[發明專利]一種海帶多糖?鉻配合物的制備方法及其應用

在審

• 申請號: 201710623020.8
• 申請日: 2017-07-27
• 公開（公告）號: CN107266601A
• 公開（公告）日: 2017-10-20
• 發明（設計）人: 李清祿;吳楠;李宇翔;滕春福
• 申請（專利權）人: 福建農林大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A61K31/715;A61P37/02;A61P39/06;A23L33/105
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司35100
• 代理人: 蔡學俊

1.一種海帶多糖-鉻配合物的制備方法，其特征在于：海帶多糖與鉻在一定條件下自組裝反應形成配合物，具體包括如下步驟：

（1）海帶粗多糖的提純

（A）胰蛋白酶液的制備：取1g胰蛋白酶，用pH5.8的NaHPO₃-NaH₂PO₃緩沖液溶解，精確定容至100ml，酶液終濃度為l0mg/ml，pH5.98；

（B）取100ml濃度為100mg/ml的海帶粗多糖液和40ml的胰蛋白酶液混合，37℃水浴5h后加入28ml pH7.0的10wt％H₂O₂溶液反應過夜，次日，加入42ml的sevage溶液，放在磁力攪拌儀上劇烈震蕩20min，裝入離心管中以4000r/min破乳后倒入分液漏斗中靜置分層，棄去下層有機相及中間蛋白質層，再取上層水相加入42ml sevage溶液，重復以上操作直至中間界面無雜蛋白為止；

（C）在步驟（B）去蛋白后的多糖濾液中加入兩倍體積量的無水乙醇，靜置12 h后倒入離心管以3500 r/min的轉速離心10min后取沉淀，沉淀分別用95wt％的乙醇、無水乙醇、丙酮各清洗3遍，醇沉洗滌后濾渣加適量蒸餾水，充分復溶后移入透析袋中，放入蒸餾水中透析24 h，透析完畢后向糖液中加入兩倍體積量的乙醇醇沉，離心取其沉淀部分同樣用乙醇和丙酮洗滌后放入冷凍干燥機中干燥，干燥后得海帶多糖純品；

（2）海帶多糖-鉻配合物的制備

取2.0 g純化后的海帶多糖溶于100ml 去離子水，70℃水浴，邊攪拌邊滴加1mol/L CrCl₃溶液，滴至有渾濁出現，再滴加3-5滴后即停止滴加，滴加過程中維持溶液的pH9，然后讓反應液繼續70℃水浴保溫1h，取出反應液，冷卻至室溫后倒入離心管中以6000r/min轉速離心8min，取上清液，加入兩倍體積量95wt%乙醇一段時間后再次離心，取沉淀，沉淀用無水乙醇、丙酮洗滌后冷凍干燥，得到海帶多糖-鉻配合物的粗品；

（3）海帶多糖-鉻配合物的純化

將海帶多糖-鉻配合物粗品用少量去離子水完全溶解后裝入透析袋除鹽，透析24h后，取出透析袋內的溶液并加入兩倍體積量的95wt%乙醇，放置一段時間使海帶多糖-鉻配合物充分析出后離心，收集沉淀，用無水乙醇、丙酮洗滌，最后冷凍干燥得到純化后的海帶多糖-鉻配合物。

2.如權利要求1所述的制備方法制得的海帶多糖-鉻配合物，其特征在于：純化后的海帶多糖-鉻配合物中Cr元素的含量為4.2wt%。

3.如權利要求2所述的海帶多糖-鉻配合物在制備抗衰老、免疫調節劑的藥物和保健食品中的應用。