[發明專利]一種苦蘵快速培養的方法

在審

• 申請號: 201710619595.2
• 申請日: 2017-07-26
• 公開（公告）號: CN107439375A
• 公開（公告）日: 2017-12-08
• 發明（設計）人: 楊洋
• 申請（專利權）人: 蘭溪市順光園藝技術有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京華仲龍騰專利代理事務所(普通合伙)11548
• 代理人: 李靜

技術領域

本發明涉及組織培養技術領域，特別是涉及一種苦蘵快速培養的方法。

背景技術

苦蘵（PhysalisangulataL），為茄科（Solanaceae）酸漿屬（Physalis）植物，古代又稱蘵、蘵草、小苦耽等，《爾雅》注：“蘵草，葉似酸漿，花小而白，中心黃，江東以作葅食?！薄侗静菥V目》卷16酸漿條記載：“酸漿、苦蘵，一種二物也，但大者為酸漿，小者為苦蘵，以此為別，敗醬亦名苦蘵，與此不同?！笨嗵u在中國主要分布于華東、華中、華南及西南，日本、印度、澳大利亞和美洲等亦有分布，常生于海拔500-1500m的山谷林下及村邊路旁?？嗵u的宿萼、帶宿萼的果實、根及全草均可入藥，夏、秋采集，鮮用或干用，具有清熱、利尿、解毒之功，用于治療感冒、肺熱咳嗽、咽喉腫痛、齦腫、濕熱黃疸、痢疾、水腫、熱淋、天皰瘡、疔瘡等癥。從苦蘵中分離得到多種化合物，包括甾體類（主要為酸漿苦味素類和withanolide類）、甾醇類、有機酸、多糖等，具有抗腫瘤、免疫調節、抗炎、抗菌、抗氧化等活性。

苦蘵常規的繁殖方法主要用種子繁殖，每年6月種子成熟后進行采收、陰干，來年3月下旬春播。播種繁殖，種子隨采隨播，方法簡單，管理方便，繁殖系數大，但是由于苦蘵種子很小，不易播種，一般都是與沙土混合均勻播種，但是播種很不均勻，種子繁殖出芽率低、發芽時間長而不整齊、生長緩慢且無法保持母體優良性狀。組織培養采用的植物材料完全是在人為提供的培養基和小氣候環境條件下進行生長，擺脫了大自然中四季、晝夜的變化以及災害性氣候的不利影響，且條件均一，對植物生長極為有利，便于穩定地進行周年培養生產。此外，由于植物材料能按幾何級數繁殖生產，因此總體來說成本低廉，且能及時提供規格一致的優質種苗或脫病毒種苗，利于高度集約化和高密度工廠化生產，也利于 自動化控制生產，是未來農業工廠化育苗的發展方向。

現有技術如授權公告號為CN 104126507 B的中國發明專利，公開了一種大豆組織培養分化苗的生根方法，其所用的生根培養基為：B5、2.0-3.0%蔗糖、3mM MES、50-100mg/L天冬氨酰、100mg/L焦谷氨酸、25-50mg/L葉酸，培養基的pH為5.4-5.6，且B5的用量為1/4標準含量。該生根培養基使得再生植株苗生根的誘導率可以達到100%，但是該生根培養基生根時間較長，且培養基中無抑菌劑成分，不適合苦蘵培養。

發明內容

本發明的目的在于提供一種提高苦蘵發芽率和生根率，能夠使苦蘵快速繁殖，縮短苦蘵的繁殖周期，使繁殖后代整齊一致的苦蘵快速培養的方法。

本發明針對上述技術中提到的問題，采取的技術方案為：一種苦蘵快速培養的方法，包括種子無菌萌發、誘導愈傷組織及分化、生根培養，具體步驟為：

種子萌發：選用飽滿的苦蘵種子，滅菌后用無菌水沖洗干凈，然后均勻播種在1/2 MS培養基上，在22-28℃下培養至萌發出苦蘵小苗，該步驟屬于無菌萌發，培養基為種子的萌發提供了充足的營養條件，促進種子萌發，縮短萌發時間，能大大提高種子的發芽率和發芽整齊度，使得培養出的苦蘵小苗成功率高；

誘導愈傷組織及分化：取小苗的子葉，切去葉子兩端，然后接種在含有1-2mg/L 6-BA和0.5-0.8mg/L NAA的MS培養基上，在22-28℃下培養至得到2-4cm的苦蘵小苗，即可，該步驟中6-BA和NAA的加入能刺激子葉的細胞快速分裂成細胞團，形成愈傷組織，進而長成苦蘵小苗，縮短了誘導愈傷組織及分化的周期，提高了苦蘵組織培養的效率；

生根培養：將小苗剪下，轉接到根分化培養液中，在22-28℃下培養至得到主根為3-5條，根長3-5cm的苦蘵苗即可進行煉苗，然后移栽，該根分化培養液能大大提高苦蘵小苗的出根率，使出根整齊、根系細白、愈傷組織化程度輕，而且能有效控制苦蘵小苗褐變，使苦蘵小苗健壯、葉片深綠色，同時該培養液降低生根時間，大大提高了苦蘵組織培養的效率，且能防止爛根現象的發生，使經該根分化培養液培養的苦蘵小苗栽培成活率高、抗病害能力強。