[發(fā)明專(zhuān)利]一株大腸桿菌抗腫瘤靶向工程菌株及其構(gòu)建方法與應(yīng)用有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201710631380.2 | 申請(qǐng)日： | 2017-07-28 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN107574138B | 公開(kāi)（公告）日： | 2020-09-15 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 夏立秋;何戀;丁學(xué)知;孫運(yùn)軍;胡勝標(biāo) | 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人： | 湖南師范大學(xué) |
| 主分類(lèi)號(hào)： | C12N1/21 | 分類(lèi)號(hào)： | C12N1/21;C12N15/70;C12N15/12;A61K48/00;A61K38/17;A61P35/00;C12R1/19 |
| 代理公司： | 長(zhǎng)沙星耀專(zhuān)利事務(wù)所(普通合伙) 43205 | 代理人： | 寧星耀 |
| 地址： | 410081 湖*** | 國(guó)省代碼： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 大腸桿菌 腫瘤 靶向 工程 菌株 及其 構(gòu)建 方法 應(yīng)用 | ||
1. 一株大腸桿菌抗腫瘤靶向工程菌株，其特征在于，該大腸桿菌抗腫瘤靶向工程菌株EcN (Tum-5) 保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，菌種保藏號(hào)為C CTCC NO：M 2017345。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的大腸桿菌抗腫瘤靶向工程菌株，其特征在于，所述大腸桿菌抗腫瘤靶向工程菌株能可溶性表達(dá)和分泌性表達(dá)腫瘤抑素Tumstatin的抗腫瘤血管生成活性區(qū)域Tum-5，并能特異性地靶向腫瘤低氧區(qū)域。
3.一種如權(quán)利要求1所述的大腸桿菌抗腫瘤靶向工程菌株的構(gòu)建方法，其特征在于，包括以下步驟：
（一）利用PCR拼接獲得Tum-5基因
根據(jù)GenBank中登錄的登記號(hào)為 AF258351.1的
（二）Tum-5誘導(dǎo)表達(dá)載體的構(gòu)建及鑒定；
（三）Tum-5蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)、純化及鑒定；
（四）大腸桿菌抗腫瘤靶向工程菌株EcN (Tum-5)的構(gòu)建。
4.如權(quán)利要求3所述的大腸桿菌抗腫瘤靶向工程菌株的構(gòu)建方法，其特征在于，步驟（四）中，所述構(gòu)建的步驟為，將低氧啟動(dòng)子Pvhb、SUMO促溶標(biāo)簽、抗血管生成因子Tum-5，通過(guò)重疊PCR技術(shù)獲得包含三段基因序列的PCR產(chǎn)物，再利用酶切連接的方法將該P(yáng)CR產(chǎn)物連接到載體pET-28a，電擊轉(zhuǎn)化
5.如權(quán)利要求1或2所述的大腸桿菌抗腫瘤靶向工程菌株在制備靶向抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
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