[發明專利]一種光熱抗菌劑多肽/Au/Fe3

有效

• 申請號: 201710636468.3
• 申請日: 2017-07-31
• 公開（公告）號: CN107456576B
• 公開（公告）日: 2020-11-20
• 發明（設計）人: 劉磊;張杰;馮永海;陳清玉;董明東
• 申請（專利權）人: 江蘇大學
• 主分類號: A61K47/62
• 分類號: A61K47/62;A61K41/00;A61K47/42;A61K47/02;A61P31/04
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1.一種多肽/Au/Fe₃O₄核殼殼納米復合光熱劑的制備方法，其特征在于按照以下步驟進行：

步驟1、制備Fe₃O₄ NPs：四氧化三鐵納米顆粒通過高溫還原分解法制得，具體步驟如下：稱取乙酰丙酮鐵（Fe(acac)₃）加入到三頸燒瓶中，然后量取二芐醚，油胺，乙醇一起加入到該燒瓶中，然后在110℃下攪拌1h進行脫水；隨后將溫度升高到300℃，繼續攪拌2h；結束后自然冷卻至室溫，然后8000rpm離心得到黑色產物，利用強磁鐵對產物進行己烷，乙醇，水各洗滌三次；然后放置于60℃烘箱干燥12h；步驟2、制備Au/Fe₃O₄核殼復合材料：稱取步驟1中所制備的Fe₃O₄ NPs 在冰浴中重新分散到蒸餾水中，得到濃度為250μg/mL的分散液；然后加入氯金酸（HAuCl₄）溶液，同時加入碳酸鈉（Na₂CO₃）溶液，攪拌10-15min；接著加入硼氫化鈉（NaBH₄）溶液，繼續攪拌10-15min；最后利用強磁鐵，用蒸餾水對產物進行多次洗滌，然后放置于60℃烘箱干燥12h；步驟3、制備多肽/Au/Fe₃O₄核殼殼復合材料：首先將對細菌具有很好選擇性的多肽溶解到三（羥甲基）氨基甲烷（Tris-HCl，TBS）緩沖溶液中，得到濃度為0.1mg/mL的多肽溶液；然后稱取0.01g步驟2中制備的Au/Fe₃O₄分散到該溶液中；最后利用磁鐵用TBS緩沖溶液對產物多肽/Au/Fe₃O₄進行洗滌；

乙酰丙酮鐵與二芐醚的摩爾比為1:25，二芐醚，油胺和乙醇的體積比為1:1:5；

氯金酸溶液的濃度為5 mg/mL，碳酸鈉溶液的濃度為21.2 mg/mL，硼氫化鈉溶液的濃度為0.5 mg/mL；

Fe₃O₄ NPs和氯金酸的質量比為5:3；氯金酸，碳酸鈉和硼氫化鈉溶液的體積比為6:1:5；

細菌為大腸桿菌E.coil O157:H7，多肽的氨基酸序列為GLHTSATNLYLHGGGC（如SEQ IDNO.1）；多肽與Au/Fe₃O₄的質量比為1:10。

2.根據權利要求1所述的一種多肽/Au/Fe₃O₄核殼殼納米復合光熱劑的制備方法所得的納米復合光熱劑的應用，用于光熱殺菌，其特征在于按照下述步驟進行：稱取多肽/Au/Fe₃O₄分散到蒸餾水中，并將其稀釋成100-500μ g/mL的溶液；將體積比為1：50的吸光度為0.1的菌液和多肽/Au/Fe₃O₄分散液混合，然后靜置30-40min后用一定功率的近紅外光照射一段時間；將光照后的菌液用磷酸鹽緩沖液稀釋10000倍，取100 μL稀釋后的懸浮液涂到LuriaBertani（LB）固體培養基上，在37 ℃培養箱中培養12 h，計算菌落數，以此計算殺菌率；

所用近紅外光的波長為808nm；

所用近紅外光的功率為2-5W/cm²；

近紅外光照射的時長為100-300s。