩定的優良菌種，作為栽培原種，適用于由于自發突變以及環境因素不適宜而導致菌種退化的菌株復壯。

技術領域

本發明涉及退化食用菌菌株復壯技術領域，具體是一種蛹蟲草復壯育種工藝。

背景技術

栽培食用菌，需要獲得高產，菌株是關鍵。蛹蟲草為子囊菌亞門，麥角菌目，麥角菌科、蟲草屬的模式種。蛹蟲草又名北冬蟲夏草、北蛹蟲草，是冬蟲夏草的同屬近緣種，其有效組分與冬蟲夏草類似，含有核苷類、多糖類、甾醇類以及SOD酶等，且蟲草素含量更是高于冬蟲夏草，具有提高機體免疫力、抗腫瘤、防衰老、保護心肺組織、鎮靜催眠等多種藥理作用。因此，蛹蟲草作為冬蟲夏草替代品用在保健藥品和食品上，市場需求量大。

近些年來，我國人工栽培蛹蟲草的關鍵技術得以突破，使得大規模人工培養蛹蟲草得以實現。然而在生產栽培和實踐過程中，必然會遇到菌種的衰退或退化問題，使菌種的優良性狀在一定程度上衰退或喪失。蛹蟲草菌株的衰退主要表現在，菌絲生長速度減慢，菌絲稀疏，子實體產生率低或子實體個體矮小，畸變，發酵過程中，所需代謝產物的產量大幅降低等現象。

導致微生物菌株的衰退是多方面原因引起，可以是由自發突變的量變到質變的產生，可以是由環境因素不適宜導致發生變異，或者是由它種微生物的侵襲所導致，或者保藏方式不當，一味的移接、傳代，而使群體中的負變異不斷擴大等諸方面原因所造成。退化具體表現為：出現菌絲稀疏、生長速度變慢、粉孢子增多、子實體形成率低、畸形量多、代謝產物蟲草素的含量降低等現象。

微生物菌株衰退后，需要采取復壯的方法來恢復其原有的優良性狀，通常采用的方法是進行純種分離后測定其典型性狀、生產性能等指標，從已衰退的群體中篩選出少數尚未退化的個體，或通過其它的實驗手段進行復壯，使退化菌株恢復原有優良性狀。

現階段，食用菌的復壯主要方法有以下幾種：

1.組織分離：是將退化菌株出菇后，選擇相對出菇時間早，子實體外觀健壯，抗病能力強等性狀的子實體采摘下來，在無菌條件下用PDA培養基進行組織分離。分離獲得的菌株，經生物學性能測定，選擇出優良性狀的菌株，進行出菇試驗，若出菇后的子實體能恢復原有性狀，將其分離后的菌株可作為后續栽培原種使用；若出菇后的子實體還未回復原有性狀，則必須再次進行組織分離復壯。

2.菌絲純化與尖端菌絲分離：挑取健壯的菌絲體頂端部分，進行純化培養，使菌絲恢復以保持菌種的純度，使菌種恢復原來生命力和優良性狀，達到復壯的目的。

3.有性孢子分離篩選：選擇形態好，生長健壯的八成熟的子實體，采用孢子收集器收集有性孢子，進行多孢或單孢分離培養。獲得的單核菌絲，還需和另一可親和的單核菌絲雜交后形成雙核菌絲，再進行出菇培養。孢子分離需要反復試驗，出菇性能好的，才能作為優良菌株投入生產栽培中。

在蛹蟲草工廠化栽培的過程中如何解決菌種衰退，菌絲體生長速度減慢，菌絲稀疏，粉孢子量增多，子實體形成率降低或子實體個體矮小，畸形以及發酵過程中，所需代謝產物的產量大幅降低等問題，己經成為蛹蟲草工廠化栽培的關鍵問題。

發明內容

本發明的目的在于提供一種簡單易行、效果顯著的蛹蟲草復壯育種工藝，以解決上述背景技術中提出的問題。

為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：

一種蛹蟲草復壯育種工藝，具體步驟如下：