[發明專利]一種治療奶牛乳房炎的中藥腐植酸飼料及其制備方法

在審

• 申請號: 201710644504.0
• 申請日: 2017-08-01
• 公開（公告）號: CN107494936A
• 公開（公告）日: 2017-12-22
• 發明（設計）人: 于長青;劉建偉
• 申請（專利權）人: 北京斯隆生物技術有限責任公司
• 主分類號: A23K50/10
• 分類號: A23K50/10;A23K10/12;A61K36/78;A61P15/14;A61P31/04;C12N1/20;A61K35/747;A61K35/742;A61K35/02;C12R1/125;C12R1/10;C12R1/25
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1.一種治療奶牛乳房炎的中藥腐植酸飼料及其制備方法，其特征在于：制備方法為：

步驟一：制備培養基

將按重量分計的黃芪30-60份，蒲公英30-50份，魚腥草10-40份，腐植酸鈉10-30份通過40-80目篩子，將過篩后的上述物質與豆粕粉6-10份，玉米粉6-10 份，水120-180份攪拌混合均勻制備成培養基；

步驟二：制備中藥腐植酸產品

然后用蒸汽對培養基進行滅菌，100-135℃滅菌15-30分鐘，之后對培養基進行冷卻到28℃-35℃培養溫度；將微生物混合發酵液接種到培養基上，接種比例為0.9-1.2:0.05-0.2，先進行好氧發酵，發酵條件為攪拌速度 160-200r/min，開始通氣比調至 1 ：0.4-0.7，培養期間灌壓要保持在 0.03-0.06pa ，調通氣量為15m3/h和攪拌速度為200r/min，使溶氧相對值 20%-40%，發酵時間 24-48 小時，發酵溫度 32-37℃； 然后進行厭氧發酵，發酵條件為靜置發酵，發酵時間48-72小時，發酵溫度32℃-37℃，每5-7小時攪 拌 0.5-3 分鐘 ；厭氧發酵結束得到降解的中藥腐植酸發酵品，經低溫（＜100℃）干燥，水分不高于15%，制得中藥腐植酸產品；

步驟三：將步驟二所得的中藥腐植酸產品50-90份與酵母細胞壁10-40份按重量比配比即得。

2.根據權利要求1所述的一種治療奶牛乳房炎的中藥腐植酸飼料及其制備方法，其特征在于：所述微生物混合發酵液由枯草芽孢桿菌發酵液、地衣芽孢桿菌發酵液、植物乳桿菌發酵液、按重量比40-60％∶ 40-60％∶ 10-15％的比例混合而成。

3.根據權利要求1或2所述的一種微生物降解腐植酸飼料及其制備方法，其特征在于：所述的微生物混合發酵液，其生產工藝如下 ：

A：枯草芽孢桿菌發酵液的生產 ：

1)固體培養基為 ： 葡萄糖 1-3％、蛋白胨1-3％、 酵母膏 0.3-0.6％、瓊脂 1-4％，蒸餾水90%—97%，調節培養基pH為6.5- 7.0、 110-120℃滅菌 16-20 分 鐘 ； 培養條件 ：放入 25-35℃恒溫培養箱中培養22-26h ；

2) 將上述所得物質進行搖瓶培養，培養基為 ： 葡萄糖 1-3％、蛋白胨 0.5-2％、酵母膏 0.3-0.8％，水94—99%，調節搖瓶培養基pH 為 6.5-7.0、110-120℃滅菌 16-20 分 鐘 ；培養條件 ： 在上述所得菌種接入搖瓶，放入 25-35℃恒溫搖床中， 180-230r/ min 振蕩培養22-26h ；

3)將上述所得物質進行種子罐、發酵罐擴繁 ： 培養基為 ： 豆粕0.5-1.3％、玉米0.2-0.8％、蔗糖1-3％、蛋白胨0.5-1.2％、 酵母膏 0.3-0.8％、磷酸二氫鉀0.05-0.8％、硫酸銨 0.1-0.3％、氯化鈉 0.02-0.05％、消泡劑 0.02-0.07％，水90-98%，培養基起始 pH ＝ 7.0-7.5、 115-130℃滅菌 20-40 分鐘 ； 培養條件 ：搖瓶到種子罐接種量及種子罐到發酵罐按 3-7％接種，種子罐培養時間為 22-26h，發酵罐培養時間為 30-40h ；活菌數不低于3.0×10⁹cfu/ml；

B：地衣芽孢桿菌發酵液的生產 ：

1)固體培養基為 ：蛋白胨8-12%, 牛肉膏 1-5%, NaCl 3-7%, 瓊脂12-18%, 蒸餾 水 58%—76%, 調節培養基pH7.0-7.5，105-125℃滅菌15-20 分鐘 ； 培養條件 ：放入 30-35℃恒溫培養箱中培養 22-24h ；

2) 將上述所得物質進行搖瓶種子培養 ：培養基為蛋白胨8-12%, 牛肉膏1-5%, NaCl 3-7%, 瓊脂12-18%,蒸餾 水 58%—76%, 調節培養基pH7.0-7.5，105-125℃滅菌15-20 分鐘 ； 培養條件 ：放入 30-35℃恒溫培養箱中培養 22-24h ；培養條件 ： 將上述所得菌種接入搖瓶，放入30-35℃恒溫搖床中， 180-220r/min 振蕩培養22-26h ；

3) 種子罐、發酵罐擴繁培養 ： 培養基為 ： 豆粕 2-7％、糖蜜 0.5-1.5％、蛋白胨 0.3-0.8％、酵母膏 0.1-0.5％、磷酸二氫鉀0.05-0.2％、硫酸銨 0.05-0.5％、氯化鈉 0-0.08％、豆油 0.05-0.25％、消泡劑 0-0.1％，水89—97%，調節培養基 pH＝6.5-7.5、 115-125℃滅菌25-35分鐘 ； 培養條件 ： 搖瓶到種子罐及種子罐到發酵罐接種量按3-7％接種，種子罐培養時間 為 22-26h，發酵罐培養時間為32-40h ；活菌數不低于3.0×10⁹ cfu/ml；

C：植物乳桿菌發酵液的生產 ：

1)固體培養基為 ： 葡萄糖 0.5-1.5％、蛋白胨 0.5-1.5％、酵母膏 0.1-0.8％、牛肉膏 0.1-0.8％、磷酸二氫鉀0.05-0.15％、瓊脂 1-3％，水93%-98%，調節培養基pH值到6.5-7.0、 110-120℃滅菌 15-25 分鐘 ； 培養條 件 ：放入 30-35℃恒溫培養箱中厭氧培養 22-24h ；

2) 搖瓶種子培養 ： 培養基為 ：葡萄糖 0.5-1.5％、蛋白胨 0.5-1.5％、酵母膏 0.1-0.8％、牛肉膏 0.1-0.8％、磷酸二氫鉀0.05-0.15％，瓊脂 1-3％，水93%-98%，調節培養基pH值到6.5-7.0、 110-120℃滅菌15-25分鐘 ； 培養條件 ： 將上述所得菌種接入搖瓶 厭氧培養22-26h ；

3) 種子罐、發酵罐擴繁培養 ： 培養基為 ： 豆粕 0.5-1.5％、玉米 0.2-0.7％、蔗糖0.5-1.5％、蛋白胨 1-2％、酵母膏0.2-0.7％、磷酸二氫鉀0.1-0.5％、硫酸銨0.1-0.5％、乙酸鈉0.3-0.8％、檸檬酸三鈉0.1-0.5％、吐 溫80 0.05-0.2％、硫酸鎂 0.01-0.05％、豆油 0.1-0.3％、消泡劑 0.03-0.07％，水93%-97%，起始 pH ＝6.5-7.0、 110-125℃滅菌 25-40分 鐘 ； 培養條件 ： 搖瓶到種子罐及種子罐到發酵罐接種量按 3-7％接種，種子罐培養時間為 22-24h，發酵罐培養時間為 30-40h，活菌數不低于2.0×10⁹ cfu/ml。

4.根據權利要求1所述的一種治療奶牛乳房炎的中藥腐植酸飼料及其制備方法，其特征在于：所述的中藥腐植酸產品包括：培養基和微生物混合發酵液，其比例為0.9-1.2:0.05-0.2；所述的培養基包括：將按重量分計的黃芪30-60份，蒲公英30-50份，魚腥草10-40份，腐植酸鈉10-30份、豆粕粉6-10份，玉米粉6-10 份，水120-180份。